経穴注射がアレルギー性鼻炎嗅覚障害ラットの嗅覚機能および嗅粘膜細胞アポトーシスに与える影響

SHI Jia-hui ,  

LIANG Xin ,  

LU Xiao-xiao ,  

HOU Xun-rui ,  

DAI Fang-ying ,  

LUO Xiao-ting ,  

LI Li-hong ,  

摘要

目的は、アレルギー性鼻炎(AR)嗅覚障害ラットにおける経穴注射が嗅覚機能、嗅粘膜組織形態、嗅粘膜細胞アポトーシスおよびアポトーシス関連タンパク質発現に与える影響を観察し、経穴注射治療の効果とメカニズムを検討することである。方法:SDラット9匹を正常群として無作為に選出し、残りは卵白アルブミン感作法でAR嗅覚障害モデルを作製した。モデル成功後、モデル群、非経穴注射群、および経穴注射群に無作為に分け、各群9匹とした。経穴注射群は、左右の「迎香」穴にデキサメタゾンとリドカインの混合液を各0.05 mLずつ3日ごとに4回注射した。非経穴注射群は左右の「後海」と「環跳」を結ぶ中点に同一薬剤、頻度、療程で注射した。各群のラットの鼻部症状を観察し、スコアリングを行い、食物埋没ボール実験(BFPT)で嗅覚機能を評価した。HE染色および透過型電子顕微鏡で嗅粘膜組織の形態および超微細構造を観察し、ELISA法で血清中のインターロイキン(IL)-4、IL-5、IL-13、IL-17含有量を測定し、免疫蛍光法で嗅粘膜嗅覚マーカープロテイン(OMP)発現を検出した。TUNEL法で嗅粘膜細胞のアポトーシス状況を測定し、Western blot法で嗅粘膜システインアスパラギン酸プロテアーゼ-3(Caspase-3)、B細胞リンパ腫-2関連遺伝子Xタンパク質(Bax)、B細胞リンパ腫-2遺伝子タンパク質(Bcl-2)の発現を検出した。結果:モデル群のラットは嗅粘膜上皮の剥離が著しく、有棘層細胞の変性・壊死および炎症性浸潤を伴った。ミトコンドリア外膜は不明瞭で断裂し、クリスタ構造は溶解消失した。経穴注射群ではモデル群に比べ嗅粘膜の形態構造が明らかに改善し、ミトコンドリア外膜は完全で、内膜には明瞭なクリスタ構造を認めた。正常群と比較すると、モデル群は鼻部症状スコア、食物玉探索時間、嗅粘膜細胞アポトーシス率、血清IL-4、IL-5、IL-13、IL-17含量、嗅粘膜Caspase-3およびBaxタンパク発現が上昇(P<0.01)し、嗅粘膜OMPおよびBcl-2タンパク発現は低下(P<0.01)した。モデル群と比べ、非経穴注射群および経穴注射群ではこれら指標が逆転(P<0.05、P<0.01)し、特に経穴注射群で有意な変化が見られた(P<0.01)。結論:経穴注射はAR嗅覚障害ラットの嗅覚機能および嗅粘膜損傷を著明に改善し、そのメカニズムは炎症反応による嗅粘膜損傷の抑制および嗅粘膜細胞アポトーシスの調節に関連すると考えられる。

关键词

経穴注射;アレルギー性鼻炎;嗅覚障害;細胞アポトーシス;アポトーシス関連タンパク質

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