Mechanismen zur Verbesserung der Knorpelgewebeschäden bei Ratten mit Kniegelenkarthrose durch Elektroakupunktur zur Regulation der miR-335-5p-Expression

ZHU Hao ,  

YAN Xue-hua ,  

CHEN Shuai ,  

ZHANG Gai-yue ,  

ZHANG Hao-bin ,  

YANG Jin-sheng ,  

WANG Ying-ying ,  

摘要

Ziel ist es, die protektive Wirkung der Elektroakupunktur auf das Knorpelgewebe des Kniegelenks bei Ratten mit Kniegelenkarthrose (KOA) zu untersuchen und den potenziellen Mechanismus von miR-335-5p bei der Elektroakupunkturbehandlung von KOA zu erforschen. Methoden: SD-Ratten wurden zufällig in eine Leergruppe, eine Modellgruppe und eine Elektroakupunkturgruppe mit je 14 Ratten unterteilt. Den Ratten der rechten Kniegelenkhöhle wurde eine Injektion einer Natriumglutamat/Iodoacetatsalzlösung (80 μg/μL) zur Modellierung von KOA verabreicht. Am 14. Tag nach der Injektion begann die Elektroakupunkturgruppe mit der Intervention der Ratten auf der rechten Seite Yanglingquan und Xuehai mit Elektroakupunktur, wobei die Nadeln 15 Minuten belassen wurden, und die Intervention wurde alle 2 Tage für insgesamt zwei Wochen durchgeführt. Der mechanische Schwellenwert des Pfotenrückziehreflexes (PWMT) und die Latenzzeit des Wärmerückziehreflexes (PWTL) der Ratten wurden gemessen; die Ganganalyse wurde durchgeführt, um die durch Schmerz induzierten Veränderungen der Ganganpassung zu messen; die pathologischen Veränderungen des Knorpe-lgewebes im rechten Kniegelenk wurden durch Safranin O-Färbung unter dem Mikroskop beobachtet; die Expression von miR-335-5p, Dickkopf-1-assoziierten Protein (DKK-1), β-Catenin und Matrixmetallopeptidase 13 (MMP-13)-mRNA im Knorpelgewebe des rechten Kniegelenks wurde mit einer Echtzeit-Fluoreszenz-Quantitative-PCR-Methode untersucht; die Expression von DKK-1, β-Catenin und MMP-13-Protein im Knorpelgewebe wurde mit der Western-Blot-Methode untersucht; die Expression von β-Catenin-Fluoreszenz im rechten Kniegelenk wurde mit der Immun-fluoreszenzfärbung beobachtet. Ergebnisse: Bei den Ratten der Modellgruppe zeigte die Safranin-O-Färbung des rechten Kniegelenks weitreichende Nekrose von Knorpelzellen, Auflösung der Zellkerne, begleitet von einer überwiegenden Infiltration von entzündlichen Zellen wie Makrophagen, lokal begrenzte Knorpeldefekte, lokales Absterben von Trabekeln mit Fibrose, und an den Stellen des Wachstums gab es neugebildete Kapillaren; In der Elektroakupunkturgruppe waren die pathologischen Symptome wie Entzündungszellinfiltration und Fibrose signifikant reduziert. Im Vergleich zur Leergruppe zeigten die Ratten der Modellgruppe eine Abnahme des PWMT, PWTL und der Stützzeit des rechten Hinterfußes, der Fußabdruckfläche und des Sohlen-drucks des rechten Knorpelgewebes sowie eine Abnahme der Expression von DKK-1-mRNA und -Protein im rechten Kniegelenk (P<0,001); die Expression von miR-335-5p, β-Catenin und MMP-13-mRNA und -Protein im Knorpelgewebe des rechten Kniegelenks, sowie die Fluoreszenzintensität von β-Catenin nahmen zu (P<0,001, P<0,01). Im Vergleich zur Modellgruppe wurden diese Indikatoren in der Elektroakupunkturgruppe umgekehrt (P<0,001, P<0,05, P<0,01). Schlussfolgerung: Elektroakupunktur kann die Schmerzsymptome bei Ratten mit KOA signifikant verbessern, die Wiederherstellung der Bewegungsfunktion fördern, die pathologische Morphologie des Knorpelgewebes des Kniegelenks verbessern, was möglicherweise mit der Regulation der Expression von miR-355-5p, der Regulierung des Wnt/β-Catenin-Signalwegs und der Inhibierung der Freisetzung von Knorpelmatrix-abbauenden Enzymen zusammenhängt.

关键词

Elektroakupunktur; Kniegelenkarthrose; miR-335-5p; β-Catenin

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