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熱補針法による寒湿証類風邪関節炎家ウサギDrp1/Mff経路活性及びミトコンドリア質量への影響
JING Wei-yao
,
XU Cong-hui
,
LIU Cui
,
LIU Li-mei²
,
YUAN Bo²
,
ZHANG Xing-hua³
,
ZHANG Feng-fan⁴
,
CHEN Ping⁴
,
DU Xiao-zheng
,
DOI:
10.13702/j.1000-0607.20240689
摘要
目的は、熱補針法が寒湿証類風邪関節炎(RA)家ウサギ“足三里”の治療効果及び膝関節滑膜組織中のミトコンドリア質量と動力蛋白関連蛋白1(Drp1)/ミトコンドリア分裂因子(Mff)経路への影響を調査することである。方法として、24匹のニュージーランドホワイトウサギを無作為に空白組、モデル組、熱補針法組、抑制剤組に割り当て、各組6匹ずつを使用し、卵アレルギー完全フロイスアジュバント混合液を人工気候箱で凍え湿ッ媚RA家ウサギモデルを複製する。熱補針法組には家ウサギ双方の“足三里”を熱補針法で治療し、1日1回、14日間。抑制剤組には家ウサギ腹腔内へミトコンドリア分裂抑制剤Mdivi-1(2.5 mg/kg)を投与し、2日ごとに1回、計7回。空白組とモデル組では同じつかみと固定を行い、他の干渉は行わない。モデル後及び干渉後に家ウサギの膝関節関節炎評価スコア、痛覚閾値及び関節周径を評価する。HE染色を用いて膝関節滑膜組織の病理学的変化を観察し、透過電顕を用いて滑膜細胞のミトコンドリア超微構造を観察し、免疫蛍光染色法を用いて滑膜組織のミトコンドリア活性酸素(mtROS)発現を検出し、蛍光素酵素法を用いて滑膜組織のATP含量を検出し、免疫蛍光染色法を用いて滑膜組織のDrp1とMffの共定位レベルを観察し、Western blot法により滑膜組織のリン酸化(p)-Drp1 s616/Drp1、Mffたん白発現を検出する。結果として、空白組と比較し、モデル組の家ウサギの関節炎評価スコア、膝関節周径、膝関節滑膜組織中のmtROS発現、p-Drp1 s616/Drp1比率及びMffたん白発現、Drp1とMffの共定位レベルが上昇した(
P
<0.01)、痛覚閾値及び膝関節滑膜組織のATP含量が顕著に低下した(
P
<0.01)。モデル組と比較して、熱補針法組と抑制剤組の家ウサギの関節炎評価スコア、膝関節周径、滑膜組織中のmtROS発現、p-Drp1 s616/Drp1比率及びMffたん白発現、Drp1とMffの共定位レベルが顕著に低下した(
P
<0.01)、痛覚閾値、滑膜組織のATP含量が顕著に上昇した(
P
<0.01)。モデル組の滑膜組織の滑膜細胞増殖が顕著であり、滑膜内に炎症細胞の浸潤及び増殖した滑膜基質、滑膜細胞中のミトコンドリア嵴が不明瞭で、ミトコンドリアが腫脹破裂し、ミトコンドリア形成が小体に分裂していることが見られる。熱補針法組と抑制剤組の滑膜組織では上述の変化が軽減している。結論として、熱補針法は寒湿証類風邪関節炎家ウサギの症状を著しく改善し、滑膜細胞ミトコンドリア質量を向上させることができ、可能性としてDrp1/Mff経路活性の抑制と関連している。
关键词
風邪関節炎;熱補針法;ミトコンドリア質量;Drp1/Mff経路
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