Auswirkungen der Elektroakupunktur zu verschiedenen Zeitpunkten auf kupferbedingte Todesproteine und Kupferhomöostase bei Ratten mit zerebraler ischämischer Reperfusionsverletzung

Wang Yufei ,  

Meng Jia ,  

Huang Liujiao ,  

摘要

Ziel ist es, die Auswirkungen einer Elektroakupunktur-Intervention zu verschiedenen Zeitpunkten auf kupferbedingte Todesproteine und den Cu2+-Gehalt in der ischämischen Halbschattenregion bei Ratten mit akutem ischämischem Schlaganfall (IS) nach zerebraler ischämischer Reperfusionsverletzung (CIRI) zu beobachten und den Wirkmechanismus der Akupunktur zu untersuchen, die Kupfertod hemmt und die neurologische Funktion bei CIRI-Ratten verbessert sowie die Wirkung unterschiedlicher Behandlungszeitpunkte auf die Verbesserung neurologischer Funktionsstörungen zu bewerten. SD-Ratten wurden zufällig in Scheinoperations-, Modell-, 0 h-Elektroakupunktur-, 24 h-Elektroakupunktur- und 48 h-Elektroakupunkturgruppen mit jeweils 12 Tieren eingeteilt. Das Modell der mittleren zerebralen Arterienverschluss-/Reperfusionsverletzung (MCAO/R) wurde mittels der Longa-Fadenmethode erstellt. Die jeweiligen Elektroakupunkturgruppen erhielten nach der Modellbildung und 24 Stunden Reperfusion jeweils 0, 24 bzw. 48 Stunden lang eine 30-minütige Elektroakupunktur an den Punkten „Baihui“ und „Fengfu“. Die Erholung der neurologischen Defizite wurde mittels modifizierter neurologischer Selbsteinschätzungs-Skala (mNSS) bewertet, das Schlaganfallvolumen durch TTC-Färbung bestimmt, der Cu2+-Gehalt im ischämischen Halbschattengewebe kolorimetrisch gemessen und die mRNA- und Proteinexpression von Eisen-Schwefel-Protein 1 (FDX1), Dihydrolipoylacetyltransferase (DLAT), Lipoatsynthase (LIAS) und Soluttransporterfamilienmitglied 31 (SLC31A1) mittels Echtzeit-Fluoreszenz-PCR und Western Blot nachgewiesen. Im Vergleich zur Scheinoperationsgruppe zeigten die Modellgruppe signifikant erhöhte mNSS-Werte, Schlaganfallvolumen, Cu2+-Gehalt im ischämischen Halbschatten, sowie mRNA- und Proteinexpression von DLAT und SLC31A1 (P<0,01), während die mRNA- und Proteinexpression von FDX1 und LIAS signifikant erniedrigt war (P<0,01). Im Vergleich zur Modellgruppe zeigten alle Elektroakupunkturgruppen verringerte mNSS-Werte, Schlaganfallvolumen, Cu2+-Gehalt, mRNA- und Proteinexpression von DLAT und SLC31A1 (P<0,01, P<0,05) und erhöhte mRNA- und Proteinexpression von FDX1 und LIAS (P<0,01, P<0,05). Im Vergleich zur 24 h- und 48 h-Elektroakupunkturgruppe zeigte die 0 h-Elektroakupunkturgruppe niedrigere mNSS-Werte, Schlaganfallvolumen, Cu2+-Gehalt und mRNA- und Proteinexpression von DLAT und SLC31A1 (P<0,05, P<0,01) sowie höhere mRNA- und Proteinexpression von FDX1 und LIAS (P<0,01, P<0,05). Das Schlaganfallvolumen, Cu2+-Gehalt und die mRNA-Expression von DLAT, SLC31A1, FDX1 und LIAS in der 24 h-Elektroakupunkturgruppe waren besser als in der 48 h-Elektroakupunkturgruppe (P<0,01, P<0,05). Fazit: Die Elektroakupunktur-Intervention bei CIRI kann Kupfertod effektiv hemmen und Hirnschäden verringern, wobei eine frühzeitige Elektroakupunktur-Intervention einen besseren Effekt auf die Verbesserung neurologischer Funktionsstörungen hat. Der Mechanismus hängt wahrscheinlich mit der Regulation der Expression von FDX1, DLAT, LIAS und SLC31A1 und der Verminderung des Cu2+-Gehalts im Hirngewebe zusammen, wodurch der kupferbedingte Neuronentod gehemmt wird.

关键词

Elektroakupunktur; ischämische Reperfusionsverletzung des Gehirns; Eisen-Schwefel-Protein 1; Kupfertod; frühe Intervention

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