Studie des Mechanismus, durch den Elektroakupunktur Schmerzen bei Ratten mit zervikaler Radikulopathie durch Regulation des Piezo1-Proteins im NO/cGMP/PKG-Signalweg verbessert

Huang Wenjing ,  

Su Shengyong ,  

Wang Tian ,  

Su Hong ,  

Huang Xinyu ,  

Li Xin ,  

Zheng Guangmei ,  

Yin Lili ,  

Xu Zhiyi ,  

Huang Ying ,  

Wei Gangliang ,  

Li Xiaoming ,  

摘要

Ziel: Untersuchung der regulierenden Wirkung der Elektroakupunktur auf das Piezo1-Protein bei Ratten mit zervikaler Radikulopathie (CSR) und deren Einfluss auf den NO/cGMP/PKG-Signalweg sowie Erforschung des Schmerzhemmungsmechanismus der Elektroakupunktur bei CSR. Methoden: Männliche SD-Ratten wurden zufällig in eine Sham-Gruppe, eine Modellgruppe, eine Elektroakupunkturgruppe und eine Elektroakupunktur+Yoda1-Gruppe mit jeweils 10 Tieren eingeteilt. Das CSR-Modell wurde in der Modell-, Elektroakupunktur- und Elektroakupunktur+Yoda1-Gruppe mittels Katheterimplantation in den Wirbelkanal hergestellt. Die Elektroakupunkturgruppe erhielt eine Behandlung an den bilateral lokalisierten Punkten „Hegu“ und „Taichong“, 20 Minuten pro Sitzung, einmal täglich für 7 Tage; die Elektroakupunktur+Yoda1-Gruppe erhielt vor der Behandlung eine intraperitoneale Injektion des Piezo1-Agonisten Yoda1 (1,5 mg/kg). Vor und nach der Intervention wurden Gangbewertung, mechanischer Rückzugschwellenwert und Latenzzeit der thermischen Rückzugsreaktion bei den Ratten gemessen; pathologische Veränderungen im Rückenmark wurden mittels HE-Färbung beobachtet; die Piezo1-mRNA-Expressionslevel im Rückenmark wurden durch qPCR ermittelt; die Expressionslevel von Piezo1 und Calmodulin (CaM) wurden durch doppelte immunfluoreszente Färbung nachgewiesen; die Proteinausdruckswerte von CaM, neuronaler NO-Synthase (nNOS), löslicher Guanylatzyklase (sGC) und PKG1 wurden mittels Western Blot analysiert; der cGMP-Gehalt wurde mittels ELISA bestimmt; der NO-Gehalt wurde durch Nitrit-Färbemethode gemessen. Ergebnisse: Im Vergleich zur Sham-Gruppe zeigten Ratten der Modellgruppe vor der Intervention eine erhöhte Gangbewertung (P<0.01), einen verringerten mechanischen Rückzugschwellenwert und eine verkürzte Latenzzeit der thermischen Rückzugsreaktion (P<0.01); signifikant erhöhte Piezo1-mRNA-Level, Intensitäten der Immunfluoreszenz von Piezo1 und CaM mit positiver Ko-Lokalisierung, relative Protein-Expressionslevel von CaM, nNOS, sGC, PKG1 sowie cGMP- und NO-Gehalte im Rückenmark (P<0.01); HE-Färbung zeigte Neuronenatrophie, verstärkte Zellfärbung, undeutliche Kern-Zytoplasma-Grenzen, Mikroglia-Proliferation, erhöhte Zelldichte und erweiterte Mikrogefäße mit Hämorrhagie. Im Vergleich zur Modellgruppe zeigte die Elektroakupunkturgruppe eine verringerte Gangbewertung (P<0.01), einen erhöhten mechanischen Rückzugschwellenwert und eine verlängerte Latenzzeit der thermischen Rückzugsreaktion (P<0.01); verminderte Piezo1-mRNA-Expression, Immunfluoreszenzintensitäten von Piezo1 und CaM, relative Expressionslevel von CaM, nNOS, sGC, PKG1 sowie cGMP- und NO-Gehalte (P<0.01); HE-Färbung zeigte vereinzelte schrumpfende Neuronen, weniger erweiterte Mikrogefäße und reduzierte Mikroglia-Proliferation im Vergleich zur Modellgruppe. Im Vergleich zur Elektroakupunkturgruppe zeigte die Elektroakupunktur+Yoda1-Gruppe eine verkürzte Latenz der thermischen Rückzugsreaktion (P<0.01); erhöhte Piezo1-mRNA-Level, Immunfluoreszenzintensitäten von Piezo1 und CaM, relative Expressionslevel von CaM, nNOS, sGC, PKG1 sowie erhöhte cGMP- und NO-Gehalte (P<0.05, P<0.01); HE-Färbung zeigte schrumpfende Neuronen, eine erhöhte Anzahl an Mikrogliazellen und teilweise erweiterte Mikrogefäße mit Hämorrhagie. Schlussfolgerung: Elektroakupunktur kann Schmerzen bei CSR-Ratten wirksam lindern, vermutlich durch Hemmung der Aktivierung des Piezo1-Proteins im Rückenmark und Hemmung des NO/cGMP/PKG-Signalwegs, wodurch eine analgetische Wirkung erzielt wird.

关键词

zervikale Radikulopathie; Elektroakupunktur; Analgesie; Piezo1-Protein

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