Mécanisme de l'acupuncture pour améliorer l'autophagie des cellules épithéliales du côlon irritable à diarrhée chez les rats en se basant sur la voie du signal PI3K/AKT/mTOR

WANG Ting ,  

SONG Xiao-ge ,  

RUAN Jing-ru ,  

HAN Xiao-yu ,  

WANG Yu-qing ,  

XIANG Ting-ting ,  

LI Kui-wu ,  

ZHU Jing-wei ,  

FANG Yu-cheng ,  

WANG Zi-ye ,  

CHU Hao-ran ,  

摘要

Le but de cette étude était d'observer les effets de l'acupuncture et du moxibustion sur la voie du signal phosphoinositide 3-kinase (PI3K) / protéine kinase B (AKT) / mammifère cible de la rapamycine (mTOR) chez le rat modèle du syndrome du côlon irritable à diarrhée (IBS-D), et d'explorer les mécanismes potentiels de l'acupuncture et de la moxibustion dans la régulation du niveau d'autophagie des cellules épithéliales intestinales et la protection de la barrière muqueuse chez le rat modèle du IBS-D. La méthode: Quarante rats SD ont été répartis de manière aléatoire en quatre groupes: normal, modèle, acupuncture et acupuncture + groupe LY294002, avec 10 rats dans chaque groupe. Un modèle du IBS-D a été établi à l'aide d'une méthode de stimulation à l'acide acétique et de ligature chronique. Les rats du groupe acupuncture ont reçu une acupuncture suspendue de 20 minutes au bilatéral Tian Shu et Shang Ju Xu. Les rats du groupe acupuncture + LY294002 ont reçu une injection intrapéritonéale de l'inhibiteur de la PI3K LY294002 (0,75 mg / kg) 30 minutes avant l'intervention par acupuncture. Les deux groupes ont reçu une intervention une fois par jour pendant 7 jours consécutifs. Avant, après la modélisation et après l'intervention, la quantité minimale d'eau injectée lorsque la note de réflexe de retrai abdominal (AWR) des rats atteignait 3 points a été mesurée; une coloration à l'hématoxyline et à l'éosine a été utilisée pour observer les lésions inflammatoires de la muqueuse colique; une observation de la structure mitochondriale et du nombre de corps autophagiques dans la muqueuse colique a été effectuée au microscope électronique; l'expression des protéines d'occludine, de la protéine de jonction serrée 1 (ZO-1), protéine claudin-2, protéine p62 et les rapports p-PI3K/PI3K, p-AKT/AKT, p-mTOR/mTOR, et la chaîne légère de la protéine associée à microtubules (LC) (LC3B-II/I) ont été détectés par Western blot; l'expression des ARNm de PI3K, AKT, mTOR, occludine, ZO-1, Claudin-2 chez les rats coliques a été vérifiée par PCR en temps réel. Résultats: Par rapport au groupe normal, la quantité minimale d'eau injectée lors de AWR des rats du groupe modèle a diminué (<italic>P<0,01), les cellules épithéliales intestinales étaient disposées de manière irrégulière, une infiltration cellulaire inflammatoire locale était visible, et de nombreux corps autophagiques étaient visibles au microscope électronique, et les rapports p-PI3K / PI3K, p-AKT / AKT, p-mTOR / mTOR et l'expression des protéines Occludin, ZO-1, p62, l'expression des ARNm de PI3K, AKT, mTOR, Occludin, ZO-1 ont été réduits (<italic>P<0,01), l'expression de la protéine Claudin-2 et de l'ARNm, le ratio LC3B-II / I ont augmenté (<italic>P<0,01). Par rapport au groupe modèle, la quantité minimale d'eau injectée lors de AWR des rats du groupe acupuncture a augmenté (<italic>P<0,05), la structure de la muqueuse intestinale était relativement intacte, la réduction de l'infiltration cellulaire inflammatoire, la réduction du nombre de corps autophagiques au microscope électronique, et les rapports p-PI3K / PI3K, p-AKT / AKT, p-mTOR / mTOR et l'expression des protéines Occludin, ZO-1, p62 et l'expression des ARNm de PI3K, AKT, mTOR, Occludin, ZO-1 ont augmenté de manière relative (<italic>P<0,01), l'expression de la protéine Claudin-2 et de l'ARNm, le ratio LC3B-II / I ont été réduits (<italic>P<0,01). Par rapport au groupe acupuncture, les rats du groupe acupuncture + LY294002 avaient une structure de la muqueuse colique relativement perturbée, une augmentation de l'infiltration cellulaire inflammatoire, une augmentation du nombre de corps autophagiques au microscope électronique, et d'autres indicateurs ont été réduits à différents degrés (<italic>P<0,01, <italic>P<0,05). Conclusions: L'acupuncture pourrait activer la voie du signal PI3K/AKT/mTOR, réduire le niveau d'autophagie des cellules épithéliales intestinales chez les rats IBS-D, atténuer les lésions des cellules épithéliales intestinales des rats IBS-D et protéger la barrière muqueuse intestinale.

关键词

syndrome du côlon irritable à diarrhée; acupuncture; douleur viscérale; voie du signal phosphoinositide 3-kinase (PI3K) / protéine kinase B (AKT) / mammifère cible de la rapamycine (mTOR); barrière muqueuse intestinale; autophagie

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