インテグリン/YAP/JNK経路に基づく隔薬餅灸とアトルバスタチン併用によるApoE⁻/⁻動脈硬化マウスの治療機序の検討

LI Hong-ying ,  

LUO Hong-yan ,  

ZHU Min ,  

XUE Kai-yang ,  

LU Xiao-xiao ,  

CUI Jin ,  

摘要

目的は、隔薬餅灸とアトルバスタチンの併用が、ApoE⁻/⁻動脈硬化(AS)マウスの血脂代謝、大動脈の病理構造、プラーク沈着およびインテグリン(integrin)/Yes関連タンパク質(YAP)/c-Jun N末端キナーゼ(JNK)シグナル経路に与える影響を観察し、そのAS予防治療作用機序を探ることである。方法は、雄性C57BL/6Jマウスをコントロール群とし、雄性ApoE⁻/⁻マウスをモデル群、西洋薬群、隔薬餅灸群および併用治療群に無作為に分け、各9匹ずつ。高脂肪飼料でASモデルを再現。隔薬餅灸群には「丹中」と「神闕」に隔日1回、週3回の隔薬餅灸を施行;西洋薬群にはアトルバスタチンカルシウム3 mg·kg⁻¹·日⁻¹を1日1回投与;併用群は西洋薬群と隔薬餅灸群の介入を併用。各群に8週間連続投与。治療前後に体重測定、大動脈のHE染色病理形態観察、オイルレッドO染色による大動脈脂質プラーク面積測定、血清中トリグリセリド(TG)、総コレステロール(TC)、低密度リポ蛋白コレステロール(LDL-C)、高密度リポ蛋白コレステロール(HDL-C)含量測定、ELISAによる血管内皮細胞増殖因子(VEGF)、エンドセリン-1(ET-1)、インターロイキン(IL)-6、IL-8および腫瘍壊死因子-α(TNF-α)測定、比色法での一酸化窒素(NO)含量測定、西洋ブロット法による大動脈integrin αVβ3、YAP、リン酸化(p)-YAP、p-JNK1/2、細胞間接着分子-1(ICAM-1)、血管細胞間接着分子-1(VCAM-1)蛋白発現測定を実施。結果、モデル群は対照群に比べ体重増加(P<0.01)、大動脈内膜肥厚、泡沫細胞および脂質堆積、平滑筋細胞増殖および浮腫、弾性繊維の減少、内皮細胞隙間拡大、弾性膜断裂、大動脈脂質プラーク面積の有意な増加(P<0.01)、血清中TC、TG、LDL-C、IL-6、IL-8、TNF-α、ET-1、VEGF含有量上昇(P<0.01)、HDL-CおよびNOの減少(P<0.01)、大動脈integrin αVβ3、YAP、p-JNK1/2、ICAM-1、VCAM-1蛋白発現の増加(P<0.01)、p-YAP蛋白発現の減少(P<0.01)を示した。西洋薬群、隔薬餅灸群および併用治療群はモデル群に比べ体重減少(P<0.01)、体重変化幅減少(P<0.01)、大動脈管腔構造整い、内膜薄化、泡沫細胞および脂質沈着減少、平滑筋細胞浮腫・肥大および炎症反応軽減、その他各指標も有意に改善(P<0.01、P<0.05)した。併用群は西洋薬群および隔薬餅灸群に比べ体重減少幅が更に大きく(P<0.05、P<0.01)、血清TC、TG、IL-6、IL-8、TNF-αおよび大動脈integrin αVβ3、YAP蛋白発現低下(P<0.01、P<0.05)、血清HDL-Cレベル上昇(P<0.01)、p-YAP蛋白発現増加(P<0.01)を示した。結論として、隔薬餅灸とアトルバスタチンの併用は相乗効果を有し、ASマウスの血脂レベルを調節し、大動脈内皮損傷を軽減し炎症反応を抑制し、その作用は大動脈integrin/YAP/JNK信号経路の調節と関連すると考えられる。

关键词

隔薬餅灸;動脈硬化;ApoE⁻/⁻マウス;インテグリン αVβ3;Yes関連タンパク質;c-Jun N末端キナーゼ

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