Elektroakupunktur zur Regulation des gestörten zirkadianen Rhythmus und anomalen Blutzuckerspiegels bei Mäusen, die auf IGF1-vermitteltem PI3K/Akt-Signalweg abzielt
Ziel ist es, die Wirkungsmechanismen der Elektroakupunktur auf die Verbesserung der gestörten peripheren zirkadianen Rhythmen und der anomalen Blutzuckerwerte bei Mäusen zu untersuchen. Methoden: C57BL/6J Mäuse wurden in eine normale Gruppe mit 26 Mäusen, eine Modellgruppe mit 60 Mäusen und eine Modellgruppe unter 24-Stunden-Lichtbedingungen aufgeteilt, um ein Modell für gestörte periphere zirkadiane Rhythmen bei Mäusen zu schaffen. Nach erfolgreicher Modellierung wurden die Mäuse zufällig in eine Modellgruppe mit 26 Mäusen, eine Elektroakupunkturgruppe mit 26 Mäusen und eine Elektroakupunktur in Kombination mit einem Inhibitorgruppe mit 8 Mäusen aufgeteilt und weitere 24 Stunden unter Lichtverhältnissen gehalten. In der Elektroakupunkturgruppe wurden die Mäuse mit Elektroakupunktur im Bereich der "Lebergate" behandelt, während in der Elektroakupunktur in Kombination mit einem Inhibitorgruppe die Mäuse zusätzlich zur Elektroakupunktur mit LY294002 behandelt wurden, um den Phosphoinositid-3-Kinase (PI3K)-Signalweg zu blockieren. Beide Gruppen wurden über einen Zeitraum von 8 Wochen kontinuierlich behandelt. Der Nüchternblutzucker (FPG) der Mäuse in den einzelnen Gruppen wurde gemessen; Der Gehalt an nüchternem Insulin (FINS) bei Mäusen wurde mittels ELISA gemessen und die Insulinresistenzindex (HOMA-IR) sowie der quantifizierte Insulinsensitivitätsüberprüfungsindex (QUICKI) wurden berechnet; Die zirkadianen Rhythmen der Leberinsulinähnlichen Wachstumsfaktoren 1 (IGF1) wurden mittels ELISA untersucht; Die Veränderungen der Morphologie des Lebergewebes bei Mäusen wurden durch H&E-Färbung untersucht; Die Ablagerung von Glykogenkörnern im Lebergewebe bei Mäusen wurde mittels PAS-Färbung untersucht; Die Proteinexpression von Hepatozytenwachstumsfaktor B (Akt), phosphoryliertem (p) -Akt, PI3K und p-PI3K in der Leber wurde mittels Western-Blot untersucht und das Verhältnis von p-PI3K / PI3K und p-Akt / Akt wurde berechnet; Die positive Expression von Forkhead-Box-Protein O1 (FoxO1) und Glykogensynthasekinase 3β (GSK3β) in der Leber wurde mittels Immunfluoreszenztechnik nachgewiesen; Die Expressionsebene von IGF1, Insulin-like Growth Factor 1 Receptor (IGF1R), FoxO1, GSK3β, Phosphoenolpyruvatcarboxykinase (PEPCK), Glucose-6-Phosphatase (G6Pase) mRNA in der Leber wurde mittels Echtzeit-Fluoreszenzquantifizierungs-PCR-Technik überprüft. Ergebnisse: Bei vergleich mit der Normalgruppe zeigten die Mäuse der Modellgruppe eine Verminderung der Wasseraufnahme (P<0.01), eine Erhöhung des FPG, FINS-Gehalts und des HOMA-IR (P<0.01), eine Abnahme des QUICKI (P<0.01) und eine gestörte zirkadiane Rhythmik des Leber-IGF1 (P<0.01), eine Verringerung des Verhältnisses p-PI3K / PI3K, p-Akt / Akt (P<0.01), eine Zunahme der positiven Expression von GSK3β und FoxO1 (P<0.05, P<0.01), ein Abfall des IGF1-mRNA-Gehalts (P<0.01) und eine Zunahme des IGF1R, GSK3β, FoxO1, PEPCK und G6Pase-MRNA-Gehalts (P<0.01, P<0.05), eine diffuse Schwellung und Lockerung der Anordnung von Leberzellen, einzelne Fetttropfen im Zytoplasma, diffuse Fettdystrophie und eine Verringerung des Glykogengehalts. Nach der Akupunkturbehandlung zeigte die Mäuse eine Zunahme des Wasserkonsums (P<0.05), einen Abfall des FPG, FINS-Gehalts und des HOMA-IR in vergleich mit der Modellgruppe (P<0.01), eine Erhöhung des QUICKI (P<0.01), eine Normalisierung des zirkadianen Rhythmus des Leber-IGF1 (P<0.01, P<0.05), eine Zunahme des Verhältnisses p-PI3K / PI3K, p-Akt / Akt (P<0.01), eine Abnahme der positiven Expression von GSK3β und FoxO1 (P<0.05, P<0.01), eine Zunahme des IGF1-mRNA-Gehalts (P<0.01), eine Abnahme des IGF1R, GSK3β, FoxO1, PEPCK und G6Pase-MRNA-Gehalts (P<0.01), eine regelmäßigere Anordnung von Leberzellen, eine Verringerung des Zellvolumens und der Fetttröpfchen im Zytoplasma und eine teilweise Wiederherstellung des Glykogengehalts. Im vergleich mit der Elektroakupunkturgruppe zeigte die Mäuse der Elektroakupunktur in Kombination mit einem Inhibitorgruppe eine signifikante Abnahme des Verhältnisses p-PI3K / PI3K, p-Akt / Akt (P<0.05), eine Zunahme der positiven Expression von GSK3β und FoxO1 (P<0.05), eine Zunahme der GSK3β, FoxO1, G6Pase-MRNA-Gehalts (P<0.05), jedoch keine signifikanten Unterschiede bei PEPCK-MRNA-Gehalts, Zellanordnung und Zytoplasmatische Fetttröpfchen. Fazit: Die Akupunkturbehandlung an der "Lebersockel" verbesserte nicht nur gestörte zirkadiane Rhythmen bei Mäusen, sondern regulierte auch Anomalien des Blutzuckerspiegels bei Mäusen, möglicherweise durch die Regulation des PI3K / Akt-Signalwegs, der durch IGF1 vermittelt wird.