Effet de la moxibustion sur l'apoptose des cellules endothéliales chez la souris athéroscléreuse via la voie de signalisation PINK1/Parkin

PAN Li ,  

WU Qi-biao ,  

ZHU Zhou ,  

XIONG Jiao-jiao ,  

YAN Zhao-bo ,  

ZHANG Ning ,  

YANG Zhi-hong ,  

YANG Xiao-fang ,  

摘要

L'objectif est d'observer l'effet de la moxibustion sur le métabolisme lipidique chez des souris atteintes d'athérosclérose (AS), ainsi que sur la structure de l'arc aortique thoracique et des mitochondries, la voie de signalisation de la kinase PTEN induite 1 présumée (PINK1)/Parkin et les protéines associées à l'apoptose, afin d'explorer le mécanisme possible par lequel la moxibustion prévient et traite l'AS via la régulation de la voie de signalisation PINK1/Parkin. Méthodes : 10 souris C57BL/6J ont été assignées au groupe témoin avec alimentation normale, 30 souris ApoE-/- ont été nourries avec un régime riche en graisses pour établir un modèle d'AS, puis réparties aléatoirement en groupes modèle, moxibustion, et moxibustion + Mdivi-1, avec 10 souris par groupe. Le groupe moxibustion a reçu une intervention par moxibustion sur les points "Danzhong", "Shenque", ainsi que les points bilatéraux "Neiguan" et "Xuehai" pendant 30 minutes à chaque fois ; le groupe moxibustion + Mdivi-1 a reçu 30 minutes avant la moxibustion une injection intrapéritonéale de Mdivi-1 (1,2 mg/kg). Chaque groupe a reçu l'intervention 5 jours par semaine, une fois par jour, pendant 12 semaines consécutives. Les taux de triglycérides (TG), cholestérol total (TC), cholestérol LDL (LDL-C) et cholestérol HDL (HDL-C) dans le sérum des souris ont été mesurés à l'aide d'un analyseur biochimique entièrement automatique ; l'observation morphologique pathologique de l'arc aortique a été effectuée par coloration HE ; la structure ultrastructurale des mitochondries de l'aorte a été observée au microscope électronique ; les niveaux d'expression des protéines PINK1, Parkin, Bax (protéine liée à Bcl-2), Bcl-2 et Caspase-3 dans le tissu aortique ont été détectés par Western blot ; l'expression de Parkin et du cytochrome C (Cyt C) dans le tissu aortique a été détectée par immunofluorescence. Par rapport au groupe témoin, le groupe modèle présentait une augmentation des taux de TC, TG et LDL-C (P<0,01), une diminution du HDL-C (P<0,01) dans le sérum ; une augmentation des niveaux d'expression des protéines PINK1, Parkin, Bax et Caspase3 (P<0,01, P<0,05) et une diminution de Bcl-2 (P<0,01) dans le tissu aortique ; une augmentation de l'expression fluorescente de Parkin et Cyt C (P<0,01). Par rapport au groupe modèle, le groupe moxibustion présentait une diminution des taux de TC, TG et LDL-C (P<0,01, P<0,05), une augmentation des niveaux d'expression de PINK1, Parkin et Bcl-2 (P<0,01), une diminution de Bax et Caspase3 (P<0,01), une expression fluorescente augmentée de Parkin (P<0,01) et une diminution de l'expression fluorescente de Cyt C (P<0,01) ; le groupe moxibustion + Mdivi-1 montrait une diminution des TG (P<0,05), une augmentation de l'expression fluorescente de Parkin (P<0,01) et une diminution de Cyt C (P<0,01) dans le tissu aortique. Par rapport au groupe moxibustion, le groupe moxibustion + Mdivi-1 présentait une augmentation des taux de TC, TG et LDL-C (P<0,05, P<0,01), une diminution des niveaux d'expression de PINK1, Parkin et Bcl-2 (P<0,05, P<0,01), une augmentation de Bax et Caspase3 (P<0,01, P<0,05), une diminution de l'expression fluorescente de Parkin (P<0,01) et une augmentation de l'expression fluorescente de Cyt C (P<0,05). Les résultats morphologiques ont montré que le groupe modèle présentait une structure irrégulière de l'endothélium vasculaire de l'arc aortique avec un épaississement local de l'intima, présence d'une hyperplasie des plaques accompagnée de tissu fibreux ou de tissu musculaire lisse, avec décollement partiel des plaques ; les mitochondries étaient gravement gonflées, avec lyse de la matrice, nombre réduit de crêtes et formation de vacuoles ; le groupe moxibustion présentait une lumière de l'arc aortique plus régulière, moins de cellules endothéliales dégénérées et enflées, présence de petites plaques et de cellules spumeuses, un léger gonflement mitochondrial, une lyse partielle de la matrice et présence de lysosomes secondaires ; le groupe moxibustion + Mdivi-1 montrait un décollement local des cellules endothéliales, un épaississement local de l'intima, une prolifération de tissu musculaire lisse, présence de cellules spumeuses dans les plaques ; mitochondries légèrement enflées, crêtes réduites, lyse partielle de la matrice. Conclusion : La moxibustion peut améliorer le métabolisme lipidique des souris ApoE-/- atteintes d'AS, améliorer les lésions pathologiques de l'aorte thoracique, favoriser la restauration de la structure et la fonction mitochondriale, et son mécanisme pourrait être lié à l'activation de la voie de signalisation PINK1/Parkin, à la réduction du transfert de Cyt C, rétablissant ainsi la structure et la fonction mitochondriales et inhibant l'apoptose cellulaire.

关键词

moxibustion;athérosclérose;voie de signalisation PINK1/Parkin;mitochondries;apoptose cellulaire

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