Mechanismus der Regulation der Mikroglia-Polarisierung durch Elektroakupunktur "Tiao Shen Tong Luo" über den Nrf2/TREM2-Weg bei Ratten mit Lern- und Gedächtnisstörungen nach zerebraler Ischämie-Reperfusion

SHI Rong ,  

MA Tie-ming ,  

SUN Shi-jing ,  

JIANG Jing ,  

LI Jia-xin ,  

WU Qiong ,  

ZHOU Zi-xi ,  

ZHANG Jia-wei ,  

YANG Rui-rui ,  

ZHAO Xi-tong ,  

MA Jun-jie ,  

ZHANG Xiao-qing ,  

CHEN Yi-ran ,  

摘要

Ziel ist es, die Wirkung der Elektroakupunktur "Tiao Shen Tong Luo" auf den Signalweg des kernfaktor-erythroid-2-ähnlichen Faktors 2 (Nrf2)/ des myeloiden zellaktivierenden Rezeptors 2 (TREM2) im Hippocampus von Ratten mit Verschluss/Reperfusion der mittleren Hirnarterie (MCAO/R) und Lern- und Gedächtnisstörungen zu untersuchen sowie deren regulierende Wirkung auf die Polarisierung der Mikroglia im Hippocampus. Methoden: SD-Ratten wurden zufällig in eine 7-tägige Sham-Operationsgruppe (10 Tiere), eine 14-tägige Sham-Operationsgruppe (10 Tiere) und eine Modellgruppe eingeteilt. Das MCAO/R-Modell wurde gemäß der Koizumi-Seilverschlussmethode hergestellt, und mittels Morris-Wasserlabyrinth wurden Ratten mit Lern- und Gedächtnisstörungen selektiert. Erfolgreich modellierte Ratten wurden zufällig in 7-tägige Modellgruppe, 7-tägige Elektroakupunkturgruppe, 14-tägige Modellgruppe und 14-tägige Elektroakupunkturgruppe eingeteilt, jeweils 10 Tiere pro Gruppe. Die Elektroakupunkturgruppen erhielten die "Tiao Shen Tong Luo"-Behandlung mit Elektroakupunktur, 10 min pro Sitzung, einmal täglich, jeweils 7 bzw. 14 Tage hintereinander. Die neurologische Funktionsbeeinträchtigung der Ratten wurde mit dem modifizierten neurologischen Skalen-Score (mNSS) bewertet. Die Lern- und Gedächtnisfähigkeit wurde mit dem Morris-Wasserlabyrinthtest überprüft. Die histopathologische Morphologie im CA1-Bereich des Hippocampus wurde mittels HE-Färbung untersucht. Die Morphologie der Neuronen und Nisslkörper im CA1-Bereich wurde mittels Nissl-Färbung beobachtet. Die Anzahl der positiv markierten Zellen CD68/Iba1 und CD206/Iba1 wurde durch zweifache Immunfluoreszenzfärbung bestimmt. Die relative Proteinausdruck von Nrf2, TREM2, DAP12, TNF-α und TGF-β wurde im Hippocampus mittels Western-Blot analysiert. Ergebnisse: Im Vergleich zur jeweiligen Sham-Operationsgruppe stiegen mNSS-Werte in der 7- und 14-Tage-Modellgruppe an (P<0,01). Die Neuronen im CA1-Bereich des Hippocampus waren locker angeordnet, die Nisslkörperzahl verringerte sich, und die Proteinexpression von Nrf2, TREM2 und DAP12 war reduziert (P分别小于0.05和0.01). In der 14-Tage-Modellgruppe verlängerte sich die Fluchtlatenzzeit (P<0,01), die Anzahl der Durchquerungen der ursprünglichen Plattform und die Verweildauer im Zielquadranten nahmen ab (P<0,01). Die Anzahl der M1 CD68+/Iba1+ positiven Zellen im CA1-Bereich nahm zu (P<0,05), ebenso die Proteinexpression von TNF-α (P<0,01). Im Vergleich zur jeweiligen Modellgruppe sanken die mNSS-Werte in den 7- und 14-tägigen Elektroakupunkturgruppen (P<0,01). Die neuronalen Lücken im CA1-Bereich wurden verringert, die Anzahl der Nisslkörper nahm zu, und die Proteinexpression von TNF-α sank (P分别小于0.05和0.01). Die Proteinexpression von Nrf2 und TREM2 stieg an (P分别小于0.05和0.01). In der 14-tägigen Elektroakupunkturgruppe verkürzte sich die Fluchtlatenzzeit (P<0,01), die Anzahl der Durchquerungen der ursprünglichen Plattform und die Verweildauer im Zielquadranten stiegen (P分别小于0.05和0.01). Die Anzahl der M1 CD68+/Iba1+ positiven Zellen nahm ab (P<0,01), während die Anzahl der M2 CD206+/Iba1+ positiven Zellen sowie die Proteinexpression von DAP12 und TGF-β zunahmen (P分别小于0.01和0.05). Im Vergleich zur 7-tägigen Elektroakupunkturgruppe sanken die mNSS-Werte in der 14-tägigen Elektroakupunkturgruppe (P<0,05), die Neuronen im CA1-Bereich waren dicht angeordnet und hatten eine annähernd normale Morphologie, die Proteinexpression von TREM2 stieg an (P<0,05). Schlussfolgerung: Die Elektroakupunktur "Tiao Shen Tong Luo" kann die Lern- und Gedächtnisfunktion von Ratten mit MCAO/R verbessern. Dies kann mit der Aktivierung des Nrf2/TREM2-Signalwegs im Hippocampus, der Hemmung der Mikroglia-Polarisierung zu M1 und der Förderung der Polarisierung zu M2 zusammenhängen, wobei die Wirkung der 14-tägigen Elektroakupunkturintervention ausgeprägter war.

关键词

Zerebrale Ischämie-Reperfusion; Lern- und Gedächtnisstörungen; Elektroakupunktur "Tiao Shen Tong Luo"; Mikroglia-Polarisierung; Nrf2/TREM2-Signalweg

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