Effect of heat-reinforcing needling on expression profile of LncRNAs in synovial tissues of rabbits with cold-syndrome type rheumatoid arthritis

DU Xiao-zheng ,  

LIU Li-mei ,  

LIU Cui ,  

JING Wei-yao ,  

YUAN Bo ,  

ZHANG Xing-hua ,  

ZHANG Feng-fan ,  

LI Xiang-jun ,  

LIU Qiang ,  

WANG Hai-dong ,  

摘要

L'objectif de la présente étude était d'observer l'impact de la méthode de piqûre chaude sur le profil d'expression des ARN longs non codants (LncRNA) dans le tissu synovial de lapins modèles de syndrome rhumatoïde froid (RA) et d'étudier le mécanisme d'action de la méthode de piqûre chaude dans le traitement du RA. Méthodes : 18 lapins ont été répartis au hasard en trois groupes : groupe témoin, groupe modèle, groupe de la méthode de piqûre chaude, avec 6 lapins dans chaque groupe. Pour créer le modèle de syndrome froid RA, des injections de mélange de blanc d'œuf et d'adjuvant de Freund, complétées par la méthode de congélation à basse température, ont été utilisées. Le groupe de la méthode de piqûre chaude a été soumis à des piqûres sur les deux pattes arrière au point Zu-san-li pendant 30 minutes / fois, 1 fois / jour pendant 14 jours. Après l'intervention, les lapins ont été observés pour leur état général, le diamètre de l'articulation du genou, le seuil de douleur ; la cavité articulaire, l'épaisseur de la membrane synoviale et les signaux de flux sanguin interne de l'articulation du genou ont été observés par échographie Doppler couleur ; les changements morphologiques pathologiques du tissu synovial ont été étudiés par coloration à l'hématoxyline-éosine ; la méthode ELISA a été utilisée pour mesurer la concentration de TNF-α, d'IL-1β et d'IL-6 dans le sérum des lapins ; la technique de séquençage à haut débit a été utilisée pour analyser et déterminer les différences LncRNA et leurs fonctions biologiques dans le tissu synovial des lapins. Résultats : Par rapport au groupe témoin, les lapins du groupe modèle présentaient une augmentation du diamètre de l'articulation du genou (P<0.05), une diminution du seuil de douleur (P<0.05), une augmentation diffusée notable du tissu synovial, de l'exsudat articulaire et des signaux anormaux de flux sanguin ; une augmentation notable de l'épaisseur et de la prolifération de la membrane synoviale, avec formation de vaisseaux sanguins capillaires, un grand nombre de cellules inflammatoires ; une augmentation de la concentration de TNF-α, d'IL-1β et d'IL-6 dans le sérum (P<0.05). Par rapport au groupe modèle, les lapins du groupe de la méthode de piqûre chaude présentaient une diminution du diamètre de l'articulation du genou (P<0.05), une augmentation du seuil de douleur (P<0.05), une réduction variable de l'augmentation diffusée du tissu synovial, de l'exsudat articulaire et des signaux anormaux de flux sanguin de la membrane synoviale ; une diminution significative de la prolifération de la membrane synoviale et de l'accumulation de cellules inflammatoires, une diminution de la concentration de TNF-α, d'IL-1β et d'IL-6 dans le sérum (P<0.05). Le séquençage à haut débit et l'analyse bioinformatique ont montré que les groupes de la méthode de piqûre chaude et du modèle partageaient 142 LncRNA avec une tendance d'expression opposée, dont 59 LncRNA étaient inversés à la hausse, principalement dans des clusters fonctionnels nucléaires, comprenant des voies métaboliques, la voie de signalisation de l'activateur du récepteur nucléaire proliférateur gamma (PPAR) et la voie de signalisation de la protéine kinase AMP-activée (AMPK) ; 83 LncRNA présentaient une diminution inverse, principalement dans des clusters fonctionnels nucléaires, comprenant le cycle cellulaire, la voie de signalisation de la protéine kinase activée par les mitogènes (MAPK) et le vieillissement cellulaire. Les résultats de PCR ont montré que par rapport au groupe témoin, les lapins du groupe modèle présentaient une diminution du niveau d'expression de MSTRG.15448.1 et MSTRG.17571.1 dans le tissu synovial de l'articulation du genou (P<0.05), et une augmentation du niveau d'expression de MSTRG.5134.1, MSTRG.13294.1 et MSTRG.15972.1 (P<0.05) ; par rapport au groupe modèle, les lapins du groupe de la méthode de piqûre chaude présentaient une augmentation du niveau d'expression de MSTRG.15448.1 et MSTRG.17571.1 dans le tissu synovial de l'articulation du genou (P<0.05), et une diminution du niveau d'expression de MSTRG.5134.1, MSTRG.13294.1 et MSTRG.15972.1 (P<0.05). Conclusions : La méthode de piqûre chaude est capable de réguler le changement de profil d'expression LncRNA dans le tissu synovial du RA, ce qui pourrait être l'un des mécanismes de suppression de la réaction inflammatoire du tissu synovial et d'amélioration des symptômes.

关键词

Rheumatoid arthritis;heat-reinforcing needling;Long noncoding RNA

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