Untersuchung des Wirkmechanismus der Elektroakupunktur bei der kombinierten Behandlung von Gehirn und Darm bei zerebraler Ischämie bei Ratten basierend auf dem TMAO-HMGB1/NLRP3-Weg

WU Yue-ping ,  

OUYANG Jie ,  

SONG Xiao-ge ,  

CHU Hao-ran ,  

CHEN Liang-liang ,  

DING Yi-xia ,  

摘要

Ziel ist es, die Wirkung der Elektroakupunktur auf den Trimethylamin-N-oxid (TMAO)-Weg – hochmobilitätsgruppe B1 (HMGB1)/NOD-ähnlichen Rezeptor mit hitzeschockproteinähnlicher Strukturdomäne 3 (NLRP3) bei Ratten mit zerebraler Ischämie zu beobachten und den Wirkmechanismus der gemeinsamen Behandlung von Gehirn und Darm mittels Elektroakupunktur zu untersuchen. Methoden: Erwachsene SPF-männliche SD-Ratten wurden zufällig in Sham-Operation-Gruppe, Modellgruppe und Elektroakupunkturgruppe mit jeweils 15 Tieren eingeteilt. Die Elektroakupunkturgruppe erhielt eine Elektroakupunktur-Behandlung an den Punkten „Baihui“, „Tianshu“, „Shangjuxu“ und „Dazhui“, einmal alle zwei Tage, 20 Minuten pro Sitzung, insgesamt 14 Tage. Die neurologische Funktion der Ratten wurde mit der Zea-Longa-Skala bewertet; das Hirninfarktvolumen wurde mit der TTC-Färbemethode gemessen; die pathologischen Veränderungen im ischämischen Kortex und Colon-Gewebe wurden mittels HE-Färbung untersucht; die Gehalte an TMAO, HMGB1, NLRP3, Interleukin (IL)-1β, Zonula occludens-1 (ZO-1) und Occludin im Serum, Colon und ischämischen Hirnkortex wurden mittels ELISA bestimmt; die Protein- und mRNA-Expressionslevels von HMGB1, NLRP3, IL-1β, ZO-1 und Occludin in Colon-Gewebe und ischämischem Hirnkortex wurden mittels Western Blot, Echtzeit-PCR und Immunfluoreszenzfärbung gemessen. Ergebnisse: Im Vergleich zur Sham-Gruppe wiesen die Modellratten erhöhte Zea-Longa-Werte und einen höheren Prozentsatz des Hirninfarktvolumens auf (P<0,01), neuronale Unordnung im ischämischen Kortex, lockere Struktur, erweiterte Zwischenräume mit entzündlicher Zellinfiltration, Schleimhautzerstörung im Colon, gestörte Drüsenanordnung, verringerte Anzahl von Becherzellen mit entzündlicher Infiltration; erhöhte TMAO-, HMGB1-, NLRP3- und IL-1β-Gehalte im Serum, Colon und ischämischen Kortex (P<0,01), verminderte ZO-1- und Occludin-Gehalte (P<0,01), erhöhte Protein-, mRNA-Expressionen und positive Expressionslevel von HMGB1, NLRP3, IL-1β, sowie verminderte von ZO-1 und Occludin (P<0,01). Im Vergleich zur Modellgruppe zeigten die Elektroakupunktur-Ratten niedrigere Zea-Longa-Werte und ein reduziertes Hirninfarktvolumen (P<0,01), eine geordnetere neuronale Anordnung und vollständigere Morphologie im ischämischen Kortex, geringere entzündliche Zellinfiltration, relativ intakte Mukosazellen im Colon, reduzierte Drüsenstörung, verringerte Entzündungsinfiltration; reduzierte TMAO-, HMGB1-, NLRP3- und IL-1β-Gehalte im Serum, Colon und ischämischen Kortex (P<0,01), erhöhte ZO-1- und Occludin-Gehalte (P<0,01), verringerte Protein-, mRNA-Expressionen und positive Expressionslevel von HMGB1, NLRP3, IL-1β, erhöhte von ZO-1 und Occludin (P<0,01). Fazit: Die kombinierte Behandlung von Gehirn und Darm mittels Elektroakupunktur kann den Gehalt des Darmmikrobiotametaboliten TMAO reduzieren, die Expression von HMGB1/NLRP3 im Darmgewebe herunterregulieren und periphere Entzündungsfaktoren verringern, wodurch die Entzündungsreaktion im Gehirngewebe von MCAO-Ratten abgeschwächt wird.

关键词

zerebrale Ischämie; Elektroakupunktur; Ratten; kombinierte Behandlung von Gehirn und Darm; Entzündungsreaktion; TMAO-HMGB1/NLRP3-Weg

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