Untersuchung des Mechanismus der Regulation des IL-4/JAK1/STAT6-Signalwegs durch Elektroakupunktur zur Förderung der M2-Makrophagen-Polarisation und Verbesserung der Schädigung der Darmmukosa-Barriere bei Mäusen mit Colitis ulcerosa
Ziel ist es, die Wirkung der Elektroakupunktur auf den Signalweg Interleukin-4 (IL-4) / Tyrosinkinase 1 (JAK1) / Signaltransduktions- und Transkriptionsaktivator 6 (STAT6) im Kolongewebe von Mäusen mit chronischem Colitis ulcerosa (UC)-Modell zu beobachten und den möglichen Mechanismus zu untersuchen, durch den Elektroakupunktur die Polarisierung von M2-Makrophagen fördert und die Schädigung der Darmmukosa-Barriere bei UC-Modellmäusen verbessert. Es wurden 8 Wochen alte SPF-BALB/c-Mäuse, jeweils zur Hälfte männlich und weiblich, geschichtet nach Geschlecht und mittels Zufallszahlentabelle in eine Kontrollgruppe (15 Tiere) und eine Modellgruppe (41 Tiere) eingeteilt. Ein chronisches UC-Modell wurde durch Trinkwasser mit 3 % Dextran-Sulfat-Natrium induziert. Erfolgreich modellierte Mäuse wurden zufällig in die Modellgruppe, die Elektroakupunktur+11B11-Gruppe sowie die Elektroakupunktur-Gruppe eingeteilt, jeweils 12 Tiere pro Gruppe. In der Elektroakupunktur+11B11-Gruppe wurde vor der Behandlung intraperitoneal der IL-4-Inhibitor 11B11 (10 mg/kg) injiziert; in der Elektroakupunktur-Gruppe erfolgte die Nadelung an den Punkten "Guanyuan", "Tianshu", "Zusanli" und "Shangjuxu" für jeweils 20 Minuten; jede Gruppe erhielt eine tägliche Behandlung über 14 Tage. Nach der Behandlung wurden bewertet: ① Symptomverbesserung: einschließlich Krankheitsaktivitätsindex (DAI), makroskopische Kolonbewertung und histopathologische Veränderungen des Kolongewebes nach HE-Färbung; ② Struktur und Funktion der Darmmukosa-Barriere: Beobachtung der Tight-Junction-Struktur im Kolon mittels Transmissionselektronenmikroskopie, In-vivo-Bildgebung zur Darmleckage durch FITC-4D, Immunfluoreszenznachweis der positiven Expression von Tight-Junction-Proteinen ZO-1 und Occludin im Kolongewebe; ③ Aktivierung des IL-4/JAK1/STAT6-Signalwegs: Bestimmung der relativen Proteinexpression von IL-4, phosphoryliertem (p)-JAK1/JAK1 und p-STAT6/STAT6 im Kolongewebe mittels Western Blot; ④ Marker der M2-Makrophagen-Polarisation: Durchflusszytometrie zur Bestimmung des Verhältnisses CD206+/CD86+ in mesenterischen Lymphknoten, Immunfluoreszenz zur Bestimmung der positiven Expression von CD206 und Arginase-1 (Arg-1) im Kolongewebe. Im Vergleich zur Kontrollgruppe zeigte die Modellgruppe signifikant erhöhte DAI- und makroskopische Bewertungen (P<0,05), gestörte Mukosastruktur des Kolons, starke intestinale Fluoreszenzleckage, signifikant verringerte positive Expression von ZO-1 und Occludin (P<0,05), verringerte relative Proteinexpression von IL-4, p-JAK1/JAK1 und p-STAT6/STAT6 (P<0,05), sowie verminderte CD206+/CD86+-Verhältnisse und positive Expression von CD206 und Arg-1 (P<0,05). Im Vergleich zur Modellgruppe zeigte die Elektroakupunktur-Gruppe eine Verringerung der DAI- und makroskopischen Bewertungen (P<0,05), verbesserte Mukosastruktur des Kolons, reduzierte intestinale Fluoreszenzleckage, signifikant erhöhte positive Expression von ZO-1 und Occludin (P<0,05), erhöhte relative Proteinexpression von IL-4, p-JAK1/JAK1 und p-STAT6/STAT6 (P<0,05) sowie erhöhte CD206+/CD86+-Verhältnisse und positive Expression von CD206 und Arg-1 (P<0,05). Im Vergleich zur Elektroakupunktur-Gruppe wies die Elektroakupunktur+11B11-Gruppe eine Verringerung der DAI- und makroskopischen Bewertungen (P<0,05), eine gestörte Mukosastruktur, deutliche intestinale Fluoreszenzleckage, signifikant verringerte positive Expression von ZO-1 und Occludin (P<0,05), verringerte relative Proteinexpression von IL-4, p-JAK1/JAK1 und p-STAT6/STAT6 (P<0,05) sowie verminderte CD206+/CD86+-Verhältnisse und positive Expression von CD206 und Arg-1 (P<0,05) auf. Schlussfolgerung: Elektroakupunktur kann die Reparatur der Darmmukosa-Barriere bei chronischen UC-Mäusen fördern und Symptome wie Durchfall und rektale Blutungen verbessern. Der Mechanismus steht im Zusammenhang mit der Aktivierung des IL-4/JAK1/STAT6-Signalwegs und der Induktion der M2-Makrophagen-Polarisation im Kolongewebe.
关键词
Elektroakupunktur;Colitis ulcerosa;Darmmukosa-Barriere;M2-Makrophagen;Interleukin-4/Tyrosinkinase-1/Signaltransduktions- und Transkriptionsaktivator 6