Impact de l'acupuncture sur la libération d'exosomes au site d'acupuncture et la réparation musculaire chez le rat modèle de lésion musculaire multiple

LÜ Zong-ze ,  

XIE Miao ,  

CHEN Ying ,  

XU Xiao-lin ,  

HUANG Zhi-bin ,  

WANG Di-lin ,  

LI Wen-min ,  

WEN Chun-di ,  

LIU Tong ,  

摘要

L'objectif de cette étude était d'étudier l'impact de l'acupuncture sur la libération d'exosomes au site d'acupuncture et la réparation musculaire chez le rat modèle de lésion musculaire multiple. Méthodes: Quarante rats ont été randomisés en groupe normal, groupe modèle, groupe acupuncture et groupe inhibiteur, avec 10 rats dans chaque groupe. Les groupes modèle, acupuncture et inhibiteur ont été utilisés pour préparer un modèle de lésion musculaire multiple en injectant du bupivacaïne à 0,5% dans le muscle. Le groupe acupuncture et le groupe inhibiteur ont reçu respectivement un traitement par acupuncture Weizhong et Shenshu, avec une onde lâche, une fréquence de 2 Hz/10 Hz, 1 mA, pendant 20 minutes à chaque fois, une fois par jour, une intervention continue pendant 7 jours. Le groupe inhibiteur a reçu une injection de l'inhibiteur des exosomes GW4869 (3 mg/mL, 50 µL/acupoint Weizhong et Shenshu) 1 heure avant chaque séance d'acupuncture. Le septième jour après la modélisation, les muscles multiples ont été prélevés pour observer les changements morphologiques des tissus musculaires par coloration HE, pour observer les fibres de collagène musculaire par coloration Masson, pour observer l'expression positive du facteur de transcription associé 7 (Pax7) et de l'antigène de différenciation musculaire (MyoD) par immunohistochimie, pour extraire les exosomes sériques de chaque groupe de rats et les identifier à l'aide de la microscopie électronique à transmission (MET) et de l'analyse de suivi des nanoparticules (NTA), et pour détecter l'expression de la myoglobuline (MyoG) et de la chaîne lourde de la myosine (MyHC) dans les tissus musculaires après le traitement des différents groupes, ainsi que l'expression des protéines CD63, du facteur d'interaction des protéines d'induction d'apoptose 6 (Alix) et de la protéine du gène sensible au cancer 101 (TSG101) dans les exosomes sériques par Western blot. Résultats: La majorité des fibres musculaires dans le groupe modèle ont subi une dégénérescence nécrotique, avec une infiltration massive de cellules inflammatoires autour des fibres musculaires et une grande quantité de fibres de collagène bleues visibles. Dans le groupe acupuncture, la morphologie des fibres musculaires était relativement intacte, avec plus de nouvelles fibres musculaires, moins de cellules inflammatoires dans la zone lésée et une diminution significative des fibres de collagène. Dans le groupe inhibiteur, les fibres musculaires étaient toujours largement endommagées, avec une infiltration importante de cellules inflammatoires, accompagnée de nouvelles fibres musculaires de diamètres inégaux et d'une grande quantité de collagène. Les résultats de la MET, de la NTA et du Western blot ont tous confirmé le succès de l'extraction des exosomes, avec une morphologie sous microscope électronique typique en forme de soucoupe, une taille de particule concentrée dans la plage de 70 à 200 nm et une expression positive des protéines marqueurs CD63, Alix et TSG101. Comparé au groupe normal, l'expression de Pax7 dans les muscles multiples, ainsi que l'expression de CD63 et Alix des exosomes sériques augmentaient dans le groupe modèle (P<0,01, P<0,05, P<0,001). Comparé au groupe modèle, l'expression de Pax7, MyoD, MyoG et MyHC dans les muscles multiples, ainsi que l'expression de Alix et TSG101 des exosomes sériques augmentaient de manière significative dans le groupe acupuncture (P<0,01, P<0,05). Comparé au groupe acupuncture, l'expression de Pax7, MyoD, MyoG et MyHC dans les muscles multiples, ainsi que l'expression de TSG101 et CD63 des exosomes sériques diminuaient de manière significative dans le groupe inhibiteur (P<0,01, P<0,001, P<0,05). Conclusion: L'acupuncture peut réguler de manière significative l'expression de Pax7, MyoD, MyoG et MyHC dans les muscles endommagés multiples, favorisant ainsi la réparation et la régénération musculaires. Cet effet pourrait être lié à la promotion de la libération d'exosomes au site d'acupuncture, suggérant que les exosomes pourraient être la substance clé pour l'initiation et la transmission de l'effet de l'acupuncture.

关键词

acupuncture;lésion musculaire multiple;point d'acupuncture;exosomes sériques;réparation et régénération musculaire

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