Étude du mécanisme de régulation des lésions oxydatives du cartilage dans l'arthrose du genou chez le lapin par acupuncture via la voie de signalisation Sirt1/Nrf2/NQO1

Wang Min ,  

Zhang Zhaoqing ,  

Cao Yuwei ,  

Li Kai ,  

Zhang Zhe ,  

An Kang ,  

Luo Xiaojuan ,  

摘要

L'objectif de cette étude est d'observer l'effet de l'acupuncture à l'aiguille sur la voie de signalisation du facteur de régulation silencieux du stress oxydatif du cartilage du genou chez le lapin atteint d'arthrose du genou (KOA), à savoir Sirt1 / facteur nucléaire E2 associé à Nrf2 / NADPH quinone oxydoréductase-1 (NQO1), et d'explorer le mécanisme par lequel elle améliore les lésions du cartilage. Méthodes : 24 lapins mâles de Nouvelle-Zélande ont été répartis de manière aléatoire en quatre groupes : groupe normal, groupe modèle, groupe acupuncture à l'aiguille et groupe acupuncture à l'aiguille + inhibiteur, avec 6 lapins par groupe. Sauf pour le groupe normal, un modèle KOA a été établi selon la méthode modifiée de Videman. Le groupe acupuncture à l'aiguille a subi un relâchement par acupuncture des ligaments collatéraux médial et latéral de la patte inférieure gauche, des bandes de soutien médiales et latérales de la rotule, du ligament rotulien et des nœuds du faisceau de tissus, une fois par semaine pendant 4 semaines ; le groupe acupuncture à l'aiguille + inhibiteur a reçu une injection intrapéritonéale de l'inhibiteur de Sirt1 EX-527 30 minutes avant chaque intervention, une fois par semaine, pendant 4 semaines. L'indice de dysfonctionnement de Lequesne (Lequesne MG) et la mesure de l'amplitude passive des mouvements articulaires (PROM) ont été effectués avant le traitement et une semaine après la dernière intervention ; une semaine après la dernière intervention, des tissus cartilagineux ont été prélevés pour des observations histopathologiques par coloration à l'hématoxyline-éosine (HE) et au Safranin O (SO) ; les concentrations d'interleukine-1β (IL-1β) et de facteur de nécrose tumorale-α (TNF-α) dans le liquide synovial ont été détectées par ELISA ; l'activité de la superoxyde dismutase (SOD) dans les tissus cartilagineux a été mesurée par méthode colorimétrique, ainsi que l'activité de la glutathion peroxydase (GSH-Px) par coloration enzymatique combinée à l'acide dithionitrobenzoïque, la capacité antioxydante totale (T-AOC) par kit de détection, et le contenu de malondialdéhyde (MDA) par méthode à l'acide thiobarbiturique ; le niveau de stress oxydatif réactif (ROS) a été détecté par immunofluorescence ; l'expression des protéines Sirt1, Nrf2, NQO1, ADAMTS-5 et MMP-3 a été mesurée par Western blot ; l'expression des ARNm Sirt1, Nrf2, NQO1 dans le cartilage a été déterminée par PCR quantitative en temps réel. Résultats : par rapport au groupe normal, le groupe modèle a montré une augmentation du score Lequesne MG du genou gauche, des concentrations d'IL-1β, TNF-α dans le liquide synovial, du contenu en MDA dans le cartilage, des niveaux d'expression de ROS et des niveaux protéiques de ADAMTS-5 et MMP-3 (P<0,01) ainsi qu'une augmentation de l'expression protéique et ARN messager de Nrf2 (P<0,05, P<0,01) ; PROM, activité des enzymes SOD, GSH-Px, T-AOC et expression protéique et ARN messager de Sirt1 ont diminué (P<0,01). Comparé au groupe modèle, le groupe acupuncture a montré une diminution des scores Lequesne MG, des concentrations d'IL-1β et TNF-α dans le liquide synovial, du contenu en MDA et des niveaux d'expression de ROS dans le cartilage, des niveaux protéiques de ADAMTS-5 et MMP-3 (P<0,01), ainsi qu'une augmentation de PROM, des activités SOD, GSH-Px, T-AOC, et des expressions protéique et ARN messager de Sirt1, Nrf2, NQO1 (P<0,01). Dans le groupe acupuncture + inhibiteur, le score Lequesne MG, la concentration de TNF-α dans le liquide synovial, le contenu en MDA et les niveaux d'expression de ROS ont diminué (P<0,01, P<0,05) tandis que les niveaux d'ARN messager de Sirt1, Nrf2, NQO1 ont augmenté (P<0,01). Par rapport au groupe acupuncture, le groupe acupuncture + inhibiteur montrait une augmentation des scores Lequesne MG, des concentrations d'IL-1β et TNF-α, du contenu en MDA, des niveaux d'expression de ROS, des niveaux protéiques de MMP-3 et ADAMTS-5 (P<0,01, P<0,05), ainsi qu'une diminution de PROM, des activités SOD, GSH-Px, T-AOC et des expressions protéique et ARN messager de Sirt1, Nrf2, NQO1 (P<0,01, P<0,05). Les résultats des colorations HE et SO ont montré un amincissement de la surface du cartilage de l'articulation du genou, une diminution du nombre de cellules cartilagineuses, un désordre de l'arrangement et une perte de protéoglycanes dans le groupe modèle ; dans le groupe acupuncture, l'augmentation du nombre de cellules cartilagineuses, leur arrangement régulier, et l'augmentation des protéoglycanes étaient observées par rapport au groupe modèle ; le groupe acupuncture + inhibiteur montrait une aggravation des lésions de la surface de cartilage par rapport au groupe acupuncture. Conclusion : L'acupuncture à l'aiguille peut améliorer la fonction articulaire et les lésions pathologiques du cartilage chez des lapins KOA, probablement via l'activation de la voie de signalisation Sirt1/Nrf2/NQO1 contribuant à la réduction du stress oxydatif et de la réponse inflammatoire.

关键词

Acupuncture à l'aiguille; Arthrose du genou; Fonction articulaire du genou; Voie de signalisation Sirt1/Nrf2/NQO1; Stress oxydatif; Lésion du cartilage

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