Einfluss der Elektroakupunktur auf Proteine der mitochondrialen fehlgefalteten Proteinantwort im Dickdarm von Mäusen mit funktioneller Verstopfung

Wang Wen ,  

Li Yanqiu ,  

Zeng Weijian ,  

Yan Xiangyun ,  

He Zhaoxuan ,  

Xiao Xianjun ,  

Li Ying ,  

Yao Junpeng ,  

摘要

Ziel ist es, die Wirkung der Elektroakupunktur an den Punkten „Tianshu“ und „Shangjuxu“ auf die Expression von Proteinen der mitochondrialen fehlgefalteten Proteinantwort (UPRmt) im Dickdarm von Mäusen mit funktioneller Verstopfung (FC) zu beobachten und den möglichen Mechanismus zur Verbesserung der FC-Symptome durch Elektroakupunktur zu untersuchen. Methoden: 18 männliche C57BL/6J-Mäuse wurden zufällig in eine Kontrollgruppe, eine Modellgruppe und eine Elektroakupunkturgruppe mit je 6 Mäusen eingeteilt. Das FC-Modell wurde durch orale Verabreichung von Loperamid über 14 Tage hergestellt. In der Elektroakupunkturgruppe wurde eine abwechselnde Intervention an einseitigen Punkten „Tianshu“ und „Shangjuxu“ (abwechselnde Wellen, 3 Hz/15 Hz) durchgeführt, mit einer kontinuierlichen Behandlung von 5-mal pro Woche, insgesamt 10 Eingriffen, während die Kontroll- und Modellgruppen nur fixiert wurden. Die gastrointestinale Funktion wurde anhand der Zeit bis zur Ausscheidung der ersten blauen Kotprobe, der Anzahl der Kotpartikel in 6 Stunden, dem Kotkonsistenz-Score, dem Wassergehalt des Kots und der Dünndarmtransitrate beurteilt. Die pathologischen Veränderungen im Dickdarmgewebe wurden mittels HE-Färbung untersucht, die mitochondriale Ultrastruktur mittels Transmissionselektronenmikroskopie beobachtet, das mitochondriale Membranpotential und der ROS-Spiegel (mtROS) mittels Durchflusszytometrie bestimmt, der mitochondriale ATP-Gehalt kolorimetrisch gemessen und die Expression der Schlüsselmarker des UPRmt HSP60 (Hitzeschockprotein 60) und LONP1 (Lon-Protease 1) im Dickdarmgewebe immunhistochemisch analysiert. Ergebnisse: Im Vergleich zur Kontrollgruppe zeigte die Modellgruppe eine verlängerte Zeit bis zur Ausscheidung der ersten blauen Kotprobe (P<0,01), eine verminderte Anzahl von Kotpartikeln in 6 Stunden (P<0,01), niedrigere Werte bei Kotkonsistenz, Wassergehalt und Dünndarmtransit (P<0,01, P<0,05). Im Dickdarmgewebe zeigten die Mitochondrien deutliche Schwellungen, Membranschäden und starke Crista-Unterbrechungen, ein verringerte mitochondriales Membranpotential (P<0,01), einen abgesunkenen ATP-Gehalt (P<0,01), erhöhte mtROS-Spiegel (P<0,01) und eine verminderte positive Expression von HSP60 und LONP1 in den glatten Muskelzellen (SMC) des Dickdarms (P<0,01). Nach der Intervention zeigte die Elektroakupunkturgruppe im Vergleich zur Modellgruppe eine verkürzte Zeit bis zur Ausscheidung der ersten blauen Kotprobe (P<0,01), eine erhöhte Anzahl von Kotpartikeln in 6 Stunden (P<0,01), erhöhte Werte bei Kotkonsistenz, Wassergehalt und Dünndarmtransit (P<0,01, P<0,05). Die Mitochondrien im Dickdarmgewebe wiesen leichte Schwellungen auf, Membran- und Cristaschäden verbesserten sich deutlich, das mitochondriale Membranpotential stieg (P<0,01), der ATP-Spiegel erhöhte sich (P<0,01), der mtROS-Spiegel sank (P<0,01) und die positive Expression von HSP60 und LONP1 in SMC stieg (P<0,05). Fazit: Die Elektroakupunktur an den Punkten „Tianshu“ und „Shangjuxu“ kann die Darmtransitfunktion bei FC-Mäusen effektiv fördern, die Struktur und Funktion der Mitochondrien in glatten Muskelzellen des Dickdarms reparieren, wahrscheinlich durch Hochregulation der Expression von HSP60 und LONP1 in SMC, wodurch die UPRmt-Reaktion aktiviert wird.

关键词

Elektroakupunktur; funktionelle Verstopfung; Mitochondrien; fehlgefaltete Proteinantwort; Hitzeschockprotein 60; Lon-Protease

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