Elektroakupunktur am „Zusanli“-Punkt mindert das Kolonschleimhautschaden nach 5-FU-Chemotherapie bei Mäusen mit transplantierten Dickdarmkrebstumoren und beeinflusst die NF-κB- und AQP8-Proteine

ZHANG Xue-jun ,  

YANG Xiao-dan ,  

ZHAO Jin-yan ,  

YANG Ting-huang ,  

LIN Jiu-mao ,  

摘要

Ziel war es, die Wirkung der Elektroakupunktur am „Zusanli“-Punkt auf die Schädigung der Dickdarmschleimhaut nach Chemotherapie mit 5-Fluorouracil (5-FU) bei Mäusen mit transplantierten Dickdarmkrebstumoren sowie auf die Expression des Nuklearfaktors κB (NF-κB) und des Aquaporin-8-Proteins (AQP8) zu beobachten und mögliche Wirkmechanismen zu untersuchen. Methode: Ein Tiermodell für transplantierten Dickdarmkrebs wurde durch subkutane Injektion der Dickdarmkrebszellinie CT26 in BALB/c-Mäuse etabliert. Wenn die Tumorgröße 100~300 mm3 erreichte, wurden erfolgreich modellierte Mäuse zufällig in die Gruppen Tumortragend, Chemotherapie und Chemotherapie + Elektroakupunktur eingeteilt, jeweils mit 6 Mäusen. Zusätzlich wurden 6 normale BALB/c-Mäuse als Kontrollgruppe verwendet. Die Gruppen Chemotherapie und Chemotherapie + Elektroakupunktur erhielten am Tag der Gruppeneinteilung eine intraperitoneale Injektion von 5-FU-Lösung (50 mg/kg, 0,01 mL/g) einmal täglich für 5 Tage; die Gruppe Chemotherapie + Elektroakupunktur erhielt außerdem täglich eine Elektroakupunktur bilateral am „Zusanli“-Punkt mit kontinuierlicher Welle, Frequenz 2 Hz, Intensität 1~2 mA, 5 Minuten pro Sitzung für 5 Tage. Während des Experiments wurde täglich der Krankheitsaktivitätsindex (DAI) der Mäuse bewertet; das Tumorvolumen wurde einmal täglich gemessen; nach der Gewebeentnahme wurden Tumormasse und Darmlänge bestimmt; die Kolonmorphologie wurde mittels HE-Färbung untersucht; die Serumspiegel von Diaminoxydase (DAO) und D-Laktat (D-LA) wurden mittels ELISA bestimmt; die AQP8-positive Expression im Kolon wurde immunhistochemisch nachgewiesen; die nukleare Translokation von NF-κB im Kolon wurde immunfluoreszierend detektiert; die Expressionsniveaus von NF-κB- und AQP8-Proteinen im Kolon wurden mittels Western Blot analysiert. Ergebnisse: Im Vergleich zur Kontrollgruppe zeigten Mäuse der Tumortragend-Gruppe keine signifikanten Unterschiede (Tumorvolumen und -masse wurden nicht verglichen). Im Vergleich zur Tumortragend-Gruppe stieg der DAI in der Chemotherapie-Gruppe (P<0.05), während Kolonlänge, Tumorvolumen und -masse abnahmen (P<0.05). Serum-DAO- und D-LA-Werte stiegen an (P<0.05), die NF-κB-Proteinexpression und nukleare Translokation im Kolon nahmen zu (P<0.05), der AQP8-Proteinexpression in Kolongewebe nahm ab (P<0.05). Im Vergleich zur Chemotherapie-Gruppe waren DAI sowie Serum-DAO- und D-LA-Spiegel in der Chemotherapie + Elektroakupunktur-Gruppe reduziert (P<0.05), die NF-κB-Proteinexpression und nukleare Translokation waren verringert (P<0.05), die AQP8-Proteinexpression im Kolon gesteigert (P<0.05). Die HE-Färbung zeigte, dass die Kolonstruktur in der Kontroll- und Tumortragend-Gruppe unauffällig war, während bei der Chemotherapie-Gruppe pathologische Läsionen der Kolonwand mit Kryptenzerstörung und entzündlicher Zellinfiltration auftraten; im Vergleich zur Chemotherapie-Gruppe zeigte die Chemotherapie + Elektroakupunktur-Gruppe eine Verlängerung der Darmzotten, eine Verbesserung der Zellordnung im Gewebe und eine Abschwächung der Entzündungsinfiltration. Schlussfolgerung: Die Elektroakupunktur am „Zusanli“-Punkt kann die durch 5-FU-Chemotherapie induzierte Überaktivierung des NF-κB-Signalwegs bei tumortragenden Mäusen hemmen, die Expression von AQP8 steigern, die Schädigung der Darmmukosa reduzieren und die Freisetzung von DAO und D-LA verringern, wodurch die Darmbarrierefunktion erhalten bleibt.

关键词

Elektroakupunktur; transplantierter kolorektaler Krebs; 5-Fluorouracil; Darmmukosaschaden; Kolongewebe; Nuklearfaktor κB; Aquaporin-8-Protein

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