دراسة آلية تحسين الألم لدى فئران مرض الفقرات العنقية ذات النوع الجذري عبر تنظيم مسار الإشارة NO/cGMP/PKG بواسطة بروتين Piezo1 بالوخز الكهربائي

HUANG Wen-jing ,  

SU Sheng-yong ,  

WANG Tian ,  

SU Hong ,  

HUANG Xin-yu ,  

LI Xin ,  

ZHENG Guang-mei ,  

YIN Li-li ,  

XU Zhi-yi ,  

HUANG Ying ,  

WEI Gang-liang ,  

LI Xiao-ming ,  

摘要

الهدف هو استكشاف تأثير الوخز الكهربائي على تنظيم بروتين Piezo1 في الفئران المصابة بمرض الفقرات العنقية من النوع الجذري (CSR) وتأثيره على مسار الإشارة لأكسيد النيتريك (NO)/ديمر الجوانوزين أحادي الفوسفات الحلقي (cGMP)/بروتين كيناز G (PKG)، ودراسة آلية تخفيف الألم لعلاج CSR بالوخز الكهربائي. الطرق: تم تقسيم ذكور فئران SD عشوائيًا إلى مجموعة جراحة وهمية، مجموعة نموذج، مجموعة وخز كهربائي، ومجموعة وخز كهربائي + Yoda1، كل مجموعة مكونة من 10 فئران. تم إنشاء نموذج CSR باستخدام طريقة إدخال الخيط في القناة الفقرية للمجموعات النموذج، الوخز الكهربائي، والوخز الكهربائي + Yoda1. عولجت مجموعة الوخز الكهربائي بنقاط “Hegu” و“Tachong” ثنائية الجانب بالوخز الكهربائي، 20 دقيقة لكل مرة، لمدة 7 أيام متتالية؛ تلقت مجموعة الوخز الكهربائي + Yoda1 حقنًا داخل الصفاق لمحفز Piezo1 Yoda1 (1.5 ملغم/كغم) قبل المعالجة بالوخز الكهربائي. تم تقييم المشية، عتبة الانكماش الميكانيكي، ومدة استجابة الانكماش الحراري قبل وبعد التدخل بالوخز الكهربائي؛ لوحظت التغيرات المرضية في أنسجة الحبل الشوكي باستخدام تلوين HE؛ تم قياس تعبير جين Piezo1 باستخدام qPCR؛ تم فحص تعبيرات Piezo1 والكالسيوم اربطة البروتين (CaM) باستخدام التفاعل المناعي الفلوري المزدوج؛ تم تقييم بروتينات CaM، nNOS، sGC، وPKG1 باستخدام الويسترن بلوت؛ تم قياس محتوى cGMP بواسطة ELISA؛ ومحتوى NO باستخدام طريقة تلوين نترات النيتريت. النتائج: مقارنة مع مجموعة الجراحة الوهمية، كانت درجات المشي للفئران في مجموعة النموذج أعلى قبل التدخل (P<0.01)، مع انخفاض عتبة الانكماش الميكانيكي وقصر فترة استجابة الانكماش الحراري (P<0.01)؛ تعبيرات mRNA لبروتين Piezo1، شدة الفلورة المناعية لكل من Piezo1 وCaM، والتعبير النسبي لبروتينات CaM، nNOS، sGC، PKG1، ومستويات cGMP وNO، كانت مرتفعة بشكل ملحوظ (P<0.01)؛ أظهر تلوين HE في مجموعة النموذج تقلصًا في الخلايا العصبية، تعميق تلوين الخلايا، غموض في حدود النواة والسيتوبلازم، زيادة في الخلايا الدبقية، زيادة كثافة الخلايا، وتوسع وتسرب في الأوعية الدموية الدقيقة. مقارنة مع مجموعة النموذج، انخفضت درجات المشي في مجموعة الوخز الكهربائي (P<0.01)، وارتفعت عتبة الانكماش الميكانيكي وتمديد فترة استجابة الانكماش الحراري (P<0.01)، كما انخفضت تعبيرات mRNA لبروتين Piezo1، وشدة الفلورة المناعية لبروتين Piezo1 وCaM، والتعبير النسبي لبروتينات CaM، nNOS، sGC، PKG1، ومستويات cGMP وNO (P<0.01)؛ أظهر تلوين HE في مجموعة الوخز الكهربائي تقلصًا خفيفًا للخلايا العصبية، تقلص توسع الأوعية الدموية الدقيقة، وتقليل في تكاثر الخلايا الدبقية مقارنة بمجموعة النموذج. مقارنة مع مجموعة الوخز الكهربائي، كانت فترة استجابة الانكماش الحراري أقصر في مجموعة الوخز الكهربائي + Yoda1 (P<0.01)، كما زادت تعبيرات mRNA لبروتين Piezo1، وشدة الفلورة المناعية لبروتين Piezo1 وCaM، والتعبير النسبي لبروتينات CaM، nNOS، sGC، PKG1، ومستويات cGMP وNO (P<0.05, P<0.01)؛ أظهر تلوين HE في مجموعة الوخز الكهربائي + Yoda1 تقلص الخلايا العصبية، زيادة عدد الخلايا الدبقية، وتوسع ونزيف جزئي في الأوعية الدقيقة. الاستنتاج: يمكن للوخز الكهربائي تخفيف الألم بفعالية في فئران CSR، ويُرجح أن تكون الآلية من خلال تثبيط تنشيط بروتين Piezo1 في النخاع الشوكي، وكبح مسار الإشارة NO/cGMP/PKG لتحقيق التأثير المسكن.

关键词

مرض الفقرات العنقية الجذري; الوخز الكهربائي; تخفيف الألم; بروتين Piezo1

阅读全文