دراسة آلية تأثير الإبر الكهربائية على نقاط القدم ذات المسار الصغير الصنوبري في تحسين الاستجابة الالتهابية لدى فئران هشاشة العظام بعد انقطاع الطمث استناداً إلى مسار إشارة PI3K/AKT

LÜ Xing-min ,  

TANG Cai ,  

RONG Yi ,  

ZOU Ling-ling ,  

XU Mao-ting ,  

ZHANG Lu ,  

CHEN Gui-quan ,  

摘要

الهدف هو دراسة تأثير الإبر الكهربائية على نقاط القدم ذات المسار الصغير الصنوبري من خلال تنظيم مسار إشارة فسفاتيديلإنسيتول-3-كيناز (PI3K)/كيناز البروتين ب (AKT) على الاستجابة الالتهابية في الفئران التي تعاني من هشاشة العظام بعد انقطاع الطمث. الأساليب: تم اختيار 40 فأر SD عشوائياً، حيث تم تعيين 10 منهم كمجموعة عملية صورية؛ وفُرِض نموذج هشاشة عظام بعد استئصال المبيض الثنائي لمدة 3 أشهر على بقية الفئران، وتم تقسيمهم عشوائياً إلى مجموعة نموذجيّة، ومجموعة علاج بالإبر الكهربائية، ومجموعة علاج بالإبر الكهربائية مع مثبط، كل مجموعة تحتوي على 10 فئران. استخدمت مجموعة الإبر الكهربائية إبر كهربائية على الجانبين من "هوانغ تياو" و"يانغ لين تشوان" (موجة متقطعة، تردد 2 هرتز/15 هرتز، شدة 0.2~0.6 مللي أمبير) ونقطَة "شوان تشونغ"، كل جلسة 10 دقائق، 5 مرات في الأسبوع، لعلاج مدة 8 أسابيع، مع تبديل الجانب الأيمن والأيسر للمواضع. في مجموعة الإبر الكهربائية مع مثبط، تم حقن مثبط PI3K LY294002 (10 ملغم/كغم) داخل البطن مرتين في الأسبوع مع العلاج بالإبر الكهربائية لمدة 8 أسابيع. تم استخدام التصوير الميكروي CT لفحص بنية عظم الفخذ والمعايير الكمية، بما في ذلك كثافة العظام (BMD)، نسبة حجم العظم إلى الحجم الكلي (BV/TV)، عدد العوارض العظمية (Tb.N)، تفريق العوارض العظمية (Tb.Sp). تم فحص الشكل المرضي باستخدام تلوين HE وفحص عدد الخلايا الهادمة للعظم باستخدام تلوين TRAP. تم الكشف عن معايير تكوين العظم Runx2، OCN، الكولاجين من النوع الأول (Collagen I) بواسطة التلوين المناعي الكيميائي. تم قياس محتوى وإبراز mRNA للإنترلوكين-1β (IL-1β)، الإنترلوكين-6 (IL-6)، وعامل نخر الورم-α (TNF-α) في المصل والأنسجة العظمية باستخدام ELISA و qPCR. تم استخدام Western blot لفحص بروتينات مسار PI3K/AKT في أنسجة عظم الفخذ. النتائج: في مجموعة النموذج، لوحظ ترقق وانفصال غير منتظم في العوارض العظمية مع توسع تجويف النخاع وزيادة واضحة في عدد الخلايا الهادمة للعظم؛ أما مجموعة الإبر الكهربائية فظهرت تحسّن في شكل العوارض العظمية وتقليل عدد الخلايا الهادمة. مقارنة بمجموعة العملية الصورية، رأينا في مجموعة النموذج انخفاضًا واضحًا في BMD، BV/TV، Tb.N، والتعبير الإيجابي في نسيج العظم لكل من Runx2، OCN، Collagen I، ونسبة تعبير البروتين p-PI3K/PI3K و p-AKT/AKT (P < 0.01)، مع زيادة ملحوظة في Tb.Sp، والمحتوى والتعبير الجيني لكل من IL-6، IL-1β، TNF-α في المصل والأنسجة العظمية (P < 0.01). مقارنة بمجموعة النموذج، لوحظ في مجموعة الإبر الكهربائية زيادة ملحوظة في BMD، BV/TV، Tb.N، التعبير الإيجابي لـ Runx2، OCN، Collagen I، ونسبة تجارب p-PI3K/PI3K، p-AKT/AKT (P < 0.01, P < 0.05)، وانخفاض ملحوظ في Tb.Sp، والمحتوى والتعبير الجيني لـ IL-6، IL-1β، TNF-α (P < 0.01). مقارنة بمجموعة الإبر الكهربائية، عادت مؤشرات مجموعة الإبر الكهربائية مع المثبط إلى عكس الاتجاه ما عدا Tb.Sp (P < 0.01, P < 0.05). الخلاصة: يمكن للإبر الكهربائية لنقاط القدم ذات المسار الصغير الصنوبري التخفيف من الاستجابة الالتهابية وفقدان العظم في الفئران المصابة بهشاشة العظام بعد انقطاع الطمث، وقد يكون آلية هذا التأثير مرتبطة بتنشيط مسار PI3K/AKT.

关键词

الإبر الكهربائية; نقاط القدم ذات المسار الصغير الصنوبري; مسار فسفاتيديلإنسيتول-3-كيناز/كيناز البروتين ب; هشاشة العظام; الاستجابة الالتهابية

阅读全文