Étude du mécanisme par lequel l'électroacupuncture améliore la douleur chez les rats atteints de radiculopathie cervicale via la régulation de la protéine Piezo1 sur la voie de signalisation NO/cGMP/PKG

Huang Wenjing ,  

Su Shengyong ,  

Wang Tian ,  

Su Hong ,  

Huang Xinyu ,  

Li Xin ,  

Zheng Guangmei ,  

Yin Lili ,  

Xu Zhiyi ,  

Huang Ying ,  

Wei Gangliang ,  

Li Xiaoming ,  

摘要

L'objectif est d'étudier l'effet régulateur de l'électroacupuncture sur la protéine Piezo1 chez les rats atteints de radiculopathie cervicale (CSR) et son impact sur la voie de signalisation oxyde nitrique (NO)/cyclic guanosine monophosphate (cGMP)/protéine kinase G (PKG), ainsi que d'explorer le mécanisme analgésique de l'électroacupuncture pour la CSR. Méthodes : des rats SD mâles ont été répartis au hasard en quatre groupes de 10 rats chacun : groupe chirurgie simulée, groupe modèle, groupe électroacupuncture et groupe électroacupuncture + Yoda1. Les modèles CSR ont été établis dans les groupes modèle, électroacupuncture et électroacupuncture + Yoda1 par insertion de fil dans le canal vertébral. Le groupe électroacupuncture a reçu un traitement par électroacupuncture bilatérale aux points "Hegu" et "Taichong" pendant 20 minutes par séance, une fois par jour pendant 7 jours consécutifs ; le groupe électroacupuncture + Yoda1 a reçu une injection intrapéritonéale de l'agoniste Piezo1 Yoda1 (1,5 mg/kg) avant le traitement par électroacupuncture. L'analyse a porté sur l'évaluation de la démarche, le seuil de retrait mécanique et la latence de retrait thermique chez les rats avant et après intervention ; l'observation des changements pathologiques dans le tissu de la moelle épinière par coloration HE ; la quantification de l'expression génique Piezo1 dans la moelle épinière par qPCR ; la détection immunofluorescente double de Piezo1 et calmoduline (CaM) dans la moelle épinière ; la mesure des protéines CaM, synthase neuronale de l'oxyde nitrique (nNOS), guanylate cyclase soluble (sGC) et PKG1 par Western blot ; le dosage du cGMP par ELISA ; la quantification du NO dans la moelle épinière par la méthode colorimétrique du nitrite. Résultats : comparé au groupe chirurgie simulée, le score de démarche des rats du groupe modèle était augmenté avant intervention (P<0,01), tandis que le seuil de retrait mécanique diminue et la latence du retrait thermique est raccourcie (P<0,01) ; l'expression de l'ARNm Piezo1, l’intensité et la co-localisation immunofluorescentes de Piezo1 et CaM, ainsi que les niveaux relatifs des protéines CaM, nNOS, sGC, PKG1, les contenus en cGMP et NO augmentaient significativement (P<0,01) dans le tissu de la moelle épinière du groupe modèle ; la coloration HE montrait des neurones rétractés, une coloration cellulaire plus foncée, une indistinction entre noyau et cytoplasme, une prolifération des cellules gliales, une densité cellulaire accrue, une dilatation et un saignement des microvaisseaux. Par rapport au groupe modèle, le groupe électroacupuncture présentait une diminution du score de démarche (P<0,01), une augmentation du seuil de retrait mécanique et une prolongation de la latence de retrait thermique (P<0,01) ; l'expression de l'ARNm Piezo1, l’intensité et la co-localisation immunofluorescentes de Piezo1 et CaM, les niveaux relatifs des protéines CaM, nNOS, sGC, PKG1, ainsi que les contenus en cGMP et NO diminuaient (P<0,01) dans la moelle épinière ; la coloration HE montrait quelques neurones rétractés, une réduction de la dilatation vasculaire et de la prolifération des cellules gliales par rapport au groupe modèle. Par rapport au groupe électroacupuncture, le groupe électroacupuncture + Yoda1 présentait une latence de retrait thermique raccourcie (P<0,01) ; l'expression de l'ARNm Piezo1, l’intensité et la co-localisation immunofluorescentes de Piezo1 et CaM, les niveaux relatifs des protéines CaM, nNOS, sGC, PKG1, ainsi que les contenus en cGMP et NO augmentaient (P<0,05, P<0,01) ; la coloration HE montrait des neurones rétractés, une augmentation du nombre de cellules gliales et une dilatation partielle des microvaisseaux avec saignement. Conclusion : l'électroacupuncture peut efficacement soulager la douleur des rats CSR, probablement en inhibant l’activation de la protéine Piezo1 dans la moelle épinière et en inhibant la voie de signalisation NO/cGMP/PKG, produisant ainsi un effet analgésique.

关键词

radiculopathie cervicale; électroacupuncture; analgésie; protéine Piezo1

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