Effect of electroacupuncture on ACSL4/LPCAT3/ALOX15 signaling pathway of ferroptosis in rats with premature ovarian insufficiency

LI Zheng-yu ,  

ZHAO Xi ,  

CHANG Juan ,  

SHI Wen-ying ,  

CAO Yang ,  

LIU Xiao-juan ,  

HU Ze-li ,  

ZHANG Wei ,  

摘要

Das Ziel der Studie war es, die Wirkung der Elektroakupunktur auf den Signalweg ACSL4/LPCAT3/ALOX15 in den Eierstöcken von Ratten mit vorzeitiger Ovarialinsuffizienz (POI) zu beobachten und den Wirkungsmechanismus der Akupunkturbehandlung von POI im Hinblick auf den Eisensterbensweg zu erforschen. Methoden: 48 weibliche SD-Ratten wurden zufällig in eine Normalkontrollgruppe, eine Modellgruppe, eine Elektroakupunkturgruppe und eine westliche Medikamentengruppe aufgeteilt, jeweils mit 12 Ratten. Ein Ratten-POI-Modell wurde durch intraperitoneale Injektion von Cyclophosphamid etabliert. Die Elektroakupunkturgruppe wurde mit Elektroakupunktur an den Guanyuan- und bilateralen Uterus-San Yin Jiao-Punkten bei einer kontinuierlichen Welle mit 2 Hz und einer Intensität, die eine leichte lokale Vibrieren verursacht, behandelt, und die Nadeln für 20 Minuten kontinuierlich mit elektrischer Stimulation versehen, einmal täglich. Die westliche Medikamentengruppe wurde sequenziell mit 17-β-Estradiol und Hydroxyprogesteronacetat behandelt. Alle Ratten unterzogen sich vier Tagen Intervention und einem Tag Ruhe, insgesamt vier Interventionszyklen. Am Ende der Intervention wurden die Serumspiegel von follikelstimulierendem Hormon (FSH), Östradiol (E2), luteinisierendem Hormon (LH) und antimüllerischer Hormon (AMH) der Ratten mittels ELISA gemessen; HE-Färbungen wurden durchgeführt, um die morphologischen Veränderungen der Eierstöcke der Ratten zu beobachten; der Eisengehalt (Fe), Glutathion (GSH) und Malondialdehyd (MDA) im Serum sowie die Aktivität der Superoxiddismutase (SOD) wurden mittels Farbmetric-Methode gemessen; der oxidative Stress der Eierstockgewebe wurde mittels Durchflusszytometrie bewertet; die Mitochondrien-Mikrostruktur des Eierstockgewebes wurde unter einem Transmissionselektronenmikroskop beobachtet; die Expression von ACSL4-, LPCAT3- und ALOX15-mRNA und -Proteinen wurde mittels Echtzeit-PCR und Western-Blot gemessen. Ergebnisse: Nach der Behandlung waren im Vergleich zur Normalgruppe die Anzahl der Ovarialfollikel aller Stadien bei den Ratten der Modellgruppe vermindert, die Anzahl der verschlossenen Follikel erhöht, die Struktur und Morphologie der Follikel waren abnorm und die Schicht der Granulosazellen war ungeordnet; beschädigte Mitochondrien in den Eierstöcken hatten zugenommen und die Mitochondrialenkämme abgenommen oder waren sogar verschwunden; die Serumspiegel von FSH, LH, Eisen, MDA und die mittlere Fluoreszenzintensität von ROS waren erhöht (P<0,01), während die Serumspiegel von E2, AMH, GSH, die SOD-Aktivität abgenommen hatten (P<0,01); die Expression von ACSL4-, LPCAT3- und ALOX15-mRNA und -Proteinen in den Eierstockgeweben war angestiegen (P<0,01). Im Vergleich zur Modellgruppe waren die Anzahl der verschlossenen Follikel bei den Ratten der Elektroakupunkturgruppe und der westlichen Medikamentengruppe vermindert, die Anzahl der wachsenden Follikel erhöht, die Schicht der Granulosazellen war geordneter; die beschädigten Mitochondrien in den Eierstöcken hatten abgenommen und die Mitochondrialenmorphologie hatte sich teilweise wiederhergestellt; die Serumspiegel von FSH, LH, Eisen, MDA und die mittlere Fluoreszenzintensität von ROS hatten abgenommen (P<0,01), während die Serumspiegel von E2, AMH, GSH, die SOD-Aktivität zugenommen hatten (P<0,01); die Expression von ACSL4-, LPCAT3- und ALOX15-mRNA und -Proteinen in den Eierstockgeweben war vermindert (P<0,01). Schlussfolgerung: Elektroakupunktur kann die Hormonspiegel bei Ratten mit POI regulieren und die Ovarialfunktion verbessern. Ihr Wirkungsmechanismus könnte mit der Regulierung des ACSL4/LPCAT3/ALOX15-Weges, der Reduktion der Ansammlung von lipiden Peroxiden und der Hemmung des Eisentodes zusammenhängen.

关键词

Electroacupuncture;Premature ovarian insufficiency;Ferroptosis;Lipid peroxidation;ACSL4/LPCAT3/ALOX15 signaling

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