Die Regulation der Expression von extrazellulären Neutrophilenextrazellulären Fallen durch Akupunktur bei Mäusen mit Rückenmarksverletzungen zur Hemmung der neuroinflammatorischen Reaktion und der Gliosebildung

WANG Jia-pei ,  

HUANG Si-qin ,  

TANG Cheng-lin ,  

YANG Zhu-xin ,  

LI Ming-jiao ,  

LIAO Cai ,  

XING Ke-han ,  

摘要

Ziel Die Studie untersucht den Einfluss der Regulation des Exprimierungsniveaus von extrazellulären Neutrophilenextrazellulären Fallen (NETs) durch die Elektroakupunktur auf die neuroinflammatorische Reaktion und die Gliosebildung bei Mäusen mit Rückenmarksverletzungen (SCI). Methode C57BL/6 Mäuse wurden in eine Scheinoperation, eine Modellgruppe, eine Elektroakupunkturgruppe, eine Elektroakupunktur+DNase1-Gruppe und eine DNase1-Gruppe randomisiert, mit jeweils 12 Tieren pro Gruppe. Das SCI-Mausmodell wurde durch Klammern erstellt. Die Mäuse der Elektroakupunkturgruppe erhielten eine bilaterale thorakale (T)10-, T12-Akupunktur, 10 Minuten/Session, 1x/Tag, 14 Tage lang; die DNase1-Gruppe erhielt lediglich zweimal täglich eine intraperitoneale Injektion des NETs-Inhibitors Deoxyribonuclease I (DNase1) mit 50 μg/Tier, 14 Tage lang; die Elektroakupunktur+DNase1-Gruppe erhielt zusätzlich zur Elektroakupunktur intraperitoneale Injektionen von DNase1, 14 Tage lang. Die motorischen Funktionen der Mäuse wurden anhand des BBB-Scores verglichen; die Pathologie des Rückenmarks wurde mittels HE-Färbung beurteilt; die Expression von citrulliniertem Histon H3 (citH3) und Glialfibrillären saurem Protein (GFAP) im Rückenmark der verschiedenen Gruppen wurde mittels Immunfluoreszenz untersucht; die relative Expression von citH3, neutrophile Elastase (NE), Myeloperoxidase (Mpo), cGAS, STING, GFAP, Neurokan im Rückenmarksgewebe wurden mittels Western-Blot-Analyse nachgewiesen; die Gehalte an interleukin-1β (IL-1β) und Tumor-Nekrose-Faktor-α (TNF-α) im Rückenmark und im Serum wurden mittels ELISA-Testkit gemessen. Ergebnisse Im Vergleich zur Scheinoperationsgruppe nahm der BBB-Score der Modellgruppe zu allen Zeitpunkten nach der Modellerstellung ab (P<0,01); die Neuronen im Verletzungsbereich des Rückenmarks zeigten Degeneration, Kernschrumpfung und starke Entzündungszellinfiltration; die Expression von citH3, NE, Mpo, cGAS, STING, GFAP, Neurocan und die Fluoreszenzintensität von citH3 und GFAP im Rückenmarksgewebe sowie die Gehalte von citH3 und GFAP in der Serum- und Rückenmarks-IL-1β- und TNF-α-Werte stiegen an (P<0,01; P<0,05). Im Vergleich zur Modellgruppe stieg der BBB-Score der Mäuse in den Behandlungsgruppen am 7. und 14. Tag nach der Modellerstellung an (P<0,01; P<0,05); die Anzahl und Morphologie der Neuronen im Rückenmarksgewebe der Mäuse erholten sich teilweise, die Entzündungsinfiltration nahm ab; die Expression von citH3, NE, cGAS, STING, GFAP, Neurocan im Rückenmark sowie die Fluoreszenzintensität von citH3 und GFAP, die Gehalte von IL-1β und TNF-α im Serum und im Rückenmark sanken (P<0,01; P<0,05); die Mpo-Expression im Rückenmarksgewebe der Mäuse in den Elektroakupunktur- und Elektroakupunktur+DNase1-Gruppen sank (P<0,05; P<0,01). Die DNase1-Gruppe erreichte ähnliche Effekte wie die Elektroakupunkturgruppe, und die Veränderungen in den oben genannten Indikatoren in der Elektroakupunktur+DNase1-Gruppe waren signifikanter als in der Elektroakupunkturgruppe (P<0,01; P<0,05). Fazit Die Rückenmarksakupunktur kann die neuroinflammatorische Reaktion und die Gliosebildung bei Mäusen mit SCI verringern, die Erholung der neurologischen Funktionen nach SCI verbessern, und ihr Mechanismus ist möglicherweise mit der Herabregulierung des NETs-Exprimierungsniveaus durch die Elektroakupunktur verbunden.

关键词

Rückenmarksverletzungen; Akupunktur; extrazelluläre Neutrophilenextrazelluläre Fallen; neuroinflammatorische Reaktion; Gliose

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