TH-positive Neuronen im ventrolateralen Bereich der oberen Medulla oblongata vermitteln die Verbesserung der Darmmotilitätsstörung durch Elektroakupunktur bei Mäusen mit funktioneller Verstopfung

Wang Dan ,  

He Zhaoxuan ,  

Yu Mingkai ,  

Wu Ruohan ,  

Deng Xiao ,  

Luo Yucai ,  

Li Yifan ,  

Lai Peng ,  

Yao Xiaoheng ,  

Yin Tao ,  

Zeng Fang ,  

摘要

Ziel der Studie war es, die Rolle von Tyrosinhydroxylase (TH)-positiven Neuronen im ventrolateralen Bereich des oberen Medulla oblongata (RVLM) bei der Verbesserung der Darmmotilitätsstörung durch Elektroakupunktur bei Mäusen mit funktioneller Verstopfung (FC) zu untersuchen. Methoden: Zunächst wurde ein transsynaptisches Tracing-Virus verwendet, um die Hirnareale zu identifizieren, die den proximalen Dickdarm innervieren. Anschließend wurden 18 C57BL/6J-Mäuse zufällig in drei Gruppen aufgeteilt: Normalgruppe, Modellgruppe und Elektroakupunkturgruppe, jeweils mit 6 Mäusen. Das FC-Modell wurde durch orale Gabe von Loperamidhydrochlorid induziert. Die Elektroakupunkturgruppe erhielt eine Behandlung an den Akupunkturpunkten „Tianshu“ und „Shangjuxu“ für 5 Tage pro Behandlungszyklus, insgesamt 2 Zyklen. Die Defäkationssituation der Mäuse wurde beobachtet und der Wassergehalt des Kots bestimmt; die Zeit bis zum Ausscheiden des ersten schwarzen Kots wurde aufgezeichnet; die Dünndarmtransportrate gemessen; der TH-Gehalt im Serum und Kolon mittels ELISA gemessen; die Koexpression von TH/c-Fos im RVLM durch Immunfluoreszenz nachgewiesen. Anschließend wurden 12 Mäuse zufällig in Gruppen mit leerem Virus + Clozapin-N-Oxid (CNO) und hemmendem Virus + CNO eingeteilt, und 18 Mäuse in Gruppen mit leerem Virus + CNO, Elektroakupunktur, aktivierendem Virus + CNO + Elektroakupunktur, je 6 Mäuse pro Gruppe. Die Viren wurden in den RVLM-Bereich injiziert, 21 Tage nach der Virusexpression wurde CNO (1 mg/kg) intraperitoneal verabreicht. Die Elektroakupunktur- und aktivierender Virus + CNO + Elektroakupunktur-Gruppen erhielten 30 Minuten nach der CNO-Injektion eine Elektroakupunkturbehandlung. Die Defäkationsbeobachtung und Motilitätsmessung erfolgten wie zuvor. Abschließend wurden bei weiteren 18 Mäusen rAAV-hSyn-GCaMP6s-Viren in den RVLM injiziert, 21 Tage nach Virusinfektion zufällig in Leer-, Modellkontroll- und Modell + Elektroakupunktur-Gruppen mit jeweils 6 Mäusen eingeteilt. Die neuronalen Kalziumsignaländerungen im RVLM wurden mit einem Multikanal-Glasfasersystem aufgezeichnet. Ergebnisse: Das rückläufige transsynaptische Virus-Tracing zeigte synaptische Verbindungen zwischen RVLM-Neuronen und dem proximalen Dickdarm. Im Vergleich zur Normalgruppe zeigten Modellmäuse eine verlängerte Zeit bis zur Ausscheidung des ersten schwarzen Kots, eine reduzierte Gesamtmenge an Kot, geringeren Wassergehalt im Kot und eine verminderte Dünndarmtransportrate (P<0,001, P<0,01). Der TH-Gehalt im Serum und Kolon war erhöht (P<0,01), ebenso die Anzahl der TH- und c-Fos-positiven Neuronen im RVLM sowie die Anzahl der Neuronen mit gemeinsamer TH/c-Fos-Expression (P<0,001). Im Vergleich zur Modellgruppe zeigte die Elektroakupunkturgruppe eine verkürzte Zeit bis zur Ausscheidung des ersten schwarzen Kots, eine erhöhte Kotgesamtzahl, Wassergehalt und Dünndarmtransportrate (P<0,001, P<0,01), eine verminderte TH-Konzentration im Serum und Kolon (P<0,01) und eine verringerte Anzahl TH-, c-Fos-positiver und TH/c-Fos-koexprimierender Neuronen im RVLM (P<0,001). Im Vergleich zur Gruppe leeres Virus + CNO zeigte die Gruppe hemmendes Virus + CNO eine verkürzte Zeit bis zur Ausscheidung des ersten schwarzen Kots, eine erhöhte Kotmenge, Wassergehalt und Dünndarmtransportrate (P<0,001, P<0,01). Im Vergleich zur Gruppe leeres Virus + CNO wies die Elektroakupunkturgruppe ebenfalls eine verkürzte Zeit bis zur Ausscheidung des ersten schwarzen Kots, erhöhte Menge, Wassergehalt und Dünndarmtransportrate auf (P<0,001, P<0,01). Im Vergleich zur Elektroakupunkturgruppe zeigte die Gruppe aktivierendes Virus + CNO + Elektroakupunktur eine verlängerte Zeit bis zur Ausscheidung des ersten schwarzen Kots, verminderte Menge, Wassergehalt und Dünndarmtransportrate (P<0,001, P<0,01). Im Vergleich zur Leergruppe war die Ca2+-Signalaktivität im RVLM der Modellkontrollgruppe signifikant erhöht (P<0,001). Im Vergleich zur Modellkontrollgruppe war die Ca2+-Signalaktivität in der Modell + Elektroakupunktur-Gruppe signifikant reduziert (P<0,001). Schlussfolgerung: Die Elektroakupunktur der Dickdarm-Akupunkturpunkte „Tianshu“ und „Shangjuxu“ kann die Darmmotilitätsstörung bei FC-Mäusen möglicherweise durch Hemmung der Aktivität von TH-positiven Neuronen im RVLM verbessern.

关键词

Elektroakupunktur; ventrolateraler Bereich der oberen Medulla oblongata; Tyrosinhydroxylase-positive Neuronen; Darmmotilitätsstörung

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