Auswirkungen der Elektroakupunktur-Regulierung des PI3K/Akt/mTOR-Signalwegs auf die Autophagie des Synovialgewebes im Kniegelenk von Ratten mit Kniegelenk-Osteoarthritis
Ziel: Untersuchung der Wirkung von Elektroakupunktur auf die Regulation des Signalwegs Phosphoinositid-3-Kinase (PI3K)/Proteinkinase B (Akt)/zielproteine des mammalianen Rapamycins (mTOR) auf die Autophagie des Synovialgewebes im Kniegelenk bei Ratten mit Kniegelenk-Osteoarthritis (KOA). Methoden: Es wurden 36 männliche SD-Ratten ausgewählt und zufällig in eine Normalgruppe, eine Modellgruppe und eine Elektroakupunkturgruppe mit jeweils 12 Tieren eingeteilt. Das KOA-Modell wurde durch Natriumjodacetat induziert. Nach erfolgreicher Modellierung erhielt die Elektroakupunkturgruppe eine Behandlung an den betroffenen Punkten „Dubi“ und „Zusanli“ mit jeweils 20 Minuten Elektrostimulation einmal täglich über 3 Wochen. Die Kniegelenksfunktion wurde mit der Lequesne MG Verhaltensskala bewertet, die pathologische Morphologie des Synovialgewebes mittels HE-Färbung untersucht, die Ultrastruktur der Autophagosomen und Autolysosomen im Synovialgewebe durch Transmissionselektronenmikroskopie analysiert, die Mengen der autophagiebezogenen Proteine Atg5 und Atg12 im Synovialgewebe mittels ELISA gemessen, die mRNA-Expressionsniveaus von PI3K, Akt und mTOR durch Echtzeit-Fluoreszenzquantitativer PCR bestimmt sowie die relativen Proteinexpressionsniveaus von PI3K, Akt, mTOR, ULK1, Beclin-1 und LC3 mittels Western Blot analysiert. Ergebnisse: Im Vergleich zur Normalgruppe zeigten Ratten der Modellgruppe erhöhte Lequesne MG Scores im Kniegelenk (P<0,01), Kollagenproliferation im Synovialgewebe, entzündliche Zellinfiltrate, erhöhte Anzahl von Autophagosomen und Autolysosomen, erhöhte Mengen an Atg5, Atg12, relative Proteinexpression von ULK1, Beclin-1 sowie ein erhöhtes Verhältnis von LC3Ⅱ/LC3Ⅰ (P<0,01), und verminderte mRNA- und Proteinexpression von PI3K, Akt, mTOR (P<0,01); im Vergleich zur Modellgruppe zeigte die Elektroakupunkturgruppe niedrigere Lequesne MG Scores (P<0,01), verminderte Kollagenproliferation, reduzierte entzündliche Zellinfiltration, verringerte Anzahl von Autophagosomen und Autolysosomen, niedrigere Mengen von Atg5, Atg12, relative Proteinexpression von ULK1, Beclin-1 und ein vermindertes Verhältnis von LC3Ⅱ/LC3Ⅰ (P<0,01) sowie erhöhte mRNA- und Proteinexpression von PI3K, Akt, mTOR (P<0,05, P<0,01). Schlussfolgerung: Elektroakupunktur an den Punkten „Dubi“ und „Zusanli“ kann die Autophagie im Synovialgewebe hemmen, die Kniegelenksfunktion und die Morphologie des Synovialgewebes bei KOA-Ratten verbessern, wahrscheinlich durch Aktivierung des Signalwegs PI3K/Akt/mTOR.
关键词
Kniegelenk-Osteoarthritis;Elektroakupunktur;Autophagie;Phosphoinositid-3-Kinase (PI3K)/Proteinkinase B (Akt)/zielproteine des mammalianen Rapamycins (mTOR) Signalweg;Synovialgewebe