Studie zur thermischen Akupunktur basierend auf dem AMPK/Ulk1-Signalweg zur Regulierung der mitochondrialen Autophagie bei Ratten mit chronischem Erschöpfungssyndrom
Das Ziel dieser Studie war es, die Wirkung der thermischen Akupunktur auf den AMPK/Ulk1-Signalweg in der Skelettmuskulatur von Ratten mit chronischem Erschöpfungssyndrom (CFS) zu beobachten und den Wirkungsmechanismus der thermischen Akupunktur bei der Intervention von CFS zu untersuchen. Methoden: Männliche SD-Ratten wurden gemäß einer Tabelle mit Zufallszahlen in eine Kontrollgruppe (10 Ratten) und eine Modellgruppe (30 Ratten) aufgeteilt. Die Modellgruppe wurde unter Verwendung einer Kombinationsmethode aus Erschöpfungsschwimmen, chronischer Einschränkung und alternierendem Fasten jeden Tag zur Reproduktion eines Ratten-CFS-Modells etabliert. Die 30 Ratten, die das Modellieren erfolgreich abgeschlossen hatten, wurden gemäß einer Tabelle mit Zufallszahlen in eine Modellgruppe, eine thermische Akupunkturgruppe und eine Coenzym-Q10-Gruppe aufgeteilt, wobei jede Gruppe 10 Ratten umfasste. Die thermische Akupunkturgruppe wurde an 'Zusanli (beidseitig)', 'Guanyuan' und 'Zhongwan' der Ratten zur thermischen Akupunkturtherapie, 15 Minuten pro Sitzung, einmal täglich für eine kontinuierliche Intervention von 14 Tagen akupunktiert; die Coenzym-Gruppe erhielt eine Coenzym-Q10-Lösung (1 mg·kg-1) oral einmal täglich für eine kontinuierliche Intervention von 14 Tagen. Die Veränderungen im Körpergewicht und in der Schwimmzeit der Ratten vor und nach dem Modellieren sowie nach der Intervention wurden aufgezeichnet, und die Verhaltensänderungen der Ratten in jeder Gruppe wurden durch einen offenen Feldtest bewertet; die morphologischen Veränderungen in den Skelettmuskeln der Ratten wurden durch Hämatoxylin-Eosin-Färbung beobachtet; die Struktur der Muskelmitochondrien und der Autophagosomen wurde durch Transmissionselektronenmikroskopie beobachtet; die Expression der Proteine AMPK, phosphoryliertes AMPK (p-AMPK), ULK1, phosphoryliertes ULK1 (p-ULK1), mit den Mikrotubuli assoziiertes Protein 3 (LC3)-I und LC3-Ⅱ in den Skelettmuskeln der Ratten wurde durch die Western-Blot-Methode nachgewiesen, und die Verhältnisse p-AMPK/AMPK, p-ULK1/ULK1, LC3-II/LC3-I wurden berechnet; die Expression von AMPK-, ULK1- und LC3-mRNA in den Skelettmuskeln der Ratten wurde durch Echtzeit-PCR gemessen. Ergebnisse: Im Vergleich zur Kontrollgruppe zeigte die Modellgruppe der Ratten eine Abnahme des Körpergewichts (P<0,05), eine Verkürzung der Schwimmzeit und eine signifikante Abnahme der Anzahl der Aufsteh- und Stehversuche im offenen Feldtest (P<0,05); im Vergleich zur Modellgruppe zeigten die Ratten der thermischen Akupunkturgruppe und der Coenzym-Gruppe eine Zunahme des Körpergewichts (P<0,05), eine Verlängerung der Schwimmzeit und eine Zunahme der Anzahl der Aufsteh- und Stehversuche im offenen Feldtest (P<0,05). Im Vergleich zur Modellgruppe war die Expression der Proteine p-ULK1/ULK1 und LC3-II/LC3-I in den Skelettmuskeln in den Gruppen der thermischen Akupunktur und Coenzym signifikant höher (P<0,05). Im Vergleich zur Kontrollgruppe war die Expression von ULK1- und LC3-mRNA in den Skelettmuskeln in der Modellgruppe erhöht (P<0,05), und die Mitochondrien der Skelettmuskeln hatten eine blasenartige Erscheinung und waren deutlich geschwollen; im Vergleich zur Modellgruppe war die Expression von AMPK-, ULK1- und LC3-mRNA in den Skelettmuskeln in den Gruppen der thermischen Akupunktur und Coenzym erhöht (P<0,05), die Schwellung der Mitochondrien in den Skelettmuskeln der Coenzym-Gruppe hatte sich leicht verringert, und die blasenartigen Mitochondrien in den Skelettmuskeln der thermischen Akupunkturgruppe waren weiter reduziert, die Schwellung war deutlich reduziert. Fazit: Die thermische Akupunktur aktiviert den AMPK/Ulk1-Signalweg bei Ratten mit CFS, erhöht die Expression von mit AMPK, ULK1, LC3 verbundenen Faktoren, fördert die Autophagie der Mitochondrien, verbessert die Morphologie der Mitochondrien und erreicht so das Ziel, das chronische Erschöpfungssyndrom zu behandeln.