Effets de l'acupuncture électrique sur l'expression des protéines Nur77, TRAF2 et l'autophagie des macrophages dans le tissu pulmonaire de souris atteintes de maladie pulmonaire obstructive chronique

ZHANG Zhen ,  

FANG Danqun ,  

YIN Xiuwen ,  

LIU Na ,  

ZHANG Xinfang ,  

XIANG Shuiying ,  

LIU Zibing ,  

摘要

L'objectif est d'observer si l'acupuncture électrique peut, en régulant l'expression du récepteur nucléaire 77 (Nur77) et son transfert nucléocytoplasmique, affecter l'interaction entre Nur77 et le facteur associé au récepteur du facteur de nécrose tumorale 2 (TRAF2), inhiber ainsi l'autophagie excessive des macrophages du tissu pulmonaire, et améliorer la réponse inflammatoire pulmonaire chez la souris atteinte de maladie pulmonaire obstructive chronique (MPOC). Méthodes: quarante souris mâles C57BL/6 SPF ont été utilisées, dont 10 choisies au hasard comme groupe témoin, les 30 autres exposées à la fumée de cigarette pendant 3 mois pour modéliser la MPOC. Après l'établissement réussi du modèle animal, les souris expérimentales ont été réparties selon un principe aléatoire en trois groupes : groupe modèle, groupe acupuncture électrique, et groupe antago + acupuncture électrique, chaque groupe comprenant 10 souris. Les groupes acupuncture électrique et antago + acupuncture électrique ont reçu une intervention d'acupuncture bilatérale au niveau des points “Feishu” et “Zusanli”, une fois par jour pendant 20 minutes, sur une période de 14 jours; le groupe antago + acupuncture électrique a reçu une injection intrapéritonéale de l'antagoniste Nur77 DIM-C-pPhOH (25 mg/kg), 30 minutes avant l'acupuncture électrique quotidienne, pendant 14 jours. La fonction pulmonaire des souris a été mesurée à l'aide d'un analyseur de fonction respiratoire; la coloration HE a permis d'observer les changements pathologiques des tissus pulmonaires; le dosage ELISA a quantifié les cytokines IL-6, IL-1β et TNF-α dans le liquide de lavage broncho-alvéolaire (LBA); l'activité de la superoxyde dismutase (SOD) et le taux de malondialdéhyde (MDA) dans le tissu pulmonaire ont été détectés par méthode colorimétrique; l'expression de Nur77 (protéines nucléaire et cytoplasmique), TRAF2, LC3 et la protéine d'ancrage autophagique P62 (P62) ont été analysées par Western blot; l'expression de l'ARNm de Nur77 et Traf2 dans le tissu pulmonaire a été quantifiée par PCR en temps réel; la co-immunoprécipitation (Co-IP) a examiné l'interaction entre Nur77 et TRAF2; la microscopie électronique à transmission a observé les changements des autophagosomes dans les macrophages pulmonaires. Résultats: par rapport au groupe témoin, le groupe modèle a présenté une diminution significative des paramètres de la fonction respiratoire (P<0.05, P<0.01); les coupes histopathologiques ont montré un épaississement des parois des alvéoles, la fusion de plusieurs alvéoles en de grandes structures vésiculaires, ainsi qu'une infiltration diffuse massive de cellules inflammatoires. Le lavage broncho-alvéolaire a révélé une augmentation significative des cytokines pro-inflammatoires IL-6, IL-1β et TNF-α; l'activité de la SOD pulmonaire a diminué significativement et la teneur en MDA a augmenté significativement (P<0.01); le ratio LC3II/LC3I a augmenté significativement (P<0.05), l'expression de la protéine P62 a diminué de manière notable (P<0.01), les niveaux de la protéine TRAF2 ont augmenté significativement (P<0.01), tandis que l'expression nucléaire de Nur77 a augmenté et son expression cytoplasmique a diminué significativement (P<0.01). De plus, la transcription de Nur77 a diminué significativement (P<0.01), tandis que celle de Traf2 a augmenté (P<0.05); la liaison relative entre Nur77 et TRAF2 a diminué significativement (P<0.01). La microscopie électronique a montré une augmentation marquée du nombre d'autophagosomes dans les macrophages. Par rapport au groupe modèle, le groupe acupuncture électrique a montré une amélioration significative des indices susmentionnés (P<0.05, P<0.01); l'activité de la SOD a augmenté de façon notable (P<0.01), la teneur en MDA a diminué significativement (P<0.05); le ratio LC3II/LC3I a diminué significativement (P<0.01), l'expression de la protéine P62 a augmenté de manière significative (P<0.01), le niveau de la protéine TRAF2 a diminué de façon significative (P<0.05); l'expression nucléaire de Nur77 a significativement diminué tandis que son expression cytoplasmique a considérablement augmenté (P<0.05, P<0.01); l'expression de l'ARNm de Nur77 a augmenté alors que celle de Traf2 a diminué significativement (P<0.05); la liaison relative entre Nur77 et TRAF2 a considérablement augmenté (P<0.05); le nombre d'autophagosomes dans les macrophages a été réduit de manière significative. Par rapport au groupe acupuncture électrique, le groupe antago + acupuncture électrique a montré un renversement des indices susmentionnés (P<0.05,P<0.01). Conclusion: l'acupuncture électrique peut, en augmentant l'expression de Nur77 et en facilitant son transfert du noyau vers le cytoplasme, renforcer l'interaction entre Nur77 et TRAF2, réguler les protéines liées à l'autophagie, inhiber l'autophagie excessive des macrophages pulmonaires et atténuer la réponse inflammatoire pulmonaire dans la MPOC.

关键词

acupuncture électrique; maladie pulmonaire obstructive chronique; récepteur nucléaire 77; facteur associé au récepteur du facteur de nécrose tumorale 2; autophagie des macrophages

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