Untersuchung des Mechanismus, wie Elektroakupunktur Schmerzen bei Ratten mit zervikaler Radikulopathie durch Regulierung des Piezo1-Proteins im NO/cGMP/PKG-Signalweg verbessert

Huang Wenjing ,  

Su Shengyong ,  

Wang Tian ,  

Su Hong ,  

Huang Xinyu ,  

Li Xin ,  

Zheng Guangmei ,  

Yin Lili ,  

Xu Zhiyi ,  

Huang Ying ,  

Wei Gangliang ,  

Li Xiaoming ,  

摘要

Ziel der Studie war es, die regulatorische Wirkung der Elektroakupunktur auf das Piezo1-Protein bei Ratten mit zervikaler Radikulopathie (CSR) und deren Einfluss auf den Signalweg Stickstoffmonoxid (NO)/zyklisches Guanosinmonophosphat (cGMP)/Proteinkinase G (PKG) zu untersuchen sowie den schmerzlindernden Mechanismus der Elektroakupunktur bei CSR zu erforschen. Methoden: Männliche SD-Ratten wurden zufällig in vier Gruppen eingeteilt: Scheingruppe, Modellgruppe, Elektroakupunkturgruppe und Elektroakupunktur + Yoda1-Gruppe, jeweils 10 Tiere pro Gruppe. In den Modell-, Elektroakupunktur- und Elektroakupunktur + Yoda1-Gruppen wurden CSR-Modelle durch Einführen eines Fadens in den Wirbelkanal hergestellt. Die Elektroakupunkturgruppe erhielt eine beidseitige Behandlung an den Punkten "Hegu" und "Taichong" mittels Elektroakupunktur für 20 Minuten pro Sitzung, einmal täglich für 7 Tage hintereinander; die Elektroakupunktur + Yoda1-Gruppe erhielt vor der Elektroakupunktur eine intraperitoneale Injektion des Piezo1-Agonisten Yoda1 (1,5 mg/kg). Vor und nach der Intervention wurden bei den Ratten Gangbewertung, mechanischer Rückziehschwelle und Latenzzeit der thermischen Rückzugsreaktion gemessen; HE-Färbung beobachtete pathologische Veränderungen im Rückenmarkgewebe; qPCR bestimmte die Genexpressionsniveaus von Piezo1 im Rückenmark; doppelte immunfluoreszierende Färbung detektierte Piezo1 und Calmodulin (CaM) im Rückenmarkgewebe; Western Blot analysierte die Proteinexpression von CaM, neuronaler Stickstoffmonoxid-Synthase (nNOS), löslicher Guanylatcyclase (sGC) und PKG1; ELISA bestimmte den cGMP-Gehalt; NO-Gehalt wurde mittels Nitrit-Farbentwicklungsverfahren gemessen. Ergebnisse: Im Vergleich zur Scheingruppe war der Gangbewertungs-Score in der Modellgruppe vor der Intervention erhöht (P<0,01), die mechanische Rückziehschwelle reduziert und die Latenzzeit der thermischen Rückzugsreaktion verkürzt (P<0,01); Piezo1-mRNA-Expression, immunfluoreszierende Intensität und Korrelation von Piezo1 und CaM, relative Proteinexpression von CaM, nNOS, sGC, PKG1 sowie cGMP- und NO-Gehalte waren in der Modellgruppe signifikant erhöht (P<0,01); HE-Färbung zeigte bei der Modellgruppe neuronale Schrumpfung, verstärkte Zellfärbung, unscharfe Grenzen zwischen Zellkern und Zytoplasma, Gliazellproliferation, erhöhte Zelldichte, Erweiterung und Blutungen der Mikrogefäße. Im Vergleich zur Modellgruppe zeigte die Elektroakupunkturgruppe eine Reduktion des Gangbewertungsscores (P<0,01), eine Erhöhung der mechanischen Rückziehschwelle und Verlängerung der Latenzzeit (P<0,01); die Expression von Piezo1-mRNA, immunfluoreszierende Intensität und Korrelation von Piezo1 und CaM, Proteinexpression von CaM, nNOS, sGC, PKG1 sowie cGMP- und NO-Gehalte waren reduziert (P<0,01); HE-Färbung zeigte einzelne geschrumpfte Neuronen und geringere Mikrogefäßerweiterung sowie Gliazellproliferation im Vergleich zur Modellgruppe. Im Vergleich zur Elektroakupunkturgruppe war die thermische Rückzugslatenz in der Elektroakupunktur + Yoda1-Gruppe verkürzt (P<0,01); Expression von Piezo1-mRNA, immunfluoreszierende Intensität und Korrelation von Piezo1 und CaM, Proteinexpression von CaM, nNOS, sGC, PKG1 sowie cGMP- und NO-Gehalte waren erhöht (P<0,05, P<0,01); HE-Färbung zeigte neuronale Schrumpfung, Vermehrung von Gliazellen und teilweise Erweiterung der Mikrogefäße mit Blutungen. Fazit: Elektroakupunktur kann Schmerzen bei CSR-Ratten effektiv lindern, möglicherweise durch Hemmung der Aktivierung von Piezo1-Protein im Rückenmark und Hemmung des NO/cGMP/PKG-Signalwegs, wodurch eine schmerzlindernde Wirkung erzielt wird.

关键词

zervikale Radikulopathie; Elektroakupunktur; Schmerzlinderung; Piezo1-Protein

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