Auswirkung der Elektroakupunktur auf den Signalweg der Nekroptose RIPK1/RIPK3/MLKL bei Ratten mit präkanzerösen Läsionen des Magens

JIANG Ting ,  

LI Guan-ying ,  

WANG Xin ,  

TIAN Zhi-wen ,  

ZHANG Sheng-xiong ,  

PAN Hua-shan ,  

LIU Wei ,  

摘要

Ziel der Studie war es, die Auswirkungen der Elektroakupunktur auf die Schleimhautschädigung des Magens und den Signalweg der Rezeptor-interagierenden Kinase nekrotischer Apoptose (RIPK)1/RIPK3/Protein mit gemischtem Lymphomkinase-Domänen-ähnlicher Struktur (MLKL) bei Ratten mit präkanzerösen Läsionen des Magens (GPL) zu beobachten und deren möglichen Wirkmechanismus zu erforschen. Methoden: 32 männliche SD-Ratten wurden zufällig in eine Kontrollgruppe, Modellgruppe, Elektroakupunkturgruppe und Nicht-Akupunkturpunkt-Gruppe eingeteilt, jeweils 8 Ratten pro Gruppe. Das GPL-Modell wurde durch freie Trinkgabe einer Lösung aus N-Methyl-N′-nitro-N-nitrosoguanidin in Kombination mit unregelmäßiger Fütterung über 20 Wochen hergestellt. Ab der 13. Woche nach Modellierung erhielt die Elektroakupunkturgruppe eine Behandlung an den beidseitigen Punkten „Zusanli“ und „Zhongwan“, die Nicht-Akupunkturpunkt-Gruppe erhielt eine Elektroakupunktur 5 mm neben den Akupunkturpunkten mit denselben Parametern, jeweils 20 Minuten pro Sitzung, einmal täglich, fünfmal pro Woche, über 8 Wochen. Der allgemeine Zustand und die Körpermassenveränderung der Ratten wurden beobachtet; die pathologischen Veränderungen des Magengewebes wurden mit Hämatoxylin-Eosin (HE) und Alcianblau-Periodische Säure-Schiff (AB-PAS) Färbungen untersucht; die Serumspiegel von Tumornekrosefaktor α (TNF-α), Interleukin 1β (IL-1β), Transforming Growth Factor β1 (TGF-β1) wurden mittels ELISA gemessen; die positive Expression des Homöobox-Transkriptionsfaktors (CDX2) im Magengewebe wurde immunhistochemisch nachgewiesen; die mRNA-Expressionsniveaus von Ki67, α-Methylacyl-CoA-Racemase (AMACR), Geschlechtsbestimmungsbereich Y-Box-Protein 2 (SOX2), CDX1, RIPK1, RIPK3, MLKL sowie die apoptosebezogenen Proteine Caspase-8, Caspase-3, Caspase-7 wurden mittels Echtzeit-Fluorquantitativer PCR bestimmt; die Proteinexpressionsniveaus von CDX2, AMACR, p-RIPK1, RIPK1, p-RIPK3, RIPK3, p-MLKL, MLKL, Caspase-8, Caspase-3 wurden mittels Western Blot analysiert. Ergebnisse: Im Vergleich zur Kontrollgruppe zeigten die Modellratten eine verringerte Zunahmerate der Körpermasse und eine reduzierte durchschnittliche tägliche Nahrungsaufnahme (P<0,01); die Öffnungen der Magendrüsen in der Schleimhaut wurden tiefer, begleitet von Drüsenatrophie und intestinaler Metaplasie; die Serumspiegel von TNF-α, IL-1β und TGF-β1 waren erhöht (P<0,01); die mRNA-Expressionsniveaus von Ki67, AMACR, CDX1, RIPK1, RIPK3, MLKL im Magengewebe waren erhöht (P<0,05, P<0,01), die Proteinexpression von CDX2, AMACR sowie die Verhältnisse p-RIPK1/RIPK1, p-RIPK3/RIPK3, p-MLKL/MLKL waren erhöht (P<0,01, P<0,05), die mRNA- und Proteinexpressionsniveaus von SOX2, Caspase-8, Caspase-3 waren verringert (P<0,01, P<0,05). Im Vergleich zur Modellgruppe verbesserte sich der Zustand der Elektroakupunktur-Ratten, die Zunahmerate der Körpermasse und die durchschnittliche tägliche Nahrungsaufnahme stiegen (P<0,01, P<0,05); die Atrophie und intestinale Metaplasie der Magenschleimhaut wurde reduziert; die Serumspiegel von TNF-α, IL-1β, TGF-β1 sanken (P<0,05, P<0,01); die mRNA-Expressionsniveaus von Ki67, AMACR, CDX1, RIPK1, RIPK3, MLKL nahmen ab (P<0,05, P<0,01), die Proteinexpression von CDX2, AMACR und die Verhältnisse p-RIPK1/RIPK1, p-RIPK3/RIPK3, p-MLKL/MLKL nahmen ab (P<0,05), die mRNA- und Proteinlevels von SOX2, Caspase-8, Caspase-3 stiegen (P<0,01, P<0,05). Im Vergleich zur Elektroakupunkturgruppe zeigten Ratten der Nicht-Akupunkturpunkt-Gruppe gesenkte Zunahmeraten der Körpermasse und reduzierte durchschnittliche tägliche Nahrungsaufnahme (P<0,05, P<0,01), die Anordnung der Drüsen im Magengewebe blieb gestört, es gab keine histopathologische Verbesserung, und die intestinale Metaplasie wurde nicht gelindert; die Serumspiegel von TNF-α und IL-1β waren erhöht (P<0,05); die mRNA-Expressionsniveaus von Ki67, CDX1, MLKL waren erhöht (P<0,01, P<0,05), die Proteinexpression von AMACR und die Verhältnisse p-RIPK1/RIPK1, p-RIPK3/RIPK3, p-MLKL/MLKL waren erhöht (P<0,05, P<0,01), die mRNA- und Proteinexpression von Caspase-3 war verringert (P<0,01). Schlussfolgerung: Elektroakupunktur an den Punkten „Zusanli“ und „Zhongwan“ kann die Magenschleimhautschädigung bei GPL-Ratten verbessern, vermutlich durch die Abschwächung der entzündlichen Reaktion der Magenschleimhaut und die Hemmung der Aktivierung des Signalwegs der Nekroptose RIPK1/RIPK3/MLKL.

关键词

präkanzeröse Läsionen des Magens; Elektroakupunktur; Nekroptose; Signalweg RIPK1/RIPK3/MLKL

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