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電気鍼がPI3K/Akt/mTOR経路を調節し膝関節骨関節炎ラットの膝関節滑膜組織オートファジーに与える影響
ZHOU Xin-hua
,
YANG Qi-qi
,
LI Wei-ran
,
WANG Ke-po
,
Qiu Shuai-hui
,
LI Chun-ning
,
LI Fei
,
DOI:
10.13702/j.1000-0607.20241225
摘要
目的は、電気鍼刺激がホスファチジルイノシトール3-キナーゼ(PI3K)/プロテインキナーゼB(Akt)/哺乳類ラパマイシン標的タンパク質(mTOR)シグナル伝達経路を調節し、膝関節骨関節炎(KOA)ラットの膝関節滑膜組織におけるオートファジーに及ぼす影響を探ることである。方法は、雄性SDラット36匹を選択し、正常群、モデル群、電気鍼群に無作為に分け、各群12匹とした。ヨード酢酸ナトリウム法によりKOAモデルを作製した。モデル作製成功後、電気鍼群は患側の“犢鼻”および“足三里”の穴位を用い、1回20分、1日1回、連続3週間電気鍼を施行した。Lequesne MG行動スケールによりラットの膝関節機能を評価し、HE染色法で滑膜組織の病理形態を観察し、透過型電子顕微鏡で滑膜のオートファゴソームおよびオートファゴリソソームの超微細構造を観察した。ELISA法で滑膜組織中のオートファジー関連タンパク質5(Atg5)およびオートファジー関連タンパク質12(Atg12)の含有量を測定し、リアルタイム蛍光定量PCR法で滑膜組織のPI3K、Akt、mTOR mRNA発現レベルを測定し、西方ブロット法で滑膜組織のPI3K、Akt、mTOR、UNC-51様キナーゼ1(ULK1)、Beclin-1、微小管関連タンパク質軽鎖3(LC3)のタンパク質相対発現レベルを測定した。結果は、正常群と比較してモデル群のラットの膝関節Lequesne MGスコアは上昇し(P<0.01)、滑膜組織ではコラーゲン増生、炎症細胞浸潤、オートファゴソームおよびオートファゴリソソームの増加が認められ、滑膜組織中のAtg5、Atg12含量、ULK1、Beclin-1タンパク質相対発現量およびLC3Ⅱ/LC3Ⅰ比は上昇し(P<0.01)、PI3K、Akt、mTORのmRNAおよびタンパク質発現は低下した(P<0.01)。モデル群と比較して電気鍼群のラットは膝関節Lequesne MGスコアが低下し(P<0.01)、滑膜組織のコラーゲン増生が軽減し、炎症細胞浸潤が減少し、オートファゴソームおよびオートファゴリソソームの数が減少し、滑膜組織中のAtg5、Atg12含量、ULK1、Beclin-1タンパク質相対発現量およびLC3Ⅱ/LC3Ⅰ比が減少し(P<0.01)、PI3K、Akt、mTORのmRNAおよびタンパク質発現が上昇した(P<0.05、P<0.01)。結論として、電気鍼の“犢鼻”および“足三里”の刺激は滑膜組織のオートファジーを抑制し、KOAラットの膝関節機能および滑膜組織形態構造を改善し、その機序はPI3K/Akt/mTORシグナル経路の活性化に関連している可能性がある。
关键词
膝関節骨関節炎;電気鍼;オートファジー;ホスファチジルイノシトール3-キナーゼ(PI3K)/プロテインキナーゼB(Akt)/哺乳類ラパマイシン標的タンパク質(mTOR)シグナル経路;滑膜
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