Untersuchung des Mechanismus, wie Elektroakupunktur die zentrale Sensibilisierung bei Ratten mit nicht-erosiver gastroösophagealer Refluxkrankheit vom Typ Leber-Magen-Dysfunktion basierend auf dem NGF/TrkA-Signalweg verbessert

TANG Ming-jie ,  

LI Ying-hong ,  

ZHU Tian-yi ,  

XIE Zhong-qi ,  

ZHENG Shi-yi ,  

XU hang ,  

XU Lin-ling ,  

XU Ping-ping ,  

ZHANG Cai-rong ,  

CHEN Chao-ming ,  

摘要

Ziel ist es, die Wirkung der Elektroakupunktur auf die zentrale Sensibilisierung bei Ratten mit nicht-erosiver gastroösophagealer Refluxkrankheit (NERD) vom Typ Leber-Magen-Dysfunktion zu beobachten und deren Wirkmechanismus zu untersuchen. Methoden: Männliche SD-Ratten wurden zufällig in eine Kontrollgruppe, eine Modellgruppe, eine Elektroakupunkturgruppe und eine westliche Medikamentengruppe mit je 10 Tieren eingeteilt. Außer der Kontrollgruppe erhielten die anderen drei Gruppen eine Basissensibilisierung (intraperitoneale Injektion von Ovalbumin plus Aluminiumhydroxid als Adjuvans) kombiniert mit Schwanzklemmenstimulation zur Herstellung eines NERD-Modells vom Typ Leber-Magen-Dysfunktion. Die Elektroakupunkturgruppe erhielt Elektroakupunktur an den Punkten „Zhiyang“, „Shendao“, „Dazhui“ und „Baihui“ jeweils 30 Minuten pro Sitzung, einmal täglich, 2 Wochen lang. Die westliche Medikamentengruppe erhielt Omeprazol (1,8 mg·kg-1) oral, einmal täglich, 2 Wochen lang. Nach der Basissensibilisierung und am Ende der Intervention wurden Tests zur Präferenz für Zuckerwasser durchgeführt, und die Schwelle des mechanischen Fußrückzugsreflexes (MWT) wurde mit dem von-Frey-Testgerät gemessen. Nach der Intervention wurde der abdominale Rückzugsreflex (AWR) getestet, anschließend der Ösophagus-Säure-Perfusionstest durchgeführt, danach wurden die Ratten euthanasiert und Proben entnommen. Die Transmissionselektronenmikroskopie wurde verwendet, um die Anzahl der synaptischen Vesikel im Rückenmark und die Interzellräume der epithelialen Zellen des Ösophagus-Mukosa zu beobachten; die ELISA-Methode zur Bestimmung der Serumspiegel von Gastrin (GAS) und Motilin (MTL); Western Blot zur Bestimmung der Proteinexpression von NGF, TrkA, GluA1 und PSD95 im Rückenmark; Echtzeit-PCR zur Bestimmung der mRNA-Expression von NGF und TrkA im Rückenmark; Immunfluoreszenz zur Bestimmung der positiven Expression von GluA1 und PSD95 im Rückenmark. Im Vergleich zur Kontrollgruppe zeigte die Modellgruppe eine verringerte Präferenz für Zuckerwasser (P<0,01), eine verminderte MWT (P<0,01), erhöhte AWR-Werte bei Drücken von 40, 60 und 80 mmHg (P<0,01), eine verringerte viszerale Schmerzschwelle (P<0,01), eine signifikante Zunahme der Anzahl synaptischer Vesikel, eine deutliche Erweiterung der Interzellularräume der epithelialen Ösophagus-Zellen, verringerte Serumspiegel von GAS und MTL (P<0,01), erhöhte Proteinexpression von NGF, TrkA, GluA1 und PSD95 im Rückenmark (P<0,01), erhöhte mRNA-Expression von NGF und TrkA (P<0,01) und eine erhöhte mittlere Fluoreszenzintensität von GluA1 und PSD95 (P<0,01). Im Vergleich zur Modellgruppe waren in den Elektroakupunktur- und westlichen Medikamentengruppen die Zuckerwasserpräferenz, MWT, viszerale Schmerzschwelle und MTL-Spiegel im Serum erhöht (P<0,01, P<0,05), die AWR-Werte bei 40 mmHg verringert (P<0,01, P<0,05), die Proteinexpression von NGF, PSD95 und TrkA im Rückenmark reduziert (P<0,01, P<0,05) und die mRNA-Expression von TrkA reduziert (P<0,01, P<0,05). In der Elektroakupunkturgruppe waren die AWR-Werte bei 60 und 80 mmHg verringert (P<0,01), die Serum-GAS-Spiegel erhöht (P<0,01), die mRNA-Expression von NGF im Rückenmark verringert (P<0,01) und die mittlere Fluoreszenzintensität von GluA1 und PSD95 verringert (P<0,01). In den Elektroakupunktur- und westlichen Medikamentengruppen verringerte sich die Anzahl der synaptischen Vesikel deutlich, und die Interzellularräume der epithelialen Zellen des Ösophagus zeigten eine Tendenz zur Wiederherstellung. Im Vergleich zur Elektroakupunkturgruppe waren die viszerale Schmerzschwelle und MWT in der westlichen Medikamentengruppe verringert (P<0,01). Fazit: Elektroakupunktur kann die viszerale Hypersensitivität bei Ratten mit NERD vom Typ Leber-Magen-Dysfunktion lindern und die zentrale Sensibilisierung reduzieren, was möglicherweise mit der Hemmung des NGF/TrkA-Signalwegs zusammenhängt.

关键词

nicht-erosive gastroösophageale Refluxkrankheit; Elektroakupunktur; viszerale Hypersensitivität; zentrale Sensibilisierung; Rückenmark; NGF/TrkA-Signalweg

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