Untersuchung der Mechanismen der Akupunktur am Punkt „Neiguan“ zur Verbesserung von Verhaltensdefiziten und neuroinflammatorischen Reaktionen bei autistischen Ratten

Dang Weili ,  

Liang Lüyuan ,  

Li Yuxin ,  

Tan Xianghan ,  

Cao Jialei ,  

Li Zhiyao ,  

Liu Saidan ,  

Ma Bingxiang ,  

摘要

Ziel der Studie war es, die Wirkung der Akupunktur am Punkt „Neiguan“ auf die Verbesserung von Verhaltensstörungen, neuronalen Schäden und neuroinflammatorischen Reaktionen bei VPA-induzierten autistischen (ASD) Jungtieren zu untersuchen. Methode: Schwangere SD-Ratten wurden zufällig in Kontroll- und Modellgruppen aufgeteilt; die Modellgruppe erhielt am 12,5. Trächtigkeitstag eine intraperitoneale Injektion von VPA (600 mg/kg), um ein ASD-Modell bei der Nachkommenschaft zu erzeugen. Die Nachkommen wurden zufällig in Normal-, Modell-, Scheinakupunktur-, Akupunktur-, Lösungsmittel- und Positivkontrollgruppen mit je 9 Tieren unterteilt. Die Akupunkturgruppe erhielt ab dem 7. Lebenstag tägliche beidseitige Akupunktur am Punkt „Neiguan“, 6 Tage pro Woche über 15 Tage. Nach der Intervention wurden Wasserlabyrinth-Tests, Drei-Kammer-Sozialtest und Selbstpflegeverhalten durchgeführt; H&E- und Golgi-Färbungen wurden zur Beurteilung der Hippocampus-Neuronenmorphologie und Dendritenstacheln-Dichte verwendet; Western-Blot-Analyse detektierte synaptische Proteine PSD95, GAD67, VGAT sowie pyroptose-bezogene Proteine NLRP3, GSDMD-NT, cleaved Caspase-1; ELISA bestimmte Hippocampus-IL-1β, IL-18 und LDH-Aktivität; ROS-Level wurden mittels Fluoreszenzsonde ermittelt; Immunfluoreszenzfärbung identifizierte aktivierte Mikrogliazellen durch Iba1; TUNEL-Färbung stellte Apoptose fest. Ergebnisse: Im Vergleich zur Normalgruppe zeigten Modelltiere verringertes Körpergewicht (P<0,01, P<0,05), verlängerte Fluchtlatenz (P<0,01, P<0,001), weniger Überquerungen der ursprünglichen Plattform und geringere Verweildauer im Zielquadranten (P<0,01, P<0,001), niedrigeren Sozialindex und soziale Präferenz (P<0,05, P<0,001), erhöhte Selbstpflege (P<0,001); gestörte hippocampale Neuronenanordnung und verminderte Dendritenstacheln-Dichte (P<0,001); erhöhte ROS-Level, LDH-Aktivität und IL-1β, IL-18 (P<0,001); erhöhte Expression von PSD95, NLRP3 und Verhältnissen von GSDMD-NT/GSDMD, cleaved Caspase-1/pro-Caspase-1 (P<0,001), verminderte GAD67, VGAT (P<0,001); erhöhte Iba1-positive Zellen und Apoptoserate (P<0,001). Im Vergleich zur Modellgruppe zeigten Akupunktur- und Positivkontrollgruppen erhöhtes Körpergewicht (P<0,05), verkürzte Fluchtlatenz (P<0,01, P<0,001, P<0,05), längere Verweildauer im Zielquadranten (P<0,05), höhere Sozialindizes und Präferenzen (P<0,05, P<0,01), reduzierte Selbstpflege (P<0,05, P<0,01); erhöhte Dendritenstacheln-Dichte (P<0,05, P<0,001); verringerte ROS-Level, LDH-Aktivität sowie IL-1β, IL-18 (P<0,001, P<0,01); verringerte Expression von PSD95, NLRP3 und Verhältnissen von GSDMD-NT/GSDMD, cleaved Caspase-1/pro-Caspase-1 (P<0,05, P<0,001, P<0,01), erhöhte GAD67 und VGAT (P<0,001, P<0,05); verminderte Iba1-positive Zellen und Apoptoseraten (P<0,05, P<0,01, P<0,001). Die Positivkontrollgruppe wies eine kürzere Fluchtlatenz als die Akupunkturgruppe auf (P<0,05); niedrigere ROS-Level, PSD95, NLRP3, GAD67, VGAT und cleaved Caspase-1/pro-Caspase-1-Verhältnisse (P<0,01, P<0,05); verringerte Apoptoserate (P<0,05). Akupunktur hatte im Vergleich zur Scheinakupunktur und Positivkontrolle zu Lösungsmittel erhöhtes Körpergewicht (P<0,05), verkürzte Fluchtlatenz (P<0,05, P<0,01, P<0,001), mehr Überquerungen der ursprünglichen Plattform und längere Zielquadranten-Verweildauer (P<0,05, P<0,01), höhere Sozialindizes und Präferenzen (P<0,05), verringerte Selbstpflege (P<0,05, P<0,01); erhöhte Dendritenstacheln-Dichte (P<0,05, P<0,001); verminderte ROS-Level, LDH-Aktivität sowie IL-1β, IL-18 (P<0,01, P<0,001); geringere Expression von PSD95, NLRP3 und Verhältnissen von GSDMD-NT/GSDMD, cleaved Caspase-1/pro-Caspase-1 (P<0,05, P<0,001, P<0,01), erhöhte Expression von GAD67 und VGAT (P<0,001, P<0,01, P<0,05); verminderte Iba1-positive Zellen und Apoptoseraten (P<0,01, P<0,001). Schlussfolgerung: Akupunktur am Punkt „Neiguan“ kann soziale Defizite, wiederkehrende stereotype Verhaltensweisen und kognitive Beeinträchtigungen bei VPA-induzierten ASD-Mäusen verbessern, was wahrscheinlich mit der Minderung von neuronalen Schäden im Hippocampus, der Regulation des Gleichgewichts der synaptischen Proteinexpression, der Hemmung von oxidativem Stress und neuroinflammatorischen Reaktionen vermittelt durch den NLRP3-Inflammasom zusammenhängt.

关键词

Akupunktur;Autismus;soziale Defizite;wiederkehrendes stereotypisches Verhalten;kognitive Beeinträchtigung;Hippocampus;neuroinflammatorische Reaktion;oxidativer Stress;synaptische Plastizität

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