L'objectif est de clarifier l'efficacité de la sécurité du thrombolyse hors fenêtre temporelle prolongée par acupuncture chez des modèles de rats souffrant d'un accident vasculaire cérébral ischémique, et de révéler le mécanisme par lequel l'acupuncture améliore la sécurité du thrombolyse en inhibant la voie de signalisation de la kinase d'interaction du récepteur 1 (RIPK1), de la kinase d'interaction du récepteur 3 (RIPK3) et de la protéine kinases-like mixte de substrat (MLKL) médiant la nécroptose programmée. Méthodes : 33 rats SD ont été sélectionnés au hasard comme groupe de fausse opération, 99 rats SD modélisés avec succès ont été répartis par méthode de table de nombres aléatoires en groupe modèle, groupe thrombolyse à 6 h, groupe acupuncture + thrombolyse à 6 h, 33 rats par groupe. Sauf le groupe de fausse opération, les autres groupes ont établi un modèle d'accident vasculaire cérébral ischémique par embolisation par caillot sanguin autologue. Le groupe thrombolyse à 6 h a reçu un traitement thrombolytique intraveineux par activateur tissulaire du plasminogène recombinant 6 h après la modélisation ; le groupe acupuncture + thrombolyse à 6 h a reçu une acupuncture simultanément au traitement thrombolytique aux points bilatéraux "Neiguan" et "Shuigou", avec une rétention d'aiguille pendant 20 minutes. Le score de Bederson a été utilisé pour évaluer les fonctions neurologiques des rats, la coloration au chlorure de triphényltétrazolium (2,3,5) a été utilisée pour observer le volume de l'infarctus cérébral, la perméabilité de la barrière hémato-encéphalique (BHE) a été détectée par la méthode du bleu Evans, la teneur en eau du cerveau a été mesurée par la méthode du volume spécifique, la concentration en hémoglobine dans les tissus cérébraux ischémiques a été déterminée par spectrophotométrie, l'expression des protéines RIPK1, RIPK3, et p-MLKL dans la zone de la pénombre ischémique a été détectée par Western blot, l'expression de l'ARNm de RIPK1, RIPK3, MLKL a été mesurée par PCR quantitative en temps réel, et la co-localisation de p-MLKL avec les cellules endothéliales a été détectée par immunofluorescence double. Résultats: Le débit sanguin des rats a fortement diminué après modélisation, et le score neurologique a augmenté 2 heures après modélisation (P<0.01). 24 heures après modélisation, par rapport au groupe de fausse opération, le groupe modèle a présenté une augmentation des scores neurologiques, du pourcentage du volume d'infarctus cérébral et de la perméabilité de la BHE (P<0.01) ; les niveaux d'expression des protéines RIPK1 dans la pénombre ischémique ont augmenté (P<0.05), ainsi que l'expression des ARNm RIPK1, RIPK3, MLKL (P<0.01, P<0.05) ; le pourcentage de cellules positives à la co-localisation de p-MLKL et des cellules endothéliales a augmenté (P<0.01). Par rapport au groupe modèle, le groupe thrombolyse à 6 h a montré une augmentation supplémentaire de la perméabilité de la BHE, de la teneur en eau cérébrale et de la concentration en hémoglobine cérébrale (P<0.01, P<0.05) ; les niveaux d'expression des protéines RIPK3 et p-MLKL ont augmenté dans la pénombre ischémique (P<0.05), ainsi que l'expression des ARNm RIPK3 et MLKL (P<0.05) ; le pourcentage de cellules positives à la co-localisation de p-MLKL et des cellules endothéliales a augmenté (P<0.01). Par rapport au groupe modèle, le groupe acupuncture + thrombolyse à 6 h a montré une diminution des scores neurologiques, du pourcentage du volume d'infarctus cérébral, de la perméabilité de la BHE et de la teneur en eau cérébrale (P<0.01, P<0.05) ; les niveaux d'expression protéique et d'ARNm de RIPK1 dans la pénombre ischémique ont diminué (P<0.05) ; le pourcentage de cellules positives à la co-localisation de p-MLKL et des cellules endothéliales a diminué (P<0.05). Par rapport au groupe thrombolyse à 6 h, le groupe acupuncture + thrombolyse à 6 h a montré une diminution des scores neurologiques, du pourcentage du volume d'infarctus, de la perméabilité de la BHE, de la teneur en eau cérébrale et de la concentration en hémoglobine cérébrale (P<0.01) ; les niveaux d'expression protéique de RIPK1, RIPK3 et p-MLKL ont diminué (P<0.05, P<0.01), l'expression des ARNm RIPK1, RIPK3 et MLKL a diminué (P<0.01, P<0.05) ; le pourcentage de cellules positives à la co-localisation de p-MLKL et des cellules endothéliales a diminué (P<0.01). Conclusion: L'intervention en acupuncture en temps opportun peut améliorer la fonction neurologique des rats après thrombolyse pour un accident vasculaire cérébral ischémique, réduire le volume de l'infarctus cérébral, diminuer la perméabilité de la BHE, réduire l'incidence des complications du thrombolyse et ainsi améliorer la sécurité du thrombolyse. Ce mécanisme pourrait être lié à l'inhibition par l'acupuncture de la nécroptose programmée des cellules endothéliales médiée par la voie de signalisation RIPK1/RIPK3/MLKL.

Acupuncture; accident vasculaire cérébral ischémique; nécroptose programmée; sécurité du thrombolyse