Régulation par stimulation de la moelle épinière de l'expression des neutrophiles dans les pièges à ADN extracellulaires pour inhiber la réaction inflammatoire nerveuse et la formation de cicatrices gliales chez les souris atteintes de lésion médullaire

WANG Jia-pei ,  

HUANG Si-qin ,  

TANG Cheng-lin ,  

YANG Zhu-xin ,  

LI Ming-jiao ,  

LIAO Cai ,  

XING Ke-han ,  

摘要

L'objectif de cette étude était d'évaluer le niveau d'expression des neutrophiles en dehors des pièges à ADN dans la moelle épinière des souris atteintes de lésion médullaire (SCI) par régulation électrique. Nous avons réparti les souris C57BL/6 dans un groupe placebo, un groupe modèle, un groupe électrique, un groupe électrique + DNase1 et un groupe DNase1, 12 souris dans chaque groupe. Le modèle de lésion médullaire a été créé à l'aide de la méthode de la pince. L'intervention dans le groupe électrique consistait à empêcher la synthèse de l'ADN acide NETs dans la région de la moelle épinière correspondant à T10 et T12 pendant 10 minutes/fois, une fois par jour, pendant 14 jours consécutifs ; l'intervention dans le groupe DNase1 consistait uniquement en une injection intramusculaire de l'inhibiteur NETs DNase1, 50 µg/souris, deux fois par jour, pendant 14 jours consécutifs ; l'intervention dans le groupe électrique + DNase1 consistait en une injection de DNase1 combinée à une électrothérapie continue pendant 14 jours consécutifs. Nous avons évalué les fonctions motrices des souris dans chaque groupe à l'aide de l'échelle BBB ; coloration à l'hématoxyline et à l'éosine pour observer la morphologie pathologique de la moelle épinière ; immunofluorescence pour observer l'expression positive des protéines citH3 et GFAP dans la moelle épinière de chaque groupe ; Western blot pour mesurer le niveau relatif d'expression des protéines citH3, NE, Mpo, cGAS, STING, GFAP, Neurocan dans les tissus de la moelle épinière ; ELISA pour mesurer le contenu en facteurs inflammatoires L1-β et TNF-α dans la moelle épinière et le sérum. Par rapport au groupe placebo, l'évaluation BBB pour toutes les périodes de temps après la modélisation a diminué (P <0,01) ; des neurones dénaturés dans la zone de lésion de la moelle épinière, un noyau contracté, une infiltration massive de cellules inflammatoires ; un niveau d'expression des protéines citH3, NE, Mpo, cGAS, STING, GFAP, Neurocan dans les tissus de la moelle épinière et l'intensité de fluorescence de citH3, GFAP, le contenu en IL-1β et TNF-α dans le sérum et la moelle épinière ont augmenté (P <0.01, P <0.05). Par rapport au groupe modèle, l'évaluation BBB des souris dans tous les groupes de traitement a augmenté après 7 et 14 jours de modélisation (P <0.01, P <0.05) ; des neurones dans les tissus de la moelle épinière ont récupéré et l'infiltration inflammatoire a diminué ; le niveau d'expression des protéines citH3, NE, cGAS, STING, GFAP, Neurocan et l'intensité de fluorescence de citH3, GFAP, le contenu en IL-1β, TNF-α dans le sérum et la moelle épinière (P <0.01, P <0.05) ; l'expression de la protéine Mpo dans les tissus de la moelle épinière chez les souris dans le groupe électrique et électrique + DNasel à diminué (P <0.05, P <0.01). Le groupe DNase1 peut produire des effets similaires à ceux du groupe électrique, les changements dans les indicateurs susmentionnés du groupe électrique + DNase1 sont plus significatifs que ceux du groupe électrique (P <0,01, P <0,05). Conclusion : Pincer la moelle épinière par électrothérapie peut atténuer la réaction inflammatoire nerveuse et la formation de cicatrices gliales chez la souris atteinte de SCI, améliorer la récupération des fonctions nerveuses après la SCI, et son mécanisme est peut-être lié à la régulation à la baisse du niveau d'expression des NETs.

关键词

lésion médullaire ; électricité ; pièges à ADN neutrophile ; réaction inflammatoire nerveuse ; cicatrices gliales

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