Elektroakupunktur am Punkt "Zu San Li" verringert die Schleimhautschädigung im Dickdarm von Mäusen mit transplantiertem Kolonkarzinom nach 5-FU-Chemotherapie und beeinflusst die Proteine NF-κB und AQP8

ZHANG Xue-jun ,  

YANG Xiao-dan ,  

ZHAO Jin-yan ,  

YANG Ting-huang ,  

LIN Jiu-mao ,  

摘要

Ziel der Studie war es, die Wirkung der Elektroakupunktur am Punkt "Zu San Li" auf die Schleimhautschädigung des Dickdarms bei Mäusen mit transplantiertem Kolonkarzinom nach einer Chemotherapie mit 5-Fluorouracil (5-FU) sowie auf die Expression von Kernfaktor κB (NF-κB) und Aquaporin 8 (AQP8) zu untersuchen und mögliche Wirkmechanismen zu ergründen. Ein Tiermodell für transplantierten Dickdarmkrebs wurde durch subkutane Injektion der Kolonkarzinom-Zelllinie CT26 in BALB/c-Mäuse etabliert. Wenn das Tumorvolumen 100 bis 300 mm3 erreichte, wurden die erfolgreich modellierten Mäuse zufällig in die Gruppen Tumortragend, Chemotherapie und Chemotherapie + Elektroakupunktur eingeteilt, jeweils mit 6 Mäusen pro Gruppe. Weitere 6 normale BALB/c-Mäuse dienten als Kontrollgruppe. Die Gruppen Chemotherapie und Chemotherapie + Elektroakupunktur erhielten ab Gruppierungstag eine tägliche intraperitoneale Injektion von 5-FU (50 mg/kg, 0,01 mL/g) für 5 Tage. Die Gruppe Chemotherapie + Elektroakupunktur erhielt täglich nach der Chemotherapie eine bilaterale Elektroakupunktur an "Zu San Li" mit kontinuierlicher Welle, Frequenz 2 Hz, Intensität 1–2 mA, 5 Minuten pro Sitzung, 5 Tage lang. Während des Experiments wurde täglich der Krankheitsaktivitätsindex (DAI) bewertet; das Tumorvolumen einmal täglich gemessen; nach der Probenahme wurden Tumormasse und Darmlänge bestimmt; die Morphologie des Dickdarmgewebes mit HE-Färbung untersucht; Serumspiegel von Diaminoxidase (DAO) und D-Laktat (D-LA) per ELISA gemessen; positive Expression von AQP8 im Dickdarm immunhistochemisch festgestellt; Kerntranslokation von NF-κB im Dickdarm durch Immunfluoreszenz erfasst; und die Expressionsniveaus von NF-κB- und AQP8-Proteinen im Dickdarm mittels Western Blot analysiert. Im Vergleich zur Normalgruppe zeigten tumortragende Mäuse keine statistisch signifikanten Unterschiede in den gemessenen Parametern (Tumorvolumen und Masse wurden nicht verglichen). Im Vergleich zu tumortragenden Mäusen zeigte die Chemotherapiegruppe einen erhöhten DAI-Score (P<0,05), eine verminderte Darmlänge sowie ein reduziertes Tumorvolumen und Tumormasse (P<0,05), erhöhte Serumspiegel von DAO und D-LA (P<0,05), eine gesteigerte Expression und Kerntranslokation von NF-κB im Dickdarm (P<0,05) sowie eine verringerte Expression von AQP8 im Dickdarmgewebe (P<0,05). Im Vergleich zur Chemotherapiegruppe zeigte die Gruppe Chemotherapie + Elektroakupunktur reduzierte DAI-Werte sowie gesenkte Serumspiegel von DAO und D-LA (P<0,05), verminderten NF-κB-Proteinexpression und Kerntranslokation (P<0,05) sowie eine erhöhte Expression von AQP8 im Dickdarm (P<0,05). HE-Färbung zeigte, dass die Darmgewebestruktur der Normal- und Tumorgruppen ohne Auffälligkeiten war, während die Chemotherapiegruppe Degradierung der Krypten, entzündliche Zellinfiltrationen und andere pathologische Schäden im Dickdarmgewebe aufwies; im Vergleich zur Chemotherapie zeigte die Chemotherapie + Elektroakupunktur-Gruppe eine Zunahme der Darmzottenlänge, eine Verbesserung der Zellorganisation im Gewebe und eine Verminderung der Entzündungsinfiltrate. Fazit: Die Elektroakupunktur am Punkt "Zu San Li" kann die durch die 5-FU-Chemotherapie induzierte Überaktivierung des NF-κB-Signalwegs bei tumortragenden Mäusen hemmen, die Expression des Proteins AQP8 hochregulieren, die Schleimhautschädigung reduzieren und die Freisetzung von DAO und D-LA verringern, wodurch die Darmbarrierefunktion erhalten bleibt.

关键词

Elektroakupunktur; transplantiertes kolorektales Karzinom; 5-Fluorouracil; Schleimhautschädigung; Dickdarmgewebe; Kernfaktor κB; Aquaporin 8

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