艾灸はミトコンドリア未折り畳みタンパク質応答を活性化してマウスの卵巣老化を遅延させる

FAN Yan-liang ,  

LI Hong-xiao ,  

SHEN Mei-hong ,  

LU Ge ,  

摘要

目的は自然老化マウスの卵巣機能低下を遅延させる可能性のあるメカニズムを探ることである。動情周期が規則的な2ヶ月齢のSPF級ICR雌マウス15匹を2ヶ月齢群に、10ヶ月齢のSPF級ICR雌マウス30匹を無作為に10ヶ月齢群と艾灸群に分け、それぞれ15匹ずつとした。艾灸群には隔日に左右の「腎兪」「中脘」「関元」に交互に灸を施し、1回10分、連続21日間行った。膣スメアにより動情周期の変化を観察し、ELISA法で血清中のエストラジオール(E2)、卵胞刺激ホルモン(FSH)、抗ミュラー管ホルモン(AMH)含量を測定した。HE染色法で卵巣組織構造を観察し、蛍光酵素法、JC-1染色法で顆粒細胞のアデノシン三リン酸(ATP)含量、ミトコンドリア膜電位(MMP)レベルを検出した。リアルタイム蛍光定量PCR法、ウエスタンブロット法及び免疫組織化学法で卵巣組織中のミトコンドリア未折り畳みタンパク質応答(UPRmt)関連シグナル経路[活性化転写因子5(ATF5)、カゼイン分解酵素P(ClpP)、ロンプロテアーゼ1(LONP1)]のmRNA及びタンパク質発現レベルを検出した。2ヶ月齢群と比較して、10ヶ月齢マウスは動情周期異常率が増加(P<0.01)、血清FSH含量の上昇(P<0.01)、E2及びAMH含量の低下(P<0.01)、各段階の卵胞数が著明に減少(P<0.01)、顆粒細胞のATP含量及びMMPレベルの低下(P<0.01)、卵巣組織中のATF5、ClpP、LONP1のタンパク質・mRNA及び陽性発現が低下(P<0.01)した。10ヶ月齢群と比較して、艾灸群は動情周期異常率の低下(P<0.01)、血清FSH含量の減少(P<0.01)、E2及びAMH含量の上昇(P<0.01)、原始卵胞、発育卵胞及び胞状卵胞数の著明な増加(P<0.05、P<0.01)、顆粒細胞のATP含量及びMMPレベルの上昇(P<0.01)、卵巣組織中のATF5、ClpP、LONP1のタンパク質・mRNA及び陽性発現レベルの上昇(P<0.01、P<0.05)を示した。結論:艾灸は自然老化マウスの卵巣機能低下を遅延させ、ホルモンレベルを調節し、その作用機序はUPRmt関連シグナル分子ATF5、ClpP、LONP1の発現調節及び顆粒細胞のミトコンドリア機能改善に関係している可能性がある。

关键词

卵巣老化;ミトコンドリア機能;艾灸;ミトコンドリア未折り畳みタンパク質応答;活性化転写因子5

阅读全文