Synergistic effects of electroacupuncture and bone marrow mesenchymal stem cell transplantation on rat intrauterine adhesion： an observation

WANG Zhao-xian; XIA Liang-jun; LIU Jing-yu; CUI Chu-ting; CHENG Jie; SHEN Jie; XIA You-bing

doi:10.13702/j.1000-0607.20230434

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Synergistic effects of electroacupuncture and bone marrow mesenchymal stem cell transplantation on rat intrauterine adhesion： an observation

更新时间：2023-12-25

- Synergistic effects of electroacupuncture and bone marrow mesenchymal stem cell transplantation on rat intrauterine adhesion： an observation
  封面论文
- Acupuncture Research Vol. 48, Issue 12, Pages: 1209-1217(2023)
- 作者机构：
  
  1.南京中医药大学针灸推拿学院·养生康复学院，南京 210023
  2.南京医科大学，南京 211166
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13702/j.1000-0607.20230434
  CLC： R245.9⁺7
- Received：25 May 2023，
  
  Revised：09 July 2023，
  
  Published：25 December 2023
- 稿件说明：
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王照弦,夏良君,刘静玉等.电针联合骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠宫腔粘连的协同效应观察[J].针刺研究,2023,48(12):1209-1217.

WANG Zhao-xian,XIA Liang-jun,LIU Jing-yu,et al.Synergistic effects of electroacupuncture and bone marrow mesenchymal stem cell transplantation on rat intrauterine adhesion： an observation[J].Acupuncture Research,2023,48(12):1209-1217.
王照弦,夏良君,刘静玉等.电针联合骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠宫腔粘连的协同效应观察[J].针刺研究,2023,48(12):1209-1217. DOI： 10.13702/j.1000-0607.20230434.

WANG Zhao-xian,XIA Liang-jun,LIU Jing-yu,et al.Synergistic effects of electroacupuncture and bone marrow mesenchymal stem cell transplantation on rat intrauterine adhesion： an observation[J].Acupuncture Research,2023,48(12):1209-1217. DOI： 10.13702/j.1000-0607.20230434.

摘要

目的

本研究旨在探讨电针联合骨髓间充质干细胞（BMSCs）移植对宫腔粘连（IUA）大鼠子宫内膜的影响，以及两者联合治疗修复子宫内膜的可能机制。

方法

成年未交配雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、细胞组和联合组，每组10只。采用机械搔刮联合脂多糖感染的双重损伤法建立大鼠IUA模型。造模成功后第1、3、7天，模型组大鼠尾静脉注射磷酸盐缓冲液，细胞组仅尾静脉注射BMSCs悬液进行BMSCs移植，联合组大鼠移植与细胞组等量的BMSCs并进行电针治疗，每日针刺“关元”、电针双侧“足三里”和“三阴交”20 min，持续3个动情周期。每组5只大鼠在干预结束后取子宫组织，采用HE染色检测大鼠子宫内膜厚度以及腺体数目；采用Masson染色检测子宫内膜纤维化面积；采用免疫组织化学法检测血管生成标志物血管内皮生长因子（VEGF），增殖细胞核抗原（PCNA），雌激素受体（ER）的表达；Western blot法检测容受性相关分子同源框蛋白A10（HoxA10）、白血病抑制因子（LIF）的蛋白表达量。每组剩余的5只大鼠在干预后合笼并通过胚胎着床数来评估子宫功能的恢复情况。

结果

与空白组相比，模型组大鼠的子宫内膜变薄（

0.001）、腺体数量减少（

0.001），子宫内膜纤维化面积增加（

0.001），子宫内膜组织中的VEGF、PCNA、ER阳性表达，子宫内膜容受性相关分子HoxA10和LIF的表达，子宫损伤侧的胚胎着床数均降低（

0.001）。与模型组相比，联合组以上指标均逆转（

0.001，

0.01）；细胞组的子宫内膜增厚（

0.001）、子宫内膜纤维化面积减少（

0.001）。与细胞组相比，联合组子宫内膜厚度增加（

0.01）、腺体数量增多（

0.05），子宫内膜纤维化面积减少（

0.05），子宫内膜中的VEGF、PCNA和ER阳性表达，子宫内膜HoxA10和LIF的表达，子宫损伤侧的胚胎着床数量均显著升高（

0.001，

0.05，

0.01），治疗效果较细胞组更好。

结论

电针联合BMSCs协同修复受损子宫内膜，促进子宫内膜形态的改善，减轻纤维化，促进血管生成和基质细胞增殖，提高子宫内膜的容受性，并最终有利于胚胎的着床。

Abstract

Objective

To investigate the effects of electroacupuncture（EA） combined with bone marrow mesen-chymal stem cells（BMSCs） transplantation on the endometrium of rats with intrauterine adhesions（IUA）， so as to explore the possible mechanisms underlying their combined therapeutic effects.

Methods

Forty adult female SD rats were randomly divided into control， model， cell， and combined groups. The IUA rat model was established using a dual injury method of mechanical scratching and lipopolysaccharide infection. After successful modeling， on days 1， 3， and 7， rats in the model group received tail vein injection of phosphate buffered solution， while rats in the cell group received tail vein injection of BMSCs suspension for BMSCs transplantation； and rats in the combined group received BMSCs transplantation combined with EA treatment （2 Hz/15 Hz， 1—2 mA）， targeting the “Guanyuan”（CV4）， bilateral “Zusanli”（ST36） and “Sanyinjiao”（SP6） for 20 min daily for 3 consecutive estrous cycles. After intervention， uterine tissue was collected from 5 rats in each group. Histological analysis was performed using hematoxylin and eosin staining to evaluate endometrial thickness and glandular number. Masson staining was used to assess endometrial fibrosis area. Immunohistochemistry was performed to detect the positive expressions of vascular endothelial growth factor（VEGF）， proliferating cell nuclear antigen（PCNA）， and estrogen receptor（ER）. Western blot analysis was conducted to determine the protein expressions of homeobox A10（HoxA10） and leukemia inhibitory factor（LIF）， both key regulators of endometrial receptivity. The remaining 5 rats in each group were co-housed with male rats， and the uterine function recovery was evaluated by assessing the number of embryo implantations.

Results

Compared with the control group， the model group showed thinning endometrium（

0.001）， decreased glandular number（

0.001）， increased endometrial fibrosis area（

0.001）， reduced positive expressions of VEGF， PCNA， ER， expressions of HoxA10 and LIF， and decreased embryo implantation number （

0.001） on the injured side of the uterus. Compared with the model group， the combined group showed a reversal of the aforementioned indicators（

0.001，

0.01）； the cell group exhibited thicker endometrium（

0.001） and reduced endometrial fibrosis area（

0.001）. Compared with the cell group， the combined group showed increased endometrial thickness（

0.01）， elevated glandular number（

0.05）， significantly decreased endometrial fibrosis area（

0.05）， enhanced positive expressions of VEGF， PCNA and ER， expressions of HoxA10 and LIF in the endometrium， and a significant increase in embryo implantation number （

0.001，

0.05，

0.01） on the injured side of the uterus， indicating better results than the cell group.

Conclusion

The combination of EA and BMSCs synergistically promotes the repair of damaged endometrium， improves endometrial morphology， reduces fibrosis levels， enhances vascular regeneration and matrix cell proliferation， improves endometrial receptivity， which ultimately facilitates embryo implantation.

关键词

Keywords

references

DI SPIEZIO SARDO A ， CALAGNA G ， SCOGNAMIGLIO M ， et al . Prevention of intrauterine post-surgical adhesions in hysteroscopy. A systematic review ［J］. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol ， 2016 ， 203 ： 182 - 192 .

CAPMAS P ， MIHALACHE A ， DUMINIL L ， et al . Intrauterine adhesions： what is the pregnancy rate after hysteroscopic management？［J］. J Gynecol Obstet Hum Reprod ， 2020 ， 49 （ 7 ）： 101797 .

MAROFI F ， VAHEDI G ， BIGLARI A ， et al . Mesenchymal stromal/stem cells： a new era in the cell-based targeted gene therapy of cancer ［J］. Front Immunol ， 2017 ， 8 ： 1770 .

PENG X B ， LI T ， ZHAO Y T ， et al . Safety and efficacy of amnion graft in preventing reformation of intrauterine adhesions ［J］. J Minim Invasive Gynecol ， 2017 ， 24 （ 7 ）： 1204 - 1210 .

SINGH N ， MOHANTY S ， SETH T ， et al . Autologous stem cell transplantation in refractory Asherman’s syndrome： a novel cell based therapy ［J］. J Hum Reprod Sci ， 2014 ， 7 （ 2 ）： 93 - 98 .

沈洁，高友玲，卢鸽，等 . 电针对卵巢储备功能下降患者子宫内膜容受性和IVF-ET妊娠结局的影响［J］. 中国针灸， 2022 ， 42 （ 8 ）： 879 - 883 .

SHEN J ， GAO Y L ， LU G ， et al . Effect of electroacupuncture on endometrial receptivity and IVF-ET pregnancy outcomes in patients with diminished ovarian reserve （in Chinese）［J］. Chinese Acupuncture & Moxibustion ， 2022 ， 42 （ 8 ）： 879 - 883 .

李春华，赵雅芳，嵇波，等 . 电针介入对痛经模型大鼠子宫微循环的影响［J］. 针刺研究， 2011 ， 36 （ 1 ）： 12 - 17 .

LI C H ， ZHAO Y F ， JI B ， et al . Effect of electroacupuncture on the uterine microcirculation in dysmenorrhea rats （in Chinese）［J］. Acupuncture Research ， 2011 ， 36 （ 1 ）： 12 - 17 .

MA S L ， LI D J ， FENG Y ， et al . Effects of electroacupuncture on uterine morphology and expression of oestrogen receptors in ovariectomised rats ［J］. Acupunct Med ， 2017 ， 35 （ 3 ）： 208 - 214 .

SO E W S ， NG E H Y . Acupuncture in reproductive medicine ［J］. Women’s Heath Lond Engl ， 2010 ， 6 （ 4 ）： 551 - 563 .

ZHENG C H ， HUANG G Y ， ZHANG M M ， et al . Effects of acupuncture on pregnancy rates in women undergoing in vitro fertilization： a systematic review and meta-analysis ［J］. Fertil Steril ， 2012 ， 97 （ 3 ）： 599 - 611 .

EMELYANOV A N ， BORISOVA M V ， KIRYANOVA V V . Model acupuncture point： bone marrow-derived stromal stem cells are moved by a weak electromagnetic field ［J］. World J Stem Cells ， 2016 ， 8 （ 10 ）： 342 - 354 .

SALAZAR T E ， RICHARDSON M R ， BELI E ， et al . Electroacupuncture promotes central nervous system-dependent release of mesenchymal stem cells ［J］. Stem Cells ， 2017 ， 35 （ 5 ）： 1303 - 1315 .

YUAN L W ， CAO J ， HU M Y ， et al . Bone marrow mesenchymal stem cells combined with estrogen synergistically promote endometrial regeneration and reverse EMT via Wnt/β- catenin signaling pathway ［J］. Reprod Biol Endocrinol ， 2022 ， 20 （ 1 ）： 121 .

中国针灸学会 . 实验动物常用穴位名称与定位第2部分：大鼠［J］. 针刺研究， 2021 ， 46 （ 4 ）： 351 - 352 .

China Institute of Acupuncture and Moxibustion . Nomenclature and location of commonly used acupoints in experimental animals. Part 2： rats （in Chinese）［J］. Acupuncture Research ， 2021 ， 46 （ 4 ）： 351 - 352 .

DU H L ， TAYLOR H S . Stem cells and reproduction ［J］. Curr Opin Obstet Gynecol ， 2010 ， 22 （ 3 ）： 235 - 241 .

ZHANG W B ， CHENG M J ， HUANG Y T ， et al . A study in vitro on differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells into endometrial epithelial cells in mice ［J］. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol ， 2012 ， 160 （ 2 ）： 185 - 190 .

SHI Q ， GAO J W ， JIANG Y ， et al . Differentiation of human umbilical cord Wharton’s jelly-derived mesenchymal stem cells into endometrial cells ［J］. Stem Cell Res Ther ， 2017 ， 8 （ 1 ）： 246 .

CERVELLÓ I ， GIL-SANCHIS C ， SANTAMARÍA X ， et al . Human CD133（+） bone marrow-derived stem cells promote endometrial proliferation in a murine model of Asherman syndrome ［J］. Fertil Steril ， 2015 ， 104 （ 6 ）： 1552 - 1560 .

LIU Y ， TAL R ， PLUCHINO N ， et al . Systemic administration of bone marrow-derived cells leads to better uterine engraftment than use of uterine-derived cells or local injection ［J］. J Cell Mol Med ， 2018 ， 22 （ 1 ）： 67 - 76 .

CAO Y ， SUN H X ， ZHU H ， et al . Allogeneic cell therapy using umbilical cord MSCs on collagen scaffolds for patients with recurrent uterine adhesion： a phase I clinical trial ［J］. Stem Cell Res Ther ， 2018 ， 9 （ 1 ）： 192 .

JING Z ， YI Y ， XI H ， et al . Therapeutic effects of VEGF gene-transfected BMSCs transplantation on thin endometrium in the rat model ［J］. Stem Cells Int ， 2018 ， 2018 ： 3069741 .

WATKINS D J ， YANG J X ， MATTHEWS M A ， et al . Synergistic effects of HB-EGF and mesenchymal stem cells in a murine model of intestinal ischemia/reperfusion injury ［J］. J Pediatr Surg ， 2013 ， 48 （ 6 ）： 1323 - 1329 .

张慧芹，刘阁玲，俞芳，等 . 自体骨髓干细胞移植配合针灸治疗糖尿病周围神经病变患者24例双下肢神经电生理的变化［J］. 中国组织工程研究与临床康复， 2007 ， 11 （ 11 ）： 2065 - 2067 .

ZHANG H Q ， LIU G L ， YU F ， et al . Neuroelectrophysio-logical changes in the lower limbs of 24 diabetic patients with peripheral neuropathy after autologous bone marrow stem cell transplantation combined with acupuncture （in Chinese）［J］. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research ， 2007 ， 11 （ 11 ）： 2065 - 2067 .

胡非非 . 针康法结合神经干细胞移植对脑梗死患者运动功能恢复的影响［D］. 哈尔滨：黑龙江中医药大学， 2011 .

HU F F . Influence of acupuncture combined with rehabilitation combined with graft of neural stem cells on motor function recovery of cerebral infarction （in Chinese）［D］. Harbin ： Heilongjiang University of Chinese Medicine ， 2011 .

潘妍，席瑾，刘静玉，等 . 电针对宫腔粘连大鼠子宫内膜修复的效应观察［J］. 针刺研究， 2023 ， 48 （ 6 ）： 550 - 556 .

PAN Y ， XI J ， LIU J Y ， et al . Observation on the effect of electroacupuncture on the regeneration of endometrium in rats with intrauterine adhesion （in Chinese）［J］. Acupuncture Research ， 2023 ， 48 （ 6 ）： 550 - 556 .

孙晶，梁宜，王超，等 . 针灸治疗躯体形式疼痛障碍的诊疗思路和临床体会［J］. 中国针灸， 2017 ， 37 （ 4 ）： 425 - 428 .

SUN J ， LIANG Y ， WANG C ， et al . Clinical experience of acupuncture and moxibustion in the diagnosis and treatment of persistent somatoform pain disorder （in Chinese）［J］. Chinese Acupuncture & Moxibustion ， 2017 ， 37 （ 4 ）： 425 - 428 .

WANG W B ， YANG L F ， HE Q S ， et al . Mechanisms of electroacupuncture effects on acute cerebral ischemia/reperfusion injury： possible association with upregulation of transforming growth factor beta 1 ［J］. Neural Regen Res ， 2016 ， 11 （ 7 ）： 1099 - 1101 .

SHARKEY A M ， DAY K ， MCPHERSON A ， et al . Vascular endothelial growth factor expression in human endometrium is regulated by hypoxia ［J］. J Clin Endocrinol Metab ， 2000 ， 85 （ 1 ）： 402 - 409 .

刘智敏，周春慧，龙文香，等 . miR-29及VEGF在宫腔粘连患者子宫内膜的表达［J］. 临床医学， 2018 ， 38 （ 2 ）： 4 - 7， 128 .

LIU Z M ， ZHOU C H ， LONG W X ， et al . Expressions of miR-29 and VEGF in the endometriums of patients with intrauterine adhesions （in Chinese）［J］. Clinical Medicine ， 2018 ， 38 （ 2 ）： 4 - 7， 128 .

MOLDOVAN G L ， PFANDER B ， JENTSCH S. PCNA ， the maestro of the replication fork ［J］. Cell ， 2007 ， 129 （ 4 ）： 665 - 679 .

NIKLAUS A L ， AUBUCHON M ， ZAPANTIS G ， et al . Assessment of the proliferative status of epithelial cell types in the endometrium of young and menopausal transition women ［J］. Hum Reprod ， 2007 ， 22 （ 6 ）： 1778 - 1788 .

ZHOU Q ， WU X X ， DAI X L ， et al . The different dosages of estrogen affect endometrial fibrosis and receptivity， but not SDF-1/CXCR4 axis in the treatment of intrauterine adhesions ［J］. Gynecol Endocrinol ， 2018 ， 34 （ 1 ）： 49 - 55 .

ZANATTA A ， ROCHA A M ， CARVALHO F M ， et al . The role of the Hoxa10/HOXA10 gene in the etiology of endometriosis and its related infertility： a review ［J］. J Assist Reprod Genet ， 2010 ， 27 （ 12 ）： 701 - 710 .

STEWART C L ， KASPAR P ， BRUNET L J ， et al . Blastocyst implantation depends on maternal expression of leukaemia inhibitory factor ［J］. Nature ， 1992 ， 359 （ 6390 ）： 76 - 79 .

AGHAJANOVA L . Update on the role of leukemia inhibitory factor in assisted reproduction ［J］. Curr Opin Obstet Gynecol ， 2010 ， 22 （ 3 ）： 213 - 219 .

SHUYA L L ， MENKHORST E M ， YAP J ， et al . Leukemia inhibitory factor enhances endometrial stromal cell decidualization in humans and mice ［J］. PLoS One ， 2011 ， 6 （ 9 ）： e25288 .

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