目的は、孤束核（NTS）内のチロシンヒドロキシラーゼ（TH）神経細胞および青斑核（LC）が電気鍼によるAPP/PS1マウスの血液脳関門（BBB）損傷改善に果たす役割を観察し、電気鍼によるアルツハイマー病（AD）の予防・治療におけるNTS^TH-LC神経回路のメカニズムを検討することである。方法（1）4ヶ月齢の雄性C57BL/6マウス8匹を対照群とし、同月齢の雄性APP/PS1マウス16匹をモデル群と電気鍼群（n=8）にランダムに分けた。電気鍼群には“内関”と“間使”のツボに隔日で刺激を行い、計4週間実施した。介入終了後、モリス水迷路と新規物体識別試験により各群マウスの学習・記憶能力を評価し、ウエスタンブロット法で海馬のオクルディン（Occludin）、クローディン-5（Claudin-5）、ゾーンオクルディン-1（ZO-1）の発現レベルを検出し、免疫蛍光染色法でNTSおよびLCにおけるTH/c-Fos共局在、LCにおけるTH/ノルアドレナリン（NE）共局在の発現状況を検出した。（2）TH-creマウス5匹にLCへ逆行性トレーシングウイルスを注入し、NTS内のTH神経細胞がLCに投射するかどうかを観察した。（3）7ヶ月齢のAPP/PS1マウス21匹にNTSへ化学遺伝学的活性化ウイルス（AAV2/9-hSyn-DIO-hM3D-mCherry-WPRE-hGH-pA）または空ウイルス（AAV2/9-Ef1α-DIO-mCherry-WPRE-hGH-pA）を注入し、LCにAAVretro-TH-CRE-WPRE-hGH-pAウイルスを注入した。ウイルス発現21日後、空ウイルス注入群（n=6）は空ウイルス＋クロロプロマジン-N-オキシド（CNO）＋電気鍼群（mCherry+CNO+EA）とし、活性化ウイルス注入マウスから3匹を脳スライス電位固定記録に用いてウイルス機能を検証、残りは2群（n=6）にランダム分割し、活性化ウイルス+CNO+電気鍼群（hM3D+CNO+EA）、活性化ウイルス＋生理食塩水＋電気鍼群（hM3D+saline+EA）とした。各群で“内関”“間使”に毎日1回計15日間電気鍼を施した。介入終了後、モリス水迷路、新規物体識別試験により学習・記憶能力を評価し、EB染色法で脳組織のBBB透過性を検出、免疫蛍光染色法でLCにおけるTH/c-Fos、TH/NE共局在発現を観察した。結果（1）対照群と比較し、モデル群は学習・記憶能力が著明に低下（P<0.01）、海馬のOccludin、Claudin-5、ZO-1タンパク発現が明らかに減少（P<0.01）、NTSおよびLCにおけるTH/c-Fos共局在とLCのTH/NE共局在が顕著に増加（P<0.01）した。モデル群と比較し、電気鍼群は学習・記憶能力が向上（P<0.05，P<0.01）、海馬のOccludin、Claudin-5、ZO-1タンパク発現が明らかに増加（P<0.01）、NTSおよびLCにおけるTH/c-Fos共局在およびLCのTH/NE共局在が減少（P<0.01，P<0.05）した。（2）逆行性トレーシングウイルスによりNTS内のTH神経細胞がLCへ投射することを証明した。（3）mCherry+CNO+EA群およびhM3D+saline+EA群と比較し、hM3D+CNO+EA群は学習・記憶能力が著明に低下（P<0.01）、脳組織のEB含有量およびLCにおけるTH/c-Fos共局在・TH/NE共局在が明らかに増加（P<0.01）した。結論 電気鍼による“内関”“間使”の刺激はADマウスのBBB損傷および学習記憶機能障害を改善し、その作用機序はNTS^TH-LC神経回路の活性化抑制に関与している可能性がある。

アルツハイマー病;電気鍼;孤束核;青斑核;チロシンヒドロキシラーゼ神経;ノルアドレナリン;血液脳関門