Experimentelle Studie zur Akupunktur, zur Hemmung des Kupfertods und zur Verlängerung des Zeitfensters für die Thrombolyse bei Ratten mit ischämischem Schlaganfall
Ziel dieser Studie war es, die Wirkung der Akupunktur auf den neuronalen Tod durch Kupfer bei Ratten mit einem ischämischen Schlaganfall, die mit Thrombolyse behandelt wurden, zu beobachten und den Mechanismus der Akupunktur in der Verlängerung des Zeitfensters für die thrombolytische Behandlung des Schlaganfalls zu erkunden. Methoden Das Experiment wurde in zwei Teile unterteilt. Im ersten Teil des Experiments wurden 40 SD-Ratten zufällig den Gruppen simulierter Operation, Modellgruppe, Thrombolysegruppe nach 4,5 Stunden, Thrombolysegruppe nach 6 Stunden und Akupunktur + Thrombolysegruppe nach 6 Stunden mit jeweils 8 Ratten pro Gruppe zugeteilt. Es wurde eine modifizierte Methode zur Okklusion der Hirnarterie verwendet, um ein Rattenmodell für ischämischen Schlaganfall zu erstellen. Den Thrombolysebehandlungsgruppen wurden 4,5 Stunden und 6 Stunden nach der Modellierung 10 mg/kg rekombinanter Gewebetyp-Plasminogen-Aktivator (rt-PA) intravenös verabreicht. Der Gruppe Akupunktur + Thrombolyse wurde zur gleichen Zeit wie die Thrombolyse an den bilateralen Punkten 'Neiguan' und 'Hegu' Akupunktur verabreicht, und die Nadeln wurden 30 Minuten lang belassen. Alle Gruppen wurden während der Modellierung mit einem Laserstreubremsbildgerät zur Messung des zerebralen Blutflusses überwacht, und die Bederson-Methode wurde zur Bewertung des neurologischen Verhaltens nach 2 und 24 Stunden nach der Modellierung verwendet. Die Färbung mit Triphenyltetrazoliumchlorid verglich das Volumen des ischämischen Hirninfarkts bei Ratten in jeder Gruppe, und die Immunfluoreszenz wurde verwendet, um die positive Expression des neuronalen Kernproteins (NeuN) im peri-infarct Bereich (PI) bei Ratten in jeder Gruppe zu detektieren. Im zweiten Teil des Experiments wurden 24 SD-Ratten zufällig den Gruppen simulierter Operation, Modellgruppe, Thrombolysegruppe nach 6 Stunden und Akupunktur + Thrombolysegruppe nach 6 Stunden mit jeweils 6 Ratten pro Gruppe zugeteilt. Es wurde eine Colorimetrie verwendet, um die Konzentrationen von Kupferionen, Pyruvat und Adenosintriphosphat (ATP) im peri-infarct Bereich bei Ratten in jeder Gruppe zu messen, und es wurde die Western-Blot-Methode und die quantitative fluoreszierende PCR zur Messung der Expression des Proteins und der mRNA der Ferredoxin-1 (FDX1) und der Dihydrolipoylacetlytransferase (DLAT) verwendet. Ergebnisse Im Vergleich zur simulierten Operation zeigte die Modellgruppe eine Zunahme der neurologischen Bewertung der Ratten, des prozentualen Volumens des ischämischen Hirninfarkts, der Konzentrationen von Kupferionen und Pyruvat im peri-infarct Bereich sowie der Expression von FDX1, DLAT in Protein- und mRNA-Leveln (P <0,01), und eine Abnahme des Prozentsatzes der NeuN-positiven Zellen und der ATP-Werte (P <0,01). Im Vergleich zur Modellgruppe zeigte die Thrombolysegruppe nach 4,5 Stunden eine Reduktion der neurologischen Bewertung und des prozentualen Volumens des ischämischen Hirninfarkts nach 24 Stunden (P <0,05, P <0,01), und eine Zunahme des Prozentsatzes der NeuN-positiven Zellen (P <0,05); die Thrombolysegruppe nach 6 Stunden zeigte eine Zunahme des prozentualen Volumens des ischämischen Hirninfarkts, der Konzentrationen von Kupferionen und Pyruvat im peri-infarct Bereich sowie der Expression von FDX1, DLAT in Protein- und mRNA-Leveln (P <0,05, P <0,01), und eine Abnahme des Prozentsatzes der NeuN-positiven Zellen und der ATP-Werte (P <0,05); die Akupunktur + Thrombolysegruppe zeigte eine Reduktion der neurologischen Bewertung und des prozentualen Volumens des ischämischen Hirninfarkts nach 24 Stunden, des prozentualen Volumens der Kupferionen und Pyruvat im peri-infarct Bereich, sowie der Expression von FDX1, DLAT in Protein- und mRNA-Leveln (P <0,05, P <0,01), und eine Zunahme des Prozentsatzes der NeuN-positiven Zellen und der ATP-Werte (P <0,05). Im Vergleich zur Thrombolysegruppe nach 4,5 Stunden zeigte die Thrombolysegruppe nach 6 Stunden eine Zunahme der neurologischen Bewertung und des prozentualen Volumens des ischämischen Hirninfarkts nach 24 Stunden (P <0,01), und eine Abnahme des Prozentsatzes der NeuN-positiven Zellen (P <0,01). Im Vergleich zur Thrombolysegruppe nach 6 Stunden zeigte die Akupunktur + Thrombolysegruppe eine Reduktion der neurologischen Bewertung, des prozentualen Volumens des ischämischen Hirninfarkts, der Konzentrationen von Kupferionen und Pyruvat im peri-infarct Bereich sowie der Expression von FDX1, DLAT in Protein- und mRNA-Leveln (P <0,01), und eine Zunahme des Prozentsatzes der NeuN-positiven Zellen und der ATP-Werte (P <0,01). Schlussfolgerung Ein rechtzeitiges Eingreifen mit Akupunktur kann das Zeitfenster für die thrombolytische Behandlung bei Ratten mit ischämischen Schlaganfall verlängern, und sein Mechanismus kann mit der Reduktion der Expression von FDX1, DLAT im peri-infarct Bereich zusammenhängen, was den neuronalen Tod durch Kupfer hemmt.
关键词
ischämischer Schlaganfall; Akupunktur; Zeitfenster für die Thrombolyse; Kupfertod