Wirkmechanismus der Verbesserung der niedriggradigen Entzündungsreaktion im Duodenum bei funktioneller Dyspepsie bei Ratten durch Regulation des Hippo/YAP-Signalwegs mittels Elektroakupunktur

Liang Tingting ,  

Zhao Yu ,  

Wang Tianlang ,  

Zhang Jiahao ,  

Wang Xihan ,  

Wang Xining ,  

Feng Yifan ,  

Guo Yue ,  

Liu Yunxiao ,  

Qu Yi ,  

Xue Yanan ,  

Liu Jidong ,  

摘要

Ziel: Klärung des Wirkmechanismus der Elektroakupunktur an den Punkten „Taichong“ und „Zusanli“ durch Regulation des Hippo/Yes-assoziierten Proteins (YAP)-Signalwegs zur Verbesserung der niedriggradigen Entzündungsreaktion im Duodenum bei Ratten mit funktioneller Dyspepsie (FD). Methoden: Männliche SD-Ratten wurden nach Zufallsprinzip in Kontroll-, Modell- und Elektroakupunkturgruppen eingeteilt (n=7). Ein FD-Modell wurde mit einer kombinierten Induktionsstrategie etabliert, bestehend aus erzwungenem Schwimmen, Schwanzreizung und Störungen im Essverhalten über 21 Tage. Die Elektroakupunkturgruppe wurde an den Punkten „Taichong“ und „Zusanli“ für 20 Minuten pro Sitzung, einmal täglich, behandelt, über zwei Behandlungszyklen von jeweils 6 Tagen mit einem Tag Pause dazwischen. Während der Modellbildung und Behandlung wurden Allgemeinzustand und Körpermasse der Ratten beobachtet; nach der Behandlung wurden Nahrungsaufnahme innerhalb von 3 Stunden, Magenentleerungsrate und Dünndarmtransitrate gemessen; HE-Färbung des Duodenums zur Untersuchung mukosaler pathologischer Veränderungen; ELISA zur Bestimmung der Serumspiegel von Motilin (MTL) und Gastrin (GAS); Western Blot zur Analyse der Proteinexpression von YAP, TAZ, phosphoryliertem (p)-YAP und p-TAZ im Duodenusgewebe; Immunhistochemie zur Messung der positiven Expression von Leukozyteninterleukin (IL)-1β, IL-6 und Tumornekrosefaktor-α (TNF-α); Immunfluoreszenz zur Detektion der positiven Expression von Occludin und Zonula Occludens-1 (ZO-1); Echtzeitquantitative PCR zur Bestimmung der mRNA-Expressionsniveaus von YAP, TAZ, B-Zell-Lymphom-2 (Bcl-2) und Bcl-2-assoziiertem X-Protein (Bax); TUNEL-Färbung zur Erfassung der Apoptoserate in Duodenuszellen. Ergebnisse: Im Vergleich zur Kontrollgruppe zeigten Ratten der Modellgruppe einen deutlich gedrückten Zustand, Zusammenkneifen der Augen, struppiges Fell und weichen Stuhl; Körpermasse, Nahrungsaufnahme über 3 Stunden, Magenentleerungsrate und Dünndarmtransitrate waren reduziert (P<0.05, P<0.01); im Lamina propria des Duodenums trat eine ausgeprägte entzündliche Infiltration auf; Serum-MTL- und GAS-Spiegel waren signifikant vermindert (P<0.01); die Expressionsverhältnisse von p-YAP/YAP und p-TAZ/TAZ im Duodenusgewebe waren erhöht (P<0.01); die positive Expression von IL-1β, IL-6 und TNF-α war gesteigert (P<0.01); die mittlere Fluoreszenzintensität von Occludin und ZO-1 war reduziert (P<0.01); das mRNA-Expressionsniveau von Bax war erhöht (P<0.01), während YAP, TAZ und Bcl-2 reduziert waren (P<0.01); die Apoptoserate der Darmepithelzellen war erhöht (P<0.01). Nach Intervention zeigte die Elektroakupunkturgruppe im Vergleich zur Modellgruppe eine verbesserte Verfassung, gesteigerte Aktivität, glänzendes Fell und geformten Stuhl; Körpermasse, Nahrungsaufnahme über 3 Stunden, Magenentleerungsrate und Dünndarmtransitrate waren erhöht (P<0.01); die entzündliche Infiltration in der Lamina propria des Duodenums war vermindert; Serum-MTL- und GAS-Spiegel waren erhöht (P<0.01); die Expressionsverhältnisse von p-YAP/YAP und p-TAZ/TAZ waren gesenkt (P<0.01, P<0.05); die positive Expression von IL-1β, IL-6 und TNF-α war reduziert (P<0.05, P<0.01); die mittlere Fluoreszenzintensität von Occludin und ZO-1 war erhöht (P<0.01, P<0.05); das mRNA-Expressionsniveau von Bax war gesenkt (P<0.01), während YAP, TAZ und Bcl-2 erhöht waren (P<0.01, P<0.05); die Apoptoserate der Darmepithelzellen war vermindert (P<0.01). Schlussfolgerung: Die Elektroakupunktur an den Punkten „Taichong“ und „Zusanli“ kann die Symptome der funktionellen Dyspepsie signifikant lindern und die niedriggradige Entzündungsreaktion im Duodenum effektiv hemmen, was möglicherweise mit der Regulation des Hippo/YAP-Signalwegs zusammenhängt.

关键词

Elektroakupunktur; funktionelle Dyspepsie; Hippo/YAP-Signalweg; niedriggradige Entzündungsreaktion

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