L'objectif est d'observer l'effet de la méthode d'acupuncture "Réveil du cerveau et ouverture des orifices" sur la voie de signalisation de l'échangeur de nucléotides guanine 1 (Epac1)/protéine Rap1 dans la zone de pénombre ischémique (IP) du cortex cérébral de rats soumis à une occlusion/reperfusion de l'artère cérébrale moyenne (MCAO/R), et d'explorer le mécanisme moléculaire par lequel cette méthode, par la réparation de la barrière hémato-encéphalique (BBB), atténue les lésions induites par l'ischémie cérébrale-reperfusion (CIRI). 84 rats mâles SD ont été répartis aléatoirement en quatre groupes : chirurgie simulée, modèle, acupuncture, acupuncture + ESI-09 (inhibiteur d'Epac1), avec 21 rats par groupe. À l'exception du groupe chirurgie simulée, les autres groupes ont été soumis à un modèle MCAO/R modifié à droite par la technique Longa de filament. Le groupe acupuncture a reçu la méthode "Réveil du cerveau et ouverture des orifices" aux points "Shuigou" et "Neiguan" bilatéraux, tandis que le groupe acupuncture + ESI-09 a reçu une injection intrapéritonéale d'ESI-09 (10 mg/kg) après reperfusion et la même acupuncture. Le flux cérébral a été surveillé par imagerie laser en speckle à flux sanguin (avant ischémie, 2h d'ischémie, 2h après reperfusion); la fonction neurologique a été évaluée par le score modifié de Bederson (24h après reperfusion); le volume d'infarctus cérébral a été mesuré par coloration TTC; l'eau cérébrale droite a été quantifiée par la méthode poids humide/sec; la perméabilité BBB du cortex droit a été évaluée par coloration Evans Blue (EB); l'expression des protéines et ARNm d'Epac1 et Rap1 dans la zone IP du cortex droit a été détectée par Western blot et PCR quantitatif en temps réel; la co-localisation en immunofluorescence de F-actine et de la molécule d'adhésion endothéliale plaquettaire (CD31, marqueur endothélial) a été analysée dans la zone IP; la structure ultrastructurale de la BBB a été observée par microscopie électronique à transmission. Les résultats ont montré que, sauf dans le groupe chirurgie simulée, le flux sanguin cérébral est tombé en dessous de 70% du niveau de base après ischémie, puis est revenu au-dessus de 70% 2h après reperfusion, validant le modèle. À 24h post-reperfusion, comparativement au groupe chirurgie simulée, le groupe modèle présentait une augmentation des scores neurologiques, du pourcentage du volume d'infarctus, du contenu en eau cérébrale et du contenu en EB (P<0,01), une diminution de l’expression des protéines et ARNm Epac1, Rap1 dans la zone IP (P<0,05, P<0,01), une augmentation de la co-localisation F-actine/CD31 (P<0,01), une membrane basale de la BBB floue et discontinue, et une dissolutio partielle voire absente des jonctions serrées (TJ). Comparé au groupe modèle, le groupe acupuncture a montré une amélioration des marqueurs de lésions (P<0,01), une augmentation de l’expression protéines et ARNm Epac1, Rap1 (P<0,01), une diminution de la co-localisation F-actine/CD31 (P<0,01), une membrane basale continue et une structure TJ dense. Par rapport au groupe acupuncture, le groupe acupuncture + ESI-09 présentait une régression des marqueurs de lésions (P<0,01), une diminution des niveaux protéines et ARNm Epac1, Rap1 (P<0,01), une augmentation de la co-localisation F-actine/CD31 (P<0,01), une membrane basale toujours floue et une dissolution des zones TJ. Conclusion : la méthode d’acupuncture "Réveil du cerveau et ouverture des orifices" régule la voie Epac1/Rap1 dans la zone IP du cortex cérébral, induit le remodelage du cytosquelette endothélial et atténue les lésions de la BBB après CIRI.

Acupuncture; voie de signalisation Epac1/Rap1; barrière hémato-encéphalique; lésion cérébrale ischémique-reperfusion; remodelage du cytosquelette endothélial