本研究は、“温陽通脈”灸法が動脈硬化症（AS）マウスのホスファチジルイノシトール3キナーゼ（PI3K）/プロテインキナーゼB（Akt）/哺乳類ラパマイシン標的タンパク質（mTOR）シグナル経路および内皮機能関連因子に与える影響を検討し、“温陽通脈”灸法がPI3K/Akt/mTORシグナル経路を抑制することによりASを予防・治療する可能性のある機序を探った。方法として、30匹の雄性ApoE^-/-マウスをモデル群、灸法群、灸法＋アゴニスト群に無作為に分け、各群10匹ずつ高脂肪飼料を12週間与えてASモデルを確立した。10匹のC57BL/6J雄性マウスを対照群とし、通常飼料を12週間与えた。各群は造モデルの1日目から介入を開始し、対照群とモデル群は単に捕まえて固定したのみ、灸法群は“壇中”“神闕”および両側の“内関”“血海”に対してそれぞれ30分間灸法介入を行った。灸法＋アゴニスト群は灸法開始30分前に腹腔内注射で740Y-P（5 μmol・kg^-1・日^-1）を投与した。各群は週5日、12週間連続介入を実施した。マウスの一般状態および体重を観察し、生化学的解析で血清中のトリグリセリド（TG）、総コレステロール（TC）、低密度リポタンパクコレステロール（LDL-C）、高密度リポタンパクコレステロール（HDL-C）含量を測定した。HE染色法により胸部大動脈の病理形態を観察し、ELISA法で血清中の一酸化窒素（NO）およびエンドセリン-1（ET-1）含量を検出し、フローサイトメトリーで大動脈の活性酸素種（ROS）含量を測定した。qPCRおよびWestern blot法で大動脈組織中のPI3K、Akt、mTOR、内皮型一酸化窒素合成酵素（eNOS）mRNAおよびタンパク質発現を検出した。結果は対照群と比較してモデル群のマウスは8週および12週で体重、血清中のTC、TG、LDL-C含量が有意に増加（P<0.05、P<0.01）、血清中のHDL-C、NO含量が有意に減少（P<0.01）した。大動脈弓の内膜は不整で肥厚し、「プラーク」の増生があった。血清中のET-1含量、大動脈中のROS含量、mTOR mRNA発現、p-PI3K/PI3Kおよびp-mTOR/mTORタンパク質発現比率は有意に上昇（P<0.01）、大動脈中のeNOS mRNA発現、eNOSタンパク質発現量およびp-Akt/Akt比率は有意に低下した（P<0.01、P<0.05）。モデル群と比較して灸法群のマウスは大動脈弓に内膜細胞の剥離が時折みられたが明らかな病理的変化はなく、HDL-Cを除く他の指標はすべて逆転した（P<0.01、P<0.05）。灸法群と比較して灸法＋アゴニスト群のマウスは血清中のTC、TG、LDL-C含量が有意に増加（P<0.01、P<0.05）、大動脈弓に少量または極少量の「プラーク」増生があり、内膜に内皮細胞の剥離が時折みられた。血清中のNO含量が減少（P<0.05）、血清中のET-1含量、大動脈中のROS含量、大動脈中のp-PI3K/PI3Kおよびp-mTOR/mTORタンパク質発現比率が有意に増加（P<0.01、P<0.05）、大動脈中のeNOS mRNA発現、eNOSタンパク質発現量およびp-Akt/Akt比率が有意に減少した（P<0.01、P<0.05）。結論として、“温陽通脈”灸法はApoE^-/- ASマウスの体重を減少させ、脂質異常を改善し、大動脈内皮損傷を修復し、ASの症状を軽減し、その機序は大動脈のPI3K/Akt/mTORシグナル経路を調節し、酸化ストレス反応に影響を与えて内皮機能を保護することと関連していると考えられる。

“温陽通脈”灸法; 動脈硬化; ホスファチジルイノシトール3-キナーゼ/プロテインキナーゼB/哺乳類ラパマイシン標的タンパク質シグナル経路; 活性酸素; 内皮機能; 酸化ストレス