Akupunktur verbessert die Ovarfunktion bei vorzeitigem Ovarialversagen durch Regulation der Entzündungsreaktion und Apoptose über den MEK/ERK-Weg

Guo Lihong ,  

Wu Xiaohong ,  

Hao Jianheng ,  

Chang Boya ,  

Liu Liying ,  

摘要

Ziel der Studie war es, den möglichen Mechanismus zu untersuchen, wie Akupunktur die Ovarfunktion bei Ratten mit vorzeitigem Ovarialversagen (POI) durch die Regulation der Entzündungsreaktion und des programmierten Zelltods über den Mitogen-aktivierten Proteinkinase-Kinase (MEK)/extrazellulär-signal-regulierte Kinase (ERK)-Signalweg verbessert. Methoden: Männliche SD-Ratten wurden nach dem Zufallsprinzip in drei Gruppen eingeteilt: Kontrollgruppe, POI-Gruppe und Akupunkturgruppe mit jeweils 15 Tieren. Die POI- und Akupunkturgruppen erhielten 15 Tage lang intraperitoneale Injektionen mit Cyclophosphamid zur Nachbildung des POI-Modells. Die Akupunkturgruppe erhielt Nadelstiche an den Punkten "Guanyuan" und beidseitig "Sanyinjiao" jeweils 30 Minuten täglich für 3 Wochen. Der Östruszyklus der Tiere wurde beobachtet; Körpermasse, nasses Ovargewicht und Ovarialindex wurden gemessen; histologische Beobachtungen der Ovarstruktur wurden mittels HE-Färbung durchgeführt und die Anzahl der Follikel in verschiedenen Stadien gezählt; Serumspiegel von Anti-Müller-Hormon (AMH), Estradiol (E2), Follikelstimulierendem Hormon (FSH), Interleukin (IL)-1β, IL-10, Tumornekrosefaktor α (TNF-α) sowie die Gehalte von IL-1β, IL-10, TNF-α im Ovar wurden mittels ELISA bestimmt; Apoptoserate der Granulosazellen wurde durch Durchflusszytometrie ermittelt; mRNA-Expression von MEK1/2, ERK1/2, Bax, Bcl-2, NF-κB p65 und COX-2 wurde mittels Echtzeit-PCR analysiert; Proteinexpression von p-MEK1/2, MEK1/2, p-ERK1/2, ERK1/2, Bax, Bcl-2, NF-κB p65 und COX-2 wurde mittels Western Blot bestimmt; Immunfluoreszenz wurde zur Detektion von p-ERK1/2 Proteinexpression im Ovar verwendet. Ergebnisse: Im Vergleich zur Kontrollgruppe zeigte die POI-Gruppe eine erhöhte Rate an Östruszyklusstörungen (P<0,01), eine verminderte Körpermasse, nasses Ovargewicht und Ovarialindex (P<0,01); eine gestörte ovarielle Struktur mit verminderter Anzahl an primordialen, primären, sekundären und reifen Follikeln (P<0,01), erhöhte Anzahl an atretischen Follikeln (P<0,01); erhöhte Serumwerte von FSH, IL-1β, TNF-α sowie erhöhte IL-1β und TNF-α Gehalte im Ovar (P<0,01), verringerte Werte von AMH, E2, IL-10 im Serum und erhöhtem IL-10 im Ovar (P<0,01); erhöhte Apoptoserate der Granulosazellen (P<0,01); erhöhtes mRNA-Expressionsniveau von MEK1/2, ERK1/2, Bax, NF-κB p65, COX-2 und reduziertes Bcl-2 (P<0,01); erhöhte Proteinexpressionsverhältnisse von p-MEK1/2 zu MEK1/2 sowie p-ERK1/2 zu ERK1/2 und erhöhte Proteinexpressionen von Bax, NF-κB p65, COX-2, vermindertes Bcl-2 (P<0,01); verstärkte fluoreszente Expression von p-ERK1/2 (P<0,01). Im Vergleich zur POI-Gruppe zeigten die genannten Parameter in der Akupunkturgruppe eine Umkehr (P<0,01, P<0,05). Fazit: Akupunktur kann die Ovarfunktion bei POI-Ratten verbessern, wahrscheinlich durch die Regulation des MEK/ERK-Signalwegs, was zur Verringerung der Entzündungsreaktion und Hemmung der Apoptose der Granulosazellen beiträgt.

关键词

Vorzeitiges Ovarialversagen;Akupunktur;MEK/ERK-Signalweg;Entzündungsreaktion;Apoptose

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