Étude sur le mécanisme de l'acupuncture de "régulation du foie et de l'esprit" pour réguler l'autophagie dépendante de l'AMPK pour améliorer la dépression post-AVC ischémique
L'objectif de l'étude était d'observer l'effet de l'acupuncture de "régulation du foie et de l'esprit" sur l'activation de la protéine kinase activée par l'adénosine monophosphate (AMPK) et l'expression des protéines associées à l'autophagie dans le cortex préfrontal des rats modèles de dépression post-AVC ischémique, et de discuter du mécanisme d'action de l'acupuncture de "régulation du foie et de l'esprit" pour améliorer la dépression post-AVC ischémique. Les méthodes comprenaient la sélection aléatoire de neuf rats SD comme groupe de fausse opération, et 45 autres rats pour établir un modèle de ligature avec un fil pour bloquer et rétablir l'artère cérébrale moyenne (MCAO/R) par méthode de MCAO/R. Après la construction réussie du modèle MCAO/R, les rats ont été répartis aléatoirement en groupe d'AVC, groupe de dépression post-AVC, groupe d'inhibiteur, groupe d'acupuncture et groupe d'acupuncture + inhibiteur, avec neuf rats dans chaque groupe. Les quatre groupes suivants de rats ont subi un stress chronique imprévisible et modéré (CUMS) pour construire un modèle de PSD ischémique. Après la construction réussie du modèle de dépression post-AVC ischémique, le groupe d'inhibiteurs a reçu une injection intraventriculaire bilatérale d'inhibiteur de l'AMPK Compound C (0,1 μmol, 10 μL); le groupe d'acupuncture a reçu une acupuncture à "Yintang," "Baihui," "Hegu," et "Taichong," pendant 30 minutes à chaque fois, en tournant toutes les 15 minutes, une fois par jour, pour une intervention continue de 14 jours; le groupe d'acupuncture + inhibiteur a reçu un traitement par acupuncture après une injection d'inhibiteur de l'AMPK pendant 3 jours. La méthode de notation de Longa a été utilisée pour évaluer les déficits neurologiques, l'expérience de préférence pour solution sucrée et l'expérience d'exploration ont été utilisées pour évaluer le comportement des rats, et la coloration HE a été utilisée pour observer les changements morphologiques du cortex préfrontal. La méthode de Western blot a été utilisée pour détecter l'expression des protéines AMPK, phospho (p)-AMPK, Beclin1, P62, et la chaîne légère de microtubules 3 (LC3) II/I dans le cortex préfrontal, et la microscopie électronique à transmission a été utilisée pour observer l'ultrastructure des neurones corticaux préfrontaux. Les résultats ont montré que par rapport au groupe de fausse opération, le groupe d'AVC a présenté une diminution significative de la distance totale parcourue en 5 minutes et du pourcentage de temps passé dans la zone centrale(P<0,01) , une diminution de l'expression de p-AMPK/AMPK dans le cortex préfrontal (P<0,01). Par rapport au groupe de fausse opération, le groupe de dépression post-AVC a présenté une augmentation de la notation de Longa (P<0,01), une diminution de la préférence pour la solution sucrée, de la distance totale parcourue en 5 minutes et du pourcentage de temps passé dans la zone centrale (P<0,01); les neurones ischémiques du cortex préfrontal étaient lâchement disposés, avec des noyaux fortement colorés, et des neurones dégénératifs nécrotiques observés; l'expression de p-AMPK/AMPK, Beclin1, et LC3II/I dans le cortex préfrontal a diminué (P<0,01, P<0,05), tandis que l'expression de P62 a augmenté (P<0,01). Par rapport au groupe de dépression post-AVC, le groupe d'acupuncture a montré une augmentation significative de la préférence pour la solution sucrée, de la distance totale parcourue en 5 minutes et du pourcentage de temps passé dans la zone centrale (P<0,01); les neurones ischémiques du cortex préfrontal étaient plus uniformément disposés, de taille et de forme plus uniformes; l'expression de p-AMPK/AMPK, Beclin1, et LC3 II/I a augmenté (P<0,01), tandis que l'expression de P62 a diminué (P<0,05). Par rapport au groupe d'inhibiteurs, le groupe d'acupuncture + inhibiteurs a montré une augmentation significative de la préférence pour la solution sucrée, de la distance totale parcourue en 5 minutes et du pourcentage de temps passé dans la zone centrale (P<0,01); les neurones ischémiques du cortex préfrontal étaient légèrement enflés, avec une diminution des neurones nécrotiques observés; l'expression de p-AMPK/AMPK, Beclin1, et LC3 II/I a augmenté (P<0,05, P<0,01), tandis que l'expression de P62 a diminué (P<0,01). Les résultats de la microscopie électronique à transmission ont montré que les neurones du cortex préfrontal du groupe de fausse opération étaient structurés de manière intacte, tandis que les neurones des groupes d'AVC, de dépression post-AVC, et d'inhibiteurs présentaient des changements pathologiques évidents, et que des corps d'autophagie typiques s'étaient formés dans les groupes d'acupuncture et d'acupuncture + inhibiteurs, avec une structure neuronale globalement préservée. En conclusion, le traitement par acupuncture de "régulation du foie et de l'esprit" peut améliorer les symptômes de la dépression post-AVC ischémique chez le rat, et son mécanisme pourrait être associé à l'activation de l'autophagie dépendante de l'AMPK.
关键词
Dépression post-AVC; Acupuncture; Autophagie; Protéine kinase activée par l'adénosine