Elektrostimulation des Punkts „Zusanli“ mildert Colonmukosaverletzungen nach 5-FU-Chemotherapie bei Mäusen mit kolorektalen Tumortransplantaten und beeinflusst NF-κB- und AQP8-Proteine

ZHANG Xue-jun ,  

YANG Xiao-dan ,  

ZHAO Jin-yan ,  

YANG Ting-huang ,  

LIN Jiu-mao ,  

摘要

Ziel der Studie ist es, die Wirkung der Elektrostimulation des Akupunkturpunkts „Zusanli“ auf die Schädigung der Kolonschleimhaut bei Mäusen mit großem Darmkrebs-Transplantattumoren nach einer Chemotherapie mit 5-Fluorouracil (5-FU) sowie die Expression des Kernfaktors κB (NF-κB) und des Aquaporin-8-Proteins (AQP8) zu beobachten und mögliche Wirkmechanismen zu erforschen. Methode: Ein Tiermodell für kolorektale Krebs-Transplantattumore wurde durch subkutane Injektion der kolorektalen Krebszelllinie CT26 in BALB/c-Mäuse etabliert. Sobald das Tumorvolumen 100~300 mm3 erreichte, wurden die erfolgreich modellierten Mäuse zufällig in die Gruppen Tumorlast, Chemotherapie und Chemotherapie + Elektrostimulation unterteilt, mit jeweils 6 Mäusen pro Gruppe. Zusätzlich wurden 6 normale BALB/c-Mäuse als normale Kontrollgruppe genommen. Die Chemotherapie- und die Chemotherapie + Elektrostimulation-Gruppen begannen am Tag der Gruppeneinteilung mit der täglichen intraperitonealen Injektion der 5-FU-Lösung (50 mg/kg, 0,01 mL/g), einmal täglich für 5 Tage; die Chemotherapie + Elektrostimulation-Gruppe erhielt sofort nach der Chemotherapie eine bilaterale Elektrostimulation des Punktes „Zusanli“ mit kontinuierlicher Welle, Frequenz 2 Hz, Stärke 1~2 mA, 5 Minuten pro Sitzung, für 5 Tage hintereinander. Während des Experiments wurde täglich der Krankheitsaktivitätsindex (DAI) der Mäuse bewertet; das Tumorvolumen wurde einmal täglich gemessen, nach der Gewebeentnahme wurden die Tumormasse und die Dickdarmlänge gemessen; die Morphologie des Dickdarmgewebes wurde mittels HE-Färbung beobachtet; der Gehalt an Diaminooxidase (DAO) und D-Laktat (D-LA) im Serum wurde mittels ELISA bestimmt; die positive Expression von AQP8 im Dickdarm wurde immunhistochemisch untersucht; der Kerntransfer von NF-κB im Dickdarm wurde mittels Immunfluoreszenz untersucht; die Expressionsniveaus der Proteine NF-κB und AQP8 im Dickdarm wurden durch Western Blot bestimmt. Ergebnisse: Im Vergleich zur normalen Gruppe zeigten Mäuse der Tumorlastgruppe keine statistisch signifikanten Unterschiede bei den Indikatoren (Tumorvolumen und -masse wurden nicht verglichen). Im Vergleich zur Tumorlastgruppe stieg der DAI-Wert in der Chemotherapiegruppe an (P<0,05), Darmlänge, Tumorvolumen und Tumormasse nahmen ab (P<0,05), die Serumspiegel von DAO und D-LA erhöhten sich (P<0,05), die Expression und der Kerntransfer von NF-κB-Protein im Dickdarm stiegen an (P<0,05), das Expressionsniveau von AQP8 im Darmgewebe sank (P<0,05). Im Vergleich zur Chemotherapiegruppe sanken in der Chemotherapie + Elektrostimulation-Gruppe der DAI-Wert sowie die Serumspiegel von DAO und D-LA (P<0,05), die Expression und der Kerntransfer von NF-κB im Dickdarm nahmen ab (P<0,05), das Expressionsniveau von AQP8 im Darmgewebe stieg (P<0,05). Die HE-Färbung zeigte, dass die Darmgewebestruktur der normalen und Tumorlastgruppen-Mäuse keine Auffälligkeiten aufwies, während das Darmgewebe der Chemotherapie-Mäuse eine Zerstörung der Krypten, eine Entzündungszellinfiltration und andere pathologische Schädigungen aufwies; im Vergleich zur Chemotherapiegruppe wiesen Mäuse der Chemotherapie + Elektrostimulation-Gruppe eine Zunahme der Kolonvilluslänge, eine Verbesserung der gestörten Zellordnung und eine Verringerung der Entzündungsinfiltration auf. Fazit: Die Elektrostimulation des Punkts „Zusanli“ kann die durch die 5-FU-Chemotherapie induzierte Überaktivierung des NF-κB-Signalwegs bei tumorladenen Mäusen hemmen, die Expression des AQP8-Proteins erhöhen, die Darmmukosareparatur fördern, die Freisetzung von DAO und D-LA vermindern und somit die Darmbarrierefunktion erhalten.

关键词

Elektrostimulation; transplantierter kolorektaler Krebs; 5-Fluorouracil; Darmmukosaschädigung; Dickdarmgewebe; Kernfaktor κB; Aquaporin 8

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