KEAP1/PGAM5/AIFM1経路に基づく鍼灸が卵巣血管新生を促進しラットの卵巣機能を改善する作用機序の検討

XU Kai-kai ,  

ZHANG Han ,  

MA Jing ,  

CHU Meng-yuan ,  

YANG Jia-qi ,  

HAN Yun-fei ,  

ZHOU Qian-yi ,  

GAO Yan-hua ,  

YAN Ying ,  

摘要

目的は、鍼灸の「関元」と「三陰交」が酸素依存性細胞死Kelch様環状エポキシド付加タンパク質1(KEAP1)/ホスホグリセリン酸変位酵素5(PGAM5)/ミトコンドリアアポトーシス誘導因子1(AIFM1)経路を調節することで、卵巣予備能低下(DOR)ラットの卵巣血管新生に及ぼす影響を観察し、鍼治療のDOR改善における可能な作用機序を検討することである。方法:雌性SDラットを無処置群、モデル群、鍼灸群に無作為に分け、各群6匹ずつとした。腹腔内にシクロホスファミドを注射してDORモデルを作製した。鍼灸群は「関元」「三陰交」に鍼を刺し、20分間留鍼し、1日おきに計15回介入した。膣脱落細胞塗抹でラットの発情周期を観察した。小動物超音波装置を用いて卵巣面積、卵巣動脈の拡張末期血流速度(EDV)、収縮期ピーク血流速度(PSV)、パルス指数(PI)、抵抗指数(RI)を評価し、PSV/EDV(S/D)を算出した。ELISA法で血清中の卵胞刺激ホルモン(FSH)、黄体形成ホルモン(LH)、エストラジオール(E2)、抗ミュラー管ホルモン(AMH)量を測定した。HE染色で卵巣組織形態および卵胞成長を観察し、フローサイトメトリーで卵巣組織の活性酸素(ROS)レベルを検出した。免疫蛍光染色法で、血管内皮増殖因子(VEGF)、血小板内皮細胞接着分子1(CD31)、および酸素依存性細胞死経路KEAP1/PGAM5/AIFM1の陽性発現を評価した。結果:無処置群と比較して、モデル群は発情周期の乱れ、血清中FSHおよびLHの増加(p<0.05)、E2およびAMHの減少(p<0.05)、卵巣面積の縮小(p<0.05)、卵巣動脈のPI、RI、S/Dの増加(p<0.05)、卵巣構造の乱れ、血管分布の減少、原始、二次および成熟卵胞の数の減少(p<0.05)、卵巣組織のVEGFおよびCD31陽性発現の低下(p<0.05)、ROSレベルの上昇(p<0.05)、KEAP1、PGAM5、AIFM1陽性発現の増加(p<0.05)を示した。モデル群と比較して、鍼灸群は発情周期の改善、血清中FSHおよびLHの減少(p<0.05)、E2およびAMHの増加(p<0.05)、卵巣面積の増加(p<0.05)、卵巣動脈のPI、RI、S/Dの減少(p<0.05)、卵巣組織構造の改善、血管分布の増加、原始および二次卵胞数の増加(p<0.05)、卵巣組織VEGFおよびCD31陽性発現の増加(p<0.05)、ROSレベルの低下(p<0.05)、KEAP1、PGAM5、AIFM1陽性発現の減少(p<0.05)を示した。結論:「関元」「三陰交」への鍼灸はDORラットの卵巣予備能を改善し、その機序は卵巣組織におけるKEAP1/PGAM5/AIFM1経路の抑制、卵巣血管新生の促進、最終的に卵巣血流灌流の改善に関与する可能性がある。

关键词

鍼灸;卵巣予備能低下;血管新生;KEAP1/PGAM5/AIFM1経路

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