Étude des mécanismes de l’électroacupuncture pour l’amélioration de la motricité colique chez la souris avec colite ulcéreuse basée sur les canaux ioniques cationiques activés par nucléotide cyclique

Li Sihui ,  

Huang Qianhui ,  

Huang Qin ,  

Wu Qiaofeng ,  

Yu Shuguang ,  

摘要

Objectif : observer le mécanisme par lequel l'électroacupuncture en "Shangjuxu" améliore les troubles moteurs coliques chez les souris atteintes de colite ulcéreuse (CU) via le canal cationique activé par nucléotide cyclique 2 (HCN2). Méthodes : des souris mâles C57BL/6J ont été réparties aléatoirement en groupe contrôle, groupe modèle et groupe électroacupuncture, chacun composé de 8 souris ; un modèle de CU a été établi par administration orale de sulfate de dextrane. Le groupe d’électroacupuncture a été traité au point "Shangjuxu" pendant 20 minutes par jour, pendant 7 jours consécutifs. Le taux de variation du poids des souris a été calculé et l'indice d'activité de la maladie (DAI) évalué ; des modifications histopathologiques du côlon ont été observées par coloration HE ; la motilité colique in vivo et ex vivo a été évaluée par électrophysiologie ; les temps de transit colique et le taux de propulsion intestinale ont été comparés ; l'expression de HCN2, 5-hydroxytryptamine (5-HT), tryptophane hydroxylase (TPH1) et transporteur de la 5-HT (SERT) dans le côlon a été détectée par immunofluorescence ; le mRNA et l'expression protéique de TPH1 et SERT ont été déterminés par PCR quantitative en temps réel et Western blot. Les souris Vil1MerCreMer ont été réparties en groupe vecteur et groupe induit, 8 souris par groupe. Le gène HCN2 a été spécifiquement conditionnellement supprimé dans l'épithélium intestinal. Le groupe induit a reçu une injection de tamoxifène à 5 mg/mL. Le dosage par ELISA a permis de mesurer la 5-HT et l’AMP cyclique (cAMP) dans le sérum des souris Vil1MerCreMerHCN2fl/fl. Les cellules RIN-14B ont été divisées en groupe normal et groupe transfecté, celui-ci ayant une expression diminuée de HCN2. L'ELISA a détecté la 5-HT et le cAMP dans le surnageant cellulaire. La PCR quantitative en temps réel a examiné l'expression du mRNA HCN2 et TPH1 dans les cellules RIN-14B. Résultats : comparé au groupe contrôle, le groupe modèle présentait un état général plus mauvais, un taux de variation du poids significativement augmenté et un DAI élevé (P<0,001), une désorganisation de la structure de la muqueuse colique avec œdème et infiltration inflammatoire évidents, et un score pathologique accru (P<0,001) ; la fréquence, l'amplitude et la surface sous la courbe des mouvements coliques in vivo et ex vivo étaient diminuées (P<0,001), le temps de transit colique retardé et le taux de propulsion intestinale réduit (P<0,001) ; l'expression de HCN2 dans le côlon était augmentée (P<0,001) et co-localisée avec la 5-HT ; l'expression de 5-HT, TPH1 et SERT dans le côlon était élevée (P<0,001). Le traitement par électroacupuncture a pu inverser ces effets (P<0,001, P<0,01, P<0,05). Après suppression conditionnelle de HCN2 dans l'épithélium intestinal, les niveaux de 5-HT et cAMP dans le sérum du groupe induit ont diminué (P<0,001). Après inhibition de l'expression de HCN2 dans les cellules RIN-14B, l'expression des mRNA HCN2 et TPH1 a diminué (P<0,001), de même que la concentration de 5-HT et cAMP dans le surnageant (P<0,001). Conclusion : L'électroacupuncture en "Shangjuxu" pourrait améliorer la motricité intestinale des souris atteintes de colite ulcéreuse en régulant l'expression de HCN2 dans les cellules chromaffines intestinales et en influençant la sécrétion de 5-HT.

关键词

électroacupuncture; colite ulcéreuse; motricité colique; cellules chromaffines intestinales; canal cationique activé par nucléotide cyclique 2; 5-hydroxytryptamine

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