Ziel der Studie ist es, auf der Grundlage der Klärung der Sicherheit der Thrombolyse außerhalb des Zeitfensters bei einem Modell des ischämischen Schlaganfalls bei Ratten zu untersuchen, wie Akupunktur die Sicherheit der Thrombolyse durch Hemmung des signalgebenden Weges der Rezeptor-Interaktions-Kinase 1 (RIPK1)/Rezeptor-Interaktions-Kinase 3 (RIPK3)/Substrat-Mischkinase-ähnlichen Proteins (MLKL) vermittelt durch programmierte Nekrose verbessert. Methoden: Es wurden zufällig 33 SD-Ratten als Scheinoperierte Gruppe ausgewählt, und 99 erfolgreich modellierte SD-Ratten wurden gemäß einer Zufallszahlentabelle in die Modellgruppe, die 6-Stunden-Thrombolysegruppe sowie die Akupunktur + 6-Stunden-Thrombolysegruppe mit jeweils 33 Tieren eingeteilt. Ausgenommen der Scheinoperierten Gruppe wurden bei den anderen Gruppen ischämische Schlaganfallmodelle mittels autologer Thromboembolismus-Methode erstellt. Die 6-Stunden-Thrombolysegruppe erhielt 6 Stunden nach der Modellerstellung eine intravenöse Thrombolyse mit rekombinantem Gewebeplasminogenaktivator; die Akupunktur + 6-Stunden-Thrombolysegruppe erhielt gleichzeitig mit der Thrombolyse Akupunktur an den beidseitigen Punkten "Neiguan" und "Shuigou" mit einer Nadellagerung von 20 Minuten. Die neurologische Funktion der Ratten wurde mittels Bederson-Score bewertet, das Hirninfarktvolumen durch 2,3,5-Triphenyltetrazoliumchlorid-Färbung beurteilt, die Blut-Hirn-Schrankenpermeabilität (BBB) mit Evans-Blau-Methode detektiert, der Wassergehalt des Gehirns mittels Volumen-Dichte-Methode gemessen, die Hämoglobinkonzentration im ischämischen Hirngewebe spektrophotometrisch bestimmt, die Expression von RIPK1, RIPK3 und phosphoryliertem (p)-MLKL Protein im ischämischen Penumbra-Bereich durch Western Blot analysiert, die mRNA-Expression von RIPK1, RIPK3 und MLKL mittels Echtzeit-Fluoreszenzquantitativer PCR bestimmt sowie die Ko-Lokalisierung von p-MLKL mit Endothelzellen durch Doppel-Immunfluoreszenzfärbung untersucht. Ergebnisse: Nach Modellierung sank der Blutfluss bei den Ratten signifikant, und nach 2 Stunden stiegen die neurologischen Scores an (P<0.01). Nach 24 Stunden zeigten die Modellgruppe im Vergleich zur Scheinoperierten Gruppe erhöhte neurologische Scores, prozentualen Hirninfarktvolumen und BBB-Permeabilität (P<0.01); erhöhte Expression von RIPK1 Protein (P<0.05), sowie mRNA von RIPK1, RIPK3, MLKL (P<0.01, P<0.05) im Penumbra-Bereich; und einen erhöhten Prozentsatz p-MLKL und Endothelzell-Ko-Lokalisierung positiver Zellen (P<0.01). Im Vergleich zur Modellgruppe zeigte die 6-Stunden-Thrombolysegruppe eine weitere Erhöhung der BBB-Permeabilität, des Wassergehalts im Gehirn und der Hämoglobinkonzentration (P<0.01, P<0.05); gesteigerte Expression von RIPK3 und p-MLKL Proteinen (P<0.05), mRNA von RIPK3, MLKL (P<0.05) sowie einen erhöhten Anteil p-MLKL positiver Endothelzellen (P<0.01) im ischämischen Penumbra-Bereich. Im Vergleich zur Modellgruppe zeigten Akupunktur + 6-Stunden-Thrombolyse reduzierte neurologische Scores, prozentuales Hirninfarktvolumen, BBB-Permeabilität und Wassergehalt des Gehirns (P<0.01, P<0.05); verringerte Expression von RIPK1 Protein und mRNA (P<0.05); und einen reduzierten Anteil p-MLKL / Endothelzell-Ko-Lokalisierung positiver Zellen (P<0.05). Im Vergleich zur 6-Stunden-Thrombolysegruppe zeigten die Akupunktur + 6-Stunden-Thrombolysegruppe verringerte neurologische Scores, Infarktvolumen, BBB-Permeabilität, Wassergehalt und Hämoglobinkonzentration (P<0.01); eine reduzierte Expression von RIPK1, RIPK3 und p-MLKL Proteinen (P<0.05, P<0.01), sowie mRNA von RIPK1, RIPK3 und MLKL (P<0.01, P<0.05); und einen verringerten Anteil p-MLKL / Endothelzell-Ko-Lokalisierung positiver Zellen (P<0.01). Fazit: Eine rechtzeitige Akupunkturintervention kann die neurologische Funktion nach der Thrombolyse bei ischämischem Schlaganfall bei Ratten verbessern, das Hirninfarktvolumen verringern, die BBB-Permeabilität reduzieren, thrombolytische Komplikationen vermindern und somit die Sicherheit der Thrombolyse erhöhen; der Mechanismus könnte mit der Hemmung des RIPK1/RIPK3/MLKL Signalwegs der programmierten Nekrose von Endothelzellen durch Akupunktur zusammenhängen.

Akupunktur; ischämischer Schlaganfall; programmierte Nekrose; Sicherheit der Thrombolyse