Mécanisme par lequel l'acupuncture régule la voie de signalisation cAMP pour améliorer la déficience ovarienne induite par la privation de sommeil chez la souris

GAN Di ,  

LIU Li-ying ,  

HAO Jian-heng ,  

CHANG Bo-ya ,  

WANG Hai-jun ,  

YANG Jie ,  

摘要

L'objectif était d'explorer le mécanisme potentiel par lequel l'acupuncture améliore la déficience ovarienne induite par la privation de sommeil (SD) chez la souris en régulant la voie de signalisation de l'AMP cyclique (cAMP) basée sur la transcriptomique. Méthodes : les souris femelles C57BL/6 avec un cycle œstral régulier ont été réparties aléatoirement en groupe contrôle, groupe SD et groupe acupuncture, 15 souris par groupe. Le groupe contrôle a maintenu un rythme normal pendant 6 semaines ; les groupes SD et acupuncture ont été soumis à 20 heures de privation de sommeil quotidiennement de 16h00 à 12h00 le lendemain, pendant 6 semaines consécutives ; à partir de la 4e semaine, le groupe acupuncture a reçu un traitement par acupuncture aux points "Baihui", "Sanyinjiao", "Guanyuan" en dehors des périodes de SD, 20 minutes par séance, 6 jours par semaine, pendant 3 semaines consécutives. Les changements du cycle œstral ont été observés par frottis vaginal ; la masse corporelle, le poids humide des ovaires ont été mesurés et un indice ovarien calculé ; la morphologie des tissus ovariens a été examinée par coloration hématoxyline-éosine ; les niveaux sériques de folliculo-stimuline (FSH), lutéinisante (LH), hormone anti-müllérienne (AMH), estradiol (E2) et le contenu de cAMP dans les tissus ovariens ont été déterminés par ELISA ; la transcriptomique a été utilisée pour détecter les gènes différentiellement exprimés (DEG) dans les tissus ovariens des différents groupes et une analyse fonctionnelle a été effectuée ; l'expression des ARNm du récepteur de la FSH (FSHR), de la protéine liant l'élément effecteur de l’AMP cyclique (CREB1), de la sous-unité catalytique α de la protéine kinase A (PRKACA) et de l'adénylate cyclase 5 (ADCY5) dans les tissus ovariens a été évaluée par PCR quantitative en temps réel et par western blot. Résultats : après le traitement, par rapport au groupe contrôle, le groupe SD présentait un taux accru de désorganisation du cycle œstral (P < 0,01) ; une diminution de la masse corporelle, du poids humide des ovaires et de l'indice ovarien (P < 0,01) ; une altération de la morphologie ovarienne avec augmentation des follicules atrétiques ; une augmentation des niveaux sériques de FSH et LH (P < 0,01) et une diminution des niveaux d'AMH et E2 (P < 0,01). Par rapport au groupe SD, le groupe acupuncture montrait une diminution du taux de désorganisation du cycle œstral (P < 0,01) ; une augmentation de la masse corporelle, du poids humide ovarien et de l'indice ovarien (P < 0,01) ; une amélioration de la structure pathologique ovarienne et une diminution des follicules atrétiques ; une réduction des taux sériques de FSH et LH (P < 0,01) et une augmentation des taux d'AMH et E2 (P < 0,01). La transcriptomique a identifié 173 DEG avec une tendance de régulation inverse ; l'analyse fonctionnelle ontologique a montré que ces DEG étaient principalement impliqués dans des réponses à d'autres organismes et autres processus biologiques ; localisés principalement dans la région extracellulaire et associés à des fonctions moléculaires telles que l'activité de l'oligoadénylate synthase 2’-5’. L'analyse d'enrichissement génomique a indiqué que ces DEG participaient principalement à la voie de signalisation cAMP ; l'analyse d'enrichissement des ensembles de gènes a montré que la voie cAMP était inhibée dans le groupe SD et activée dans le groupe acupuncture. Par rapport au groupe contrôle, le contenu en cAMP ovarien, l'expression des ARNm de FSHR, CREB1, ADCY5, PRKACA, les niveaux protéines FSHR, ADCY5, PRKACA et le ratio d'expression phospho(p)-CREB1/CREB1 étaient significativement réduits dans le groupe SD (P < 0,01). Par rapport au groupe SD, le contenu cAMP ovarien, l'expression des ARNm de FSHR, CREB1, ADCY5, PRKACA, les niveaux protéiques de FSHR, ADCY5, PRKACA et le ratio p-CREB1/CREB1 étaient significativement augmentés dans le groupe acupuncture (P < 0,01, P < 0,05). Conclusion : l'acupuncture peut améliorer la déficience ovarienne induite par le SD chez la souris, probablement en régulant l'expression de molécules clés telles que CREB1, FSHR, ADCY5 et PRKACA dans la voie de signalisation cAMP.

关键词

Acupuncture; privation de sommeil; déficience ovarienne; transcriptomique; gènes différentiellement exprimés; voie de signalisation de l'AMP cyclique

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