電鍼が機能性便秘マウスの結腸ミトコンドリア未折りたたみタンパク反応関連タンパクに及ぼす影響

Wang Wen ,  

Li Yanqiu ,  

Zeng Weijian ,  

Yan Xiangyun ,  

He Zhaoxuan ,  

Xiao Xianjun ,  

Li Ying ,  

Yao Junpeng ,  

摘要

目的は、電鍼「天枢」「上巨虚」が機能性便秘(FC)モデルマウスの結腸ミトコンドリアの未折りたたみタンパク反応(UPRmt)関連タンパクの発現に及ぼす影響を観察し、電鍼がFC症状を改善する潜在的なメカニズムを検討することである。方法:18匹の雄性C57BL/6Jマウスを無作為に対照群、モデル群、電鍼群に分け、それぞれ6匹ずつとした。ロペラミド経口投与により14日間でFCモデルマウスを作製した。電鍼群は一側の「天枢」と「上巨虚」に交互に電鍼介入(疎密波、3 Hz/15 Hz)を行い、週5回、計10回の連続治療を行った。対照群とモデル群は同様に固定のみを行った。マウスの胃腸機能は、初回青便排出時間、6時間排便粒子数、便性状スコア、便水分率、小腸通過率で評価した。結腸組織の病理変化はHE染色で観察し、透過型電子顕微鏡でミトコンドリアの超微細構造を観察した。フローサイトメトリーで結腸組織のミトコンドリア膜電位および活性酸素(mtROS)レベルを測定し、比色法で結腸組織のミトコンドリアATP含量を測定した。免疫組織化学法でUPRmtの主要マーカーである熱ショックタンパク60(HSP60)およびLONプロテアーゼ1(LONP1)の結腸組織での発現状況を検出した。結果:対照群と比較して、モデル群マウスは初回青便排出時間の延長(P<0.01)、6時間内の排便粒子数の減少(P<0.01)、便性状スコア、便水分率および小腸通過率の低下(P<0.01,P<0.05)が認められた。結腸組織ミトコンドリアは著明な腫脹、膜損傷、稜断裂が見られ、ミトコンドリア膜電位は低下した(P<0.01)。ATP含量は低下し(P<0.01)、mtROSレベルは上昇した(P<0.01)。結腸平滑筋細胞(SMC)におけるHSP60、LONP1タンパク陽性発現は減少した(P<0.01)。介入後、モデル群と比較して、電鍼群は初回青便排出時間が短縮し(P<0.01)、6時間排便粒子数が増加し(P<0.01)、便性状スコア、便水分率および小腸通過率が上昇した(P<0.01,P<0.05)。結腸組織ミトコンドリアは軽度の腫脹を示し、膜および稜の損傷は著明に改善し、ミトコンドリア膜電位は上昇した(P<0.01)。ATPレベルは上昇し(P<0.01)、mtROSレベルは低下した(P<0.01)。SMCにおけるHSP60およびLONP1陽性発現は上昇した(P<0.05)。結論:電鍼「天枢」「上巨虚」はFCマウスの腸管輸送機能を有効に促進し、結腸SMCミトコンドリアの構造および機能を修復し、その機序はSMCにおけるHSP60およびLONP1の発現上昇に関連し、それによりUPRmtが活性化されると考えられる。

关键词

電鍼;機能性便秘;ミトコンドリア;未折りたたみタンパク反応;熱ショックタンパク60;LONプロテアーゼ1

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