Étude mécanistique de la régulation de la voie IL-4/JAK1/STAT6 par électroacupuncture pour promouvoir la polarisation des macrophages M2 et améliorer les lésions de la barrière muqueuse intestinale dans un modèle murin de colite ulcéreuse
Objectif d'observer l'effet de l'intervention par électroacupuncture sur la voie de signalisation interleukine-4 (IL-4) / tyrosine kinase 1 (JAK1) / facteur de transduction et d'activation de la transcription 6 (STAT6) dans les tissus du côlon de souris modèles atteintes de colite ulcéreuse chronique (UC), et d'explorer le mécanisme possible par lequel l'électroacupuncture favorise la polarisation des macrophages M2, améliorant les lésions de la barrière muqueuse intestinale chez les souris modèles d'UC. Des souris BALB/c SPF âgées de 8 semaines, de sexe masculin et féminin en parts égales, ont été stratifiées par sexe puis réparties au hasard en groupe témoin (15 souris) et groupe modèle (41 souris) selon un tableau de nombres aléatoires. La consommation d'une solution à 3 % de dextran sulfate de sodium a induit un modèle de UC chronique, les souris avec modèle réussi ont été réparties au hasard en groupe modèle, groupe électroacupuncture+11B11 et groupe électroacupuncture, chaque groupe comprenant finalement 12 souris. Le groupe électroacupuncture+11B11 a reçu une injection intrapéritonéale d'inhibiteur IL-4 11B11 (10 mg/kg) avant l’électroacupuncture; le groupe électroacupuncture a reçu une stimulation des points "Guanyuan", "Tianshu", "Zusanli" et "Shangjuxu" pendant 20 minutes à chaque séance; chaque groupe a reçu une intervention une fois par jour pendant 14 jours consécutifs. Après l'intervention, ont été évalués : ① amélioration des symptômes : y compris le score de l'indice d'activité de la maladie (DAI), score macroscopique du côlon et observation histopathologique par coloration HE ; ② structure et fonction de la barrière muqueuse intestinale : observation de la structure des jonctions serrées dans le côlon par microscopie électronique en transmission, imagerie in vivo de la fuite intestinale par FITC-4D, détection de l'expression positive des protéines de la ceinture de fermeture ZO-1, occludine dans le tissu du côlon par immunofluorescence ; ③ activation de la voie de signalisation IL-4/JAK1/STAT6 : dosage par Western blot des niveaux relatifs des protéines IL-4, p-JAK1/JAK1, p-STAT6/STAT6 dans le tissu du côlon ; ④ marqueurs de polarisation des macrophages M2 : détection du ratio CD206+/CD86+ dans les ganglions lymphatiques mésentériques par cytométrie en flux, détection de l'expression positive de CD206 et arginase-1 (Arg-1) dans le tissu du côlon par immunofluorescence. Comparé au groupe témoin, le groupe modèle présentait une augmentation significative des scores DAI et macroscopiques (P<0.05), désorganisation de la structure de la muqueuse colique, fuite intestinale fluorescente sévère, expression positive significativement réduite de ZO-1 et occludine (P<0.05), diminution des niveaux relatifs des protéines IL-4, p-JAK1/JAK1, p-STAT6/STAT6 (P<0.05), baisse du ratio CD206+/CD86+ et de l'expression positive de CD206 et Arg-1 (P<0.05). Comparé au groupe modèle, le groupe électroacupuncture présentait une baisse des scores DAI et macroscopiques (P<0.05), amélioration de la structure de la muqueuse colique, réduction de la fuite fluorescente intestinale, augmentation significative de l'expression positive de ZO-1 et occludine (P<0.05), hausse relative des protéines IL-4, p-JAK1/JAK1, p-STAT6/STAT6 (P<0.05), augmentation du ratio CD206+/CD86+ et de l'expression positive de CD206 et Arg-1 (P<0.05). Comparé au groupe électroacupuncture, le groupe électroacupuncture+11B11 présentait une baisse des scores DAI et macroscopiques (P<0.05), désorganisation de la structure de la muqueuse colique, fuite intestinale fluorescente marquée, diminution significative de l'expression positive de ZO-1 et occludine (P<0.05), baisse des niveaux relatifs des protéines IL-4, p-JAK1/JAK1, p-STAT6/STAT6 (P<0.05), diminution du ratio CD206+/CD86+ et de l'expression positive de CD206 et Arg-1 (P<0.05). Conclusion : l'électroacupuncture peut favoriser la réparation de la barrière muqueuse colique chez les souris UC chroniques, améliorer les symptômes de diarrhée et rectorragie, dont le mécanisme est lié à l'activation de la voie de signalisation IL-4/JAK1/STAT6 et à l'induction de la polarisation des macrophages M2 dans le tissu colique.
关键词
électroacupuncture;colite ulcéreuse;barrière muqueuse intestinale;macrophages M2;voie de signalisation interleukine-4/tyrosine kinase-1/facteur de transduction et d'activation de la transcription 6