Mechanismus der Wirkung der Akupunktur an den Punkten 'Houxi' und 'Huantiao' auf die Regulation des PI3K/AKT/mTOR-Signalwegs und die Autophagie von Nukleuszellen im Modell der lumbalen Bandscheibendegeneration bei Ratten

HU Zhi-xiang ,  

WU Han ,  

LÜ Heng ,  

ZHANG Hao ,  

ZHAI Chun-tao ,  

LI Sheng-yun ,  

WANG Zheng-hao ,  

LÜ Yu-e ,  

摘要

Ziel war es, die Wirkung der Akupunktur an den Punkten 'Houxi' und 'Huantiao' auf den Phosphatidylinositol-3-Kinase (PI3K)/Proteinkinase B (AKT)/mechanistischen Zielprotein des Rapamycins (mTOR)-Signalweg und die Autophagie von Nukleuszellen in einem Modell der lumbalen Bandscheibendegeneration (IDD) bei Ratten zu beobachten und seinen potenziellen Mechanismus zur Verzögerung der IDD zu untersuchen. Methoden: Es wurden 36 SD-Ratten ausgewählt und zufällig in eine Scheinoperationsgruppe, eine Modellgruppe und eine Punktakupunkturgruppe mit jeweils 12 Ratten aufgeteilt. Bei der Modell- und Punktakupunkturgruppe wurde das IDD-Modell mit einer Faserring-Punktion erstellt. Nach erfolgreicher Modellierung erhielten die Ratten der Punktakupunkturgruppe eine Akupunkturbehandlung an den Punkten 'Houxi' und 'Huantiao' für jeweils 20 Minuten, einmal täglich für 14 Tage. Die Schwelle des mechanischen Zehenrückzugsreflexes der rechten Pfote wurde vor, nach der Modellierung sowie an den Tagen 7 und 14 nach der Intervention mittels Von-Frey-Fasern gemessen; zugleich wurde die Latenzzeit des Zehenrückzugsreflexes auf Hitzereiz überprüft; die morphologischen Merkmale des Bandscheibengewebes wurden mittels HE-Färbung untersucht; die Gehalte an Aggrecan, Typ-II-Kollagen, Transkriptionsfaktor SOX9, Matrix-Metalloproteinasen MMP3 und MMP13 im Nucleus pulposus wurden mittels ELISA bestimmt; die mRNA-Expression von SOX9 und MMP13 mittels Echtzeit-quantitativer PCR ermittelt; die positive Expression von LC3 mittels Immunfluoreszenzfärbung nachgewiesen; und die Expression der PI3K/AKT/mTOR-Signalweg-Proteine sowie LC3-II, Beclin1 und p62 mittels Western blot analysiert. Ergebnisse: Im Vergleich zur Scheinoperationsgruppe zeigten die Modellgruppe an den Tagen 7 und 14 eine erniedrigte mechanische Rückzugsreflexschwelle und verkürzte Latenzzeit auf Hitzereiz (P0.001), verminderte Gehalte an Aggrecan, Kollagen II, SOX9 und SOX9-mRNA-Expression (P0.001, P0.01), erhöhte Gehalte von MMP3, MMP13 und MMP13-mRNA-Expression, positive LC3-Expression sowie höhere Beclin1- und LC3-II-Proteinspiegel (P0.001), sowie erniedrigte phosphorylierte (p) Verhältnisse von PI3K/PI3K, AKT/AKT, mTOR/mTOR und Protein-p62-Expression (P0.001). Im Vergleich zur Modellgruppe zeigten Ratten der Punktakupunkturgruppe erhöhte mechanische Rückzugsreflexschwellen und verlängerte Hitzereiz-Latenzzeiten (P0.001), erhöhte Gehalte an Aggrecan, Kollagen II, SOX9 und SOX9-mRNA-Expression (P0.001), verminderte Gehalte an MMP3, MMP13, MMP13-mRNA-Expression, positive LC3-Expression sowie verringerte Beclin1- und LC3-II-Proteinspiegel (P0.001, P0.01, P0.05); erhöhte p-PI3K/PI3K-, p-AKT/AKT-, p-mTOR/mTOR-Verhältnisse und p62-Proteinexpression (P0.01, P0.05, P0.001). HE-Färbung zeigte, dass die Modellgruppe weniger Nukleuszellen mit unregelmäßiger Morphologie und zahlreichen Vakuolen aufwies; im Gegensatz dazu waren die Nukleuszellen in der Punktakupunkturgruppe regelmäßiger angeordnet, hatten normale Morphologie und weniger Vakuolen. Schlussfolgerung: Die Akupunktur an den Punkten 'Houxi' und 'Huantiao' kann durch Regulierung der Autophagie von Nukleuszellen des lumbalen Bandscheibenkerns die Progression der IDD verzögern, indem sie den Abbau der extrazellulären Matrix reduziert. Der potenzielle Mechanismus steht wahrscheinlich in engem Zusammenhang mit der Aktivierung des PI3K/Akt/mTOR-Signalwegs durch die Akupunktur an diesen Punkten.

关键词

Akupunktur;Houxi;Huantiao;lumbale Bandscheibendegeneration;PI3K/Akt/mTOR-Signalweg;Autophagie

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